依普拉芬在牵张成骨中的作用

背景:有研究表明适宜浓度的依普拉芬可以促进鸡胚额骨成骨细胞增殖与分化,提高其碱性磷酸酶活性,增强成骨细胞矿化能力,促进骨形成。目的:观察依普拉芬在用种植型牵张器对兔下颌牵张时成骨的影响。方法:选择日本大耳白兔建立下颌骨牵张成骨动物模型,再用依普拉芬干预。于牵张后1d,1,2,4周取材,进行血清学检查,并采用免疫组织化学方法观察转化生长因子β1在不同时间段的表达情况。结果与结论:依普拉芬干预的模型兔在牵张后1d,1,2,4周的骨小梁逐渐形成,成骨细胞逐渐增多,血清碱性磷酸酶活性和转化生长因子β1的表达均增高(P<0.05)。结果证实依普拉芬在牵张成骨中可有效加速新骨的形成。

circBACH1靶向miR-4500调控口腔鳞状细胞癌HSC3细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制研究

目的:探讨circBACH1对口腔鳞状细胞癌HSC3细胞生物学行为的影响及其可能作用机制。方法:体外培养HSC3细胞,分为si-NC组、si-circBACH1组、miR-NC组、miR-4500组、si-circBACH1+anti-miR-NC组、si-circBACH1+anti-miR-4500组,分别转染si-NC、si-circBACH1、miR-NC、miR-4500 mimics、si-circBACH1与anti-miR-NC、si-circBACH1与anti-miR-4500。qRT-PCR检测口腔鳞状细胞癌组织、癌旁组织及各组HSC3细胞中circBACH1、miR-4500的表达量;CCK-8、平板克隆形成实验分别检测细胞增殖及克隆形成能力;划痕实验与Transwell小室实验分别检测细胞迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告基因实验检测circBACH1对miR-4500的靶向调控作用;Western blotting检测E-cadherin、N-cadherin的蛋白表达量。结果:与癌旁组织比较,口腔鳞状细胞癌组织中circBACH1的表达量明显升高(P<0.01),miR-4500的表达量明显降低(P<0.01)。与si-NC组比较,si-circBACH1组HSC3细胞活力明显降低(P<0.01),细胞克隆形成数和侵袭细胞数均明显减少(P<0.01),划痕愈合率和N-cadherin蛋白水平均明显降低(P<0.01),E-cadherin蛋白水平明显升高(P<0.01)。与miR-NC组比较,miR-4500组HSC3细胞活力明显降低(P<0.01),细胞克隆形成数和侵袭细胞数均明显减少(P<0.01),划痕愈合率和N-cadherin蛋白水平均明显降低(P<0.01),E-cadherin蛋白水平明显升高(P<0.01)。WT-circBACH1与miR-4500 mimics共转染组HSC3细胞的荧光素酶活性明显低于WT-circBACH1与miR-NC共转染组(P<0.01)。qRT-PCR实验结果显示,与pcDNA组比较,pcDNA-circBACH1组miR-4500的表达量降低(P<0.05);与si-NC组比较,si-circBACH1组miR-4500的表达量升高(P<0.05)。与si-circBACH1+anti-miR-NC组比较,si-circBACH1+anti-miR-4500组HSC3细胞活力明显升高(P<0.01),细胞克隆形成数和侵袭细胞数均明显增多(P<0.01),划痕愈合率和N-cadherin蛋白水平均明显升高(P<0.01),E-cadherin蛋白水平明显降低(P<0.01)。结论:干扰circBACH1表达可通过负向调控miR-4500的表达从而抑制口腔鳞状细胞癌HSC3细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭。

口腔鳞癌组织中LINC01605的表达及对细胞侵袭、迁移的影响

目的:探究LINC01605在口腔鳞癌组织中的表达及对细胞侵袭、迁移的影响。方法:收集口腔鳞癌病人的口腔鳞癌组织及相对应的癌旁组织标本各40例,分析口腔鳞癌组织中LINC01605的表达与临床病理特征的关系。将处于对数期的口腔鳞癌细胞CAL-27随机分为:CK组(正常培养)、si-NC组(转染si-NC)、si-LINC01605组(转染si-LINC01605)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-LINC01605组(转染pcDNA-LINC01605);qRT-PCR检测组织和细胞中LINC01605表达;CCK-8法检测细胞增殖;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;Transwell实验检测细胞侵袭;划痕实验检测细胞迁移;Western blotting检测细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、神经型钙黏素(N-cadherin)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)表达;体内移植瘤实验检测肿瘤生长情况。结果:口腔鳞癌组