腹腔肝细胞移植治疗大鼠急性肝功能衰竭

目的观察腹腔肝细胞移植(HCT)治疗大鼠急性肝功能衰竭(ALF)疗效。方法取10只大鼠用胶原酶消化法分离肝细胞;另取50只大鼠随机分为A组20只、B组20只、C组10只。A、B组均采用D-氨基半乳糖(D-GalN)制作ALF模型,造模后分别腹腔注射肝细胞悬液2.5 ml/只、不含肝细胞的培养液2.5 ml/只;C组不予任何处理。观察移植后48 h肝功能情况、肝脏病理改变及7 d存活率。结果A、B组ALT、AST、AMM均高于C组(P均<0.01),但A、B组间比较,P>0.05;A组7 d存活率为50.00%,B组为14.28%,两组比较,P<0.01。A组7 d肝小叶结构基本恢复正常,仅见少量肝细胞脂肪样变性,汇管区见少量炎性细胞;B组肝小叶结构仍紊乱,较多细胞呈脂肪样变性,可见较多炎性细胞浸润。结论经腹腔HCT治疗D-GalN诱导的大鼠ALF有效。

Oddi括约肌松弛合并胆总管结石复发的手术治疗体会

目的探讨Oddi括约肌松弛合并胆总管结石复发的手术治疗方案。方法胆总管复发结石合并Oddi括约肌松弛342例(均行数次胆道手术,胆囊均已切除),根据手术治疗方式不同分为三组,Ⅰ组281例,行横断胆管+胆肠Roux-en-Y吻合术,Ⅱ组40例,行开腹或腔镜胆总管切开取石+T管引流术,Ⅲ组21例,行ERCP术,比较3种手术方式的治疗效果。结果Ⅰ组结石复发率、胆管炎发生率均低于Ⅱ组和Ⅲ组(P<0.05),复发平均时间则晚于Ⅱ组和Ⅲ组(P<0.05),而Ⅱ组和Ⅲ组结石复发率、胆管炎发生率及复发平均时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。胆肠Roux-en-Y吻合术的治疗总有效率高于胆总管切开取石+T管引流术和ERCP术(P<0.05),而胆总管切开取石术治疗总有效率与ERCP术比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论横断胆管+胆肠Roux-en-Y吻合术是目前治疗Oddi括约肌松弛合并复发胆管结石较有效的手术方案。

腹腔镜直肠癌手术中应用超声刀切除肠系膜的可行性及安全性

目的探讨在腹腔镜下行直肠癌手术治疗中采用超声刀进行全直肠系膜切除的可行性及安全性。方法回顾性分析本院胃肠外科2011年3月至2013年9月收治的83例腹腔镜下手术治疗的直肠癌患者的手术资料,根据术中切除直肠系膜的方法分为超声刀组44例和高频电刀组39例,比较2组患者术中、术后相关指标的差异,并分析2组患者的术后并发症差异。结果所有患者在腹腔镜下成功完成手术治疗,超声刀组的手术时间(221.6±48.7)min、术中出血量(64.2±39.5)m L均显著低于高频电刀组的手术时间(284.3±52.4)min、术中出血量(98.7±49.3)m L(P<0.05);超声刀组的术中淋巴结清扫数目(7.8±2.7)枚显著高于高频电刀组的(5.2±2.2)枚(P<0.05)。2组患者的肛门排气时间、术后住院时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。比较使用超声刀或高频电刀的第15 min、30 min、45 min的CO、丙烯氰类有害气体,超声刀组患者的CO、丙烯氰类有害气体量均显著低于高频电刀组(P<0.05)。2组患者的手术并发症发生率比较差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论腹腔镜下行直肠癌手术治疗中,采用超声刀进行全直肠系膜切除较高频电刀具有缩短手术时间、减少术中出血量、同时减少术中有害气体释放的优势,其应用具有较好的可行性和安全性。

云南:西双版纳检验检疫局查获香蕉检疫性有害生物

本刊讯 日前西双版纳检验检疫局从旅客非法携带的香蕉种苗中检出多种检疫性有害生物,经中国检验检疫科学研究院确认,这些有害生物系全国首次截获.据介绍,5月27日,西双版纳检验检疫局大勐龙办事处检疫人员在对人境车辆例行检查时发现,其中一辆车的后备箱中非法携带国家明令禁止的香蕉种苗,依法予以截留,并将截留物送至云南检验检疫局技术中心进行有害生物检测.

