养猪环境中携带耐药基因金黄色葡萄球菌气溶胶的发生与传播

人们对猪场养殖环境中金黄色葡萄球菌气溶胶的发生及传播已经有了较全面的认识,但是对气载金黄色葡萄球菌耐药基因的传播了解较少。因此,笔者从6个猪场猪只粪便及猪舍内、外环境空气样品中分离到149株金黄色葡萄球菌,采用15种抗菌药进行耐药性调查,并对其进行REP-PCR溯源鉴定。选择同源性为100%的菌株进行耐药基因的携带状况及传播调查。结果显示,分离的金黄色葡萄球菌中5.4%(8/149)的菌株对甲氧西林类药物耐药即为MRSA(methicillin-resistant Staphylococcus aureus),94%(140/149)的菌株对复方新诺明耐药,78.5%(117/149)的菌株对青霉素耐药,66.4%(99/149)的菌株对红霉素耐药,75.2%(112/149)的菌株对四环素耐药,对其它药物也存在不同程度的耐药,但是对万古霉素完全敏感。此外,这些金黄色葡萄球菌菌株还呈现多重耐药,4～6重耐药的菌株居多,分别达到16.1%(24/149)、32.9%(49/149)、14.8%(22/149),9重耐药菌有3株。REP-PCR溯源鉴定结果相同的菌株,所携带的耐药基因tetM、meeA、ermC、ermA、aac(6')-aph(2")的类型也相同。由此可知,猪体产生的具有耐药基因的金黄色葡萄球菌能够形成气溶胶,并且能够借助舍内、外的气体交换传播到舍外环境中去,视气象条件扩散到一定的距离,不仅导致传染病的流行,而且对社区的公共卫生形成威胁。

不同养殖环境对商品肉鸡免疫功能的影响

将体质量基本一致的健康1日龄AA肉鸡320只,随机分为对照组和试验组,饲养在环境管理条件不同的2个鸡舍中。通过定期测定气载细菌、真菌、内毒素等气溶胶的含量和新城疫抗体水平与免疫器官指数等肉鸡免疫方面的功能来研究不同的养殖环境对商品肉鸡免疫功能的影响。结果表明,试验组的微生物含量显著高于对照组;对照组的新城疫抗体水平高于试验组,在35、42、49日龄时差异显著;与对照组相比,试验组鸡只的脾脏指数显著降低,胸腺指数极显著降低,法氏囊指数降低不明显。由此可见,鸡舍环境质量差、微生物气溶胶含量高,对鸡体的ND抗体效价和免疫器官的发育功能会产生负面影响。故而,保持饲养环境良好的清洁卫生条件,是健康养殖的重要措施之一。

不同养殖环境对肉鸡健康和生产性能的影响

【目的】比较不同养殖环境对肉鸡健康和生产性能的影响。【方法】选用1日龄健康AA(Arbor Acres)雏鸡320只,随机分成试验组和对照组,每组4个重复,进行为期7周的饲养试验。在不同的鸡舍环境管理条件下,定期测定气载需氧菌、气载真菌和气载内毒素含量,并对鸡只生产性能和健康指标(外观和步态)进行测定,分析鸡舍环境参数与鸡只健康指标和生产性能的关系。【结果】在整个生长周期中,试验组鸡舍内的气载需氧菌和气载真菌含量分别达到(2.9~5.1)×106和(2.8~5.6)×105CFU/m3,对照组分别为(6.6~16.0)×105和(7.7~8.3)×104CFU/m3,生长后期(30日龄后),试验组气载需氧菌和气载真菌含量均显著高于对照组(P<0.05);试验组和对照组气载内毒素含量分别为(2.3~16.0)×103和(2.4~3.1)×103EU/m3,差异不显著(P>0.05);肉鸡舍气载微生物和内毒素含量对肉鸡的生产性能、胴体性状及外观和步态均有一定影响,气载微生物和内毒素含量较低的肉鸡舍,可显著提高肉鸡的平均日增质量、全净膛率(P<0.05),极显著提高屠宰质量和胸肌率(P<0.01),改善外观和步态(...

