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荧光定量PCR与焦磷酸测序联合应用检测异烟肼、利福平耐药性结核分枝杆菌
被引量:
4
1
作者
程弘夏
柳建银
+2 位作者
周立
王业富
唐景峰
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2013年第9期1328-1333,共6页
目的联合运用荧光定量PCR和焦磷酸测序技术快速检测异烟肼、利福平耐药性结核分枝杆菌。方法收集结核病疑似患者痰液样本,提取样本总DNA,运用Taqman荧光定量PCR对结核分枝杆菌的感染进行快速筛查。对检测结果为阳性的样本,采用焦磷酸测...
目的联合运用荧光定量PCR和焦磷酸测序技术快速检测异烟肼、利福平耐药性结核分枝杆菌。方法收集结核病疑似患者痰液样本,提取样本总DNA,运用Taqman荧光定量PCR对结核分枝杆菌的感染进行快速筛查。对检测结果为阳性的样本,采用焦磷酸测序法分别对异烟肼、利福平耐药结核分枝杆菌相关基因katG、rpoB的突变热点进行测序分析,与标准菌株序列比对,判断结核分支杆菌异烟肼、利福平的药敏性。采取Bactec 960药敏法鉴定结核分枝杆菌耐药性,并与焦磷酸测序法药敏检测结果进行比较,评估焦磷酸测序法的可靠性。结果荧光定量PCR技术检测痰液样本结核分枝杆菌的准确率达98.95%,检测时间约3 h;以Bactec 960药敏法鉴定结果为标准,焦磷酸测序法对结核分枝杆菌异烟肼、利福平的药敏鉴定结果准确性分别达93.75%和96.15%,其中,对耐药菌株判断,两种方法的一致性高达98%。结论采用荧光定量PCR检测技术可快速、准确地进行结核分枝杆菌感染筛查,运用焦磷酸测序技术则可快速准确地筛查出耐药样本,从痰液样本采集到结核分枝杆菌感染筛查以及药敏报告发布,全程仅需7 h;耐药菌株的检测可靠性达98%。
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关键词
荧光定量聚合酶链反应
焦磷酸测序
异烟肼
利福平
耐药性
结核分枝杆菌
原文传递
题名
荧光定量PCR与焦磷酸测序联合应用检测异烟肼、利福平耐药性结核分枝杆菌
被引量:
4
1
作者
程弘夏
柳建银
周立
王业富
唐景峰
机构
武汉理工大学华夏学院化学与制药工程系
基因诊断与肿瘤个性化治疗湖北工程研究中心
武汉大学病毒学国家重点实验室
武汉大学动物实验中心/ABSL-Ⅲ实验室
武汉百泰基因工程有限公司
出处
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2013年第9期1328-1333,共6页
基金
"艾滋病与病毒性肝炎等重大传染病防治"科技重大专项(2009ZX10004-006)
文摘
目的联合运用荧光定量PCR和焦磷酸测序技术快速检测异烟肼、利福平耐药性结核分枝杆菌。方法收集结核病疑似患者痰液样本,提取样本总DNA,运用Taqman荧光定量PCR对结核分枝杆菌的感染进行快速筛查。对检测结果为阳性的样本,采用焦磷酸测序法分别对异烟肼、利福平耐药结核分枝杆菌相关基因katG、rpoB的突变热点进行测序分析,与标准菌株序列比对,判断结核分支杆菌异烟肼、利福平的药敏性。采取Bactec 960药敏法鉴定结核分枝杆菌耐药性,并与焦磷酸测序法药敏检测结果进行比较,评估焦磷酸测序法的可靠性。结果荧光定量PCR技术检测痰液样本结核分枝杆菌的准确率达98.95%,检测时间约3 h;以Bactec 960药敏法鉴定结果为标准,焦磷酸测序法对结核分枝杆菌异烟肼、利福平的药敏鉴定结果准确性分别达93.75%和96.15%,其中,对耐药菌株判断,两种方法的一致性高达98%。结论采用荧光定量PCR检测技术可快速、准确地进行结核分枝杆菌感染筛查,运用焦磷酸测序技术则可快速准确地筛查出耐药样本,从痰液样本采集到结核分枝杆菌感染筛查以及药敏报告发布,全程仅需7 h;耐药菌株的检测可靠性达98%。
关键词
荧光定量聚合酶链反应
焦磷酸测序
异烟肼
利福平
耐药性
结核分枝杆菌
Keywords
Fluorescent quantitative polymerase reaction
Pyrosequencing
Isoniazid
Rifampicin
Resistance
Mycobacteriumtuberculosis (MTB)
分类号
R969.3 [医药卫生—药理学]
Q789 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
荧光定量PCR与焦磷酸测序联合应用检测异烟肼、利福平耐药性结核分枝杆菌
程弘夏
柳建银
周立
王业富
唐景峰
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2013
4
原文传递
已选择
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参考文献
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