肝细胞脾内移植治疗大鼠肝衰竭

目的:优化急性肝衰竭模型的构建方法及探讨经脾内同种异体肝细胞移植治疗大鼠急性药物性肝衰竭的疗效,并观察脾内移植肝细胞的生物学活性。方法:采用D-氨基半乳糖(D-gal)建立大鼠急性药物性肝衰竭模型。腹腔注射不同剂量的(1.0,1.2,1.4,1.6g/kg)D-gal后,以肝功能指标、病理形态学、死亡率等综合评估肝脏细胞损伤的状态,确定模型构建的最佳方案。造模后24h,随机分为2组进行治疗,Ⅰ组:经脾内移植肝细胞悬液1ml(4.4×107个);Ⅱ组:经脾内移植不含肝细胞的培养液1ml。观察大鼠1周的存活率、肝脏功能和病理变化及移植肝细胞的生物学活性。结果:①不同剂量的D-gal可导致不同程度的肝损伤,而以1.2g/kgD-gal造模组的大鼠死亡率适中,肝功能损害及其肝脏病理组织学改变均符合临界急性肝衰竭的程度,较好地模拟了急性肝衰竭的病理生理改变且稳定性较好。②移植后3d,Ⅰ组与Ⅱ组大鼠存活率相比具有显著性差异(P<0.01);肝功能指标:丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBiL)均有明显改善(P<0.01);肝组织病理切片显示:Ⅰ组的肝组织损伤程度明显比Ⅱ组轻。经HE和PAS染色证实,移植的肝细胞在受体脾内结构和功能保持较好。结论:①D-gal1.2g/kg腹腔注射可较好构建SD大鼠急性肝衰竭模型。②经脾内肝细胞移植能明显提高药物性肝衰竭大鼠的存活率、改善肝功能及肝组织病理变化。

miR-486-5p通过负向调控AMPK/Sirt1信号通路参与肝细胞性肝癌细胞增殖

目的:探究miR-486-5p在肝细胞性肝癌(HCC)中的变化及其调节HCC细胞系增殖的可能机制。方法:q-PCR法检测98例健康人血浆和87例HCC患者组织与血浆miR-486-5p含量,并采用Pearson相关性分析其与甲胎蛋白(AFP)升高的相关性,同时检测人HCC癌细胞系SMMC-7721、Bel-7402、MHCC97、HepG2、Hep3B、Huh-7、MS751和正常肝细胞LO2细胞及转染0,25,50,100μmol/L miR-486-5p类似物(miR-486-5p mimic) 24 h后LO2、MHCC97、HepG2和Huh-7细胞的miR-486-5p含量;CCK-8法检测转染miR-486-5p类似物2,12,24,48,72 h的LO2、MHCC97、HepG2和Huh-7细胞的增殖率;Western Blot检测Cyclin D1、Cyclin E1、CDK4、CDK6、p-AMPK、AMPK和Sirt1蛋白表达量;qPCR检测转染CCND1、CCNE、CDK4、CDK6 mRNA表达量。结果:HCC患者癌组织miR-486-5p含量明显低于癌旁组织,血浆中miR-486-5p含量明显低于正常人;HCC患者癌组织和血浆中miR-486-5p含量与血浆AFP含量呈显著负相关性,相关系数分别为-0. 1554和-0. 2228(P<0. 001);除Huh-7细胞外,人HCC癌细胞系SMMC-7721、Bel-7402、MHCC97、HepG2、Hep3B和MS751细胞中miR-486-5p含量明显低于LO2细胞(P<0. 05);相比于阴性对照类似物(NC)处理组,0至100μmol/L的miR-486-5p类似物处理LO2和Huh-7细胞24 h组的miR-486-5p水平均没有明显的变化(P>0. 05),50μmol/L和100μmol/L的miR-486-5p类似物处理24 h的MHCC97和HepG2细胞,相比于NC处理组,其miR-486-5p水平均显著增加(P<0. 05);miR-486-5p类似物处理LO2组的增殖率相比于NC和Control组无明显的变化。相比于NC和Control组,miR-486-5p类似物处理HepG2和MHCC97细胞24 h的增殖率相比于2 h的显著降低,分别为(77. 70±7. 53)%和(86. 61±1. 08)%。且具有时间依赖性。而miR-486-5p类似物处理Huh-7细胞48 h组增殖率为(84. 79±2. 33)%,明显低于2 h组;miR-486-5p类似物转染HepG2和MHCC97细胞24 h的Cyclin D1、Cyclin E、CDK6蛋白与mRNA表达量明显低于NC组(P<0. 05),HepG2的miR-486-5p类似物处理CDK4相比于NC组无明显变化(P>0. 05),MHCC97的miR-486-5p类似物组CDK4相比于NC组明显降低(P<0. 05)。p-AMPK与Sirt1蛋白水平均明显低于NC组。结论:过表达miR-486-5p通过下调p-AMPK/Sirt1通路阻断HCC肿瘤细胞细胞周期,并抑制癌细胞增殖。