猪舍环境中金黄色葡萄球菌耐药性及其在舍内外环境中的传播

为检测各猪场中金黄色葡萄球菌对抗生素的耐药程度,分析耐药性在舍内外的传播,从6个养猪场的猪粪便及猪舍内、外环境空气中分离到149株金黄色葡萄球菌,通过K-B纸片扩散法对其耐药性进行检测。结果发现,从6个猪场的粪便和空气样品中分离到的金黄色葡萄球菌菌株的耐药情况十分严重。此外,分离到的金黄色葡萄球菌菌株还呈现多重耐药,4～6重耐药的菌株居多,分别达16.1%(24/149)、32.9%(49/149)、14.8%(22/149),9重耐药菌有3株。尤其值得注意的是,从养猪场猪粪便及猪舍内、外环境空气(上风向10、50 m,下风向10、50、100、200 m)分离的部分菌株其耐药性完全相同。结果证明,猪体产生的具有耐药性的金黄色葡萄球菌能产生气溶胶,并且能够借助舍内外的气体交换传播到舍外环境中去,视气象条件扩散一定的距离,不仅导致传染病的流行,而且对社区的公共卫生形成威胁。

一种快速鉴定猪舍空气样品中金黄色葡萄球菌的方法

显色培养基是一种新的微生物培养检测技术,通过它与普通PCR技术的结合能够快速而准确地鉴定金黄色葡萄球菌。首先用安德森采样器采集猪舍中的空气样品,采样介质是金黄色葡萄球菌显色培养基,通过培养并继续分离后刮取菌苔并煮沸后进行PCR扩增。结果在用显色培养基分离的菌中有84.4%的菌是金黄色葡萄球菌。并通过API20E标准生化鉴定系统分析鉴定所得菌株,证明用此种方法所得结果与API20E标准生化鉴定系统分析鉴定所得菌株的符合率高达96.4%。因此显色培养基与普通PCR结合是一种快速准确地鉴定空气中金黄色葡萄球菌的方法。

脂联素受体激动剂AdiopRon对胶质瘤细胞生物学行为的影响及其机制

目的:探讨脂联素受体激动剂AdipoRon对胶质瘤细胞生物学行为的影响,阐明其可能的作用机制。方法:取对数生长期的神经胶质瘤U251和U87 MG细胞分为对照组(0μmol·L^(-1) AdipoRon)和20、40、60、80及100μmol·L^(-1) AdipoRon组,CCK-8法检测24、48和72 h时各组细胞增殖率。U251和U87 MG细胞分为对照组(0μmol·L^(-1))和40、60及80μmol·L^(-1) AdipoRon组,细胞克隆形成实验检测各组细胞克隆形成率,划痕愈合实验检测各组细胞划痕愈合率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率及不同细胞周期细胞百分率,Western blotting法检测各组细胞中AMP依赖蛋白激酶(AMPK)和磷酸化AMPK(p-AMPK)蛋白表达水平。将U251细胞分为shNC对照组(未处理)、shNC组(经40μmol·L^(-1) AdipoRon处理,未敲低)、AdipoR1敲低组(经40μmol·L^(-1) AdipoRon处理,敲低AdipoR1)、AdipoR2敲低组(经40μmol·L^(-1) AdipoRon处理,敲低AdipoR2)和AdipoR1+AdipoR2共同敲低组(经40μmol·L^(-1) AdipoRon处理,敲低AdipoR1和AdipoR2)。CCK-8法检测各组U251细胞增殖率,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组U251细胞中AdiopR1和AdiopR2 mRNA表达水平。结果:与对照组比较,24、48和72 h时,不同浓度AdipoRon组U251和U87 MG细胞增殖率明显降低(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,40、60和80μmol·L^(-1) AdipoRon组U251和U87 MG细胞克隆形成率明显降低(P<0.01);与对照组比较,作用48 h时,40、60和80μmol·L^(-1) AdipoRon组U251和U87 MG细胞划痕愈合率降低(P<0.01);与对照组比较,60和80μmol·L^(-1) AdipoRon组U251细胞及80μmol·L^(-1) AdipoRon组U87 MG细胞凋亡率升高(P<0.01),40、60和80μmol·L^(-1) AdipoRon组U251和U87 MG细胞中G0/G1期细胞百分率升高(P<0.01);与对照组比较,60和80μmol·L^(-1) AdipoRon组U251细胞中p-AMPK蛋白表达水平升高(P<0.01),40、60和80μmol·L^(-1) AdipoRon组U87 MG细胞中p-AMPK蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01)。与shNC对照组比较,AdipoR1敲低组细胞中AdipoR1 mRNA表达水平降低(P<0.01),AdipoR2敲低组细胞中AdipoR2 mRNA表达水平降低(P<0.01)。与shNC对照组比较,经40μmol·L^(-1) AdipoRon作用后,敲低AdipoR1组、敲低AdipoR2组和AdipoR1+AdipoR2共同敲低组U251细胞增殖率均升高(P<0.05或P<0.01)。结论:AdipoRon可抑制神经胶质瘤细胞增殖、迁移和凋亡,并将细胞周期阻滞在G0/G1期,其作用机制可能是AdipoRon与脂联素受体AdipoR1和AdipoR2相互作用后促进AMPK磷酸化,从而影响胶质瘤细胞的生物学行为。