脂氧素A4调控肝癌细胞缺氧诱导因子-1α的表达

目的:探讨在营养剥夺环境下,脂氧素A4对肝癌细胞缺氧诱导因子-1α表达的影响及机制。方法:以Hanks平衡盐缓冲液对肝癌细胞系HepG2和BEL7402细胞进行营养剥夺培养8h,并联合脂氧素A4(100nmol/L)孵育8h,应用免疫蛋白印迹检测脂氧素A4对营养剥夺条件下,肝癌细胞缺氧诱导因子-1α和细胞因子信号转导抑制蛋白表达的影响。同时构建转染针对细胞因子信号转导抑制蛋白的siRNA,观察营养剥夺条件下,细胞因子信号转导抑制蛋白沉默前后,脂氧素A4对肝癌细胞缺氧诱导因子-1α表达的影响。结果:脂氧素A4能显著诱导HepG2和BEL7402肝癌细胞表达细胞因子信号转导抑制蛋白,但明显抑制Hanks平衡盐缓冲液诱导的缺氧诱导因子-1α表达。在应用siRNA沉默细胞因子信号转导抑制蛋白表达后,脂氧素A4在营养剥夺条件下对缺氧诱导因子-1α表达的抑制作用明显减弱。结论:在营养剥夺条件下,脂氧素A4通过诱导细胞因子信号转导抑制蛋白表达抑制肝癌细胞表达缺氧诱导因子-1α。

甲泼尼龙琥珀酸钠治疗新型冠状病毒肺炎的有效窗口期

目的:探讨小剂量甲泼尼龙琥珀酸钠治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)有效窗口期,为指导COVID-19患者的临床用药提供参考依据。方法:回顾本院4个发热病区288例患者中112例由轻型、普通型转重型、危重型而使用小剂量甲泼尼龙琥珀酸钠治疗COVID-19的情况,并进行数据整理分析。结果:2020年1月23日—2月29日本院住院期间轻型、普通型转重型、危重症型112例患者中,87例在加重48 h内(Ⅰ组)使用甲泼尼龙琥珀酸钠治疗,25例在48 h后(Ⅱ组)使用甲泼尼龙琥珀酸钠治疗。①轻型、普通型转重症、危重症型时间节点判断:临床症状及体征陡然加重、血氧饱和度下降≤93%或氧合指数≤300 mmHg、必须持续辅助性吸氧、胸部CT提示肺部感染病灶呈现进展型表现等。②对比Ⅰ组与Ⅱ组治疗新型冠状病毒性肺炎的治愈率、死亡率:Ⅰ组的治愈率达到96.55%,死亡率3.44%,而Ⅱ组治愈率20%,死亡率80%;经过统计学分析,Ⅰ组的治愈率明显高于Ⅱ组,而Ⅱ组死亡率明显高于Ⅰ组(P<0.05)。结论:小剂量甲泼尼龙琥珀酸钠治疗COVID-19最佳窗口期为轻型及普通型转重型后48 h内。只有充分准确判断窗口期、及时采取干预措施,才能明显降低患者危重症率、死亡率,提高治愈率。一旦错过最佳干预窗口期,则小剂量甲泼尼龙琥珀酸钠治疗效果无法达到预期目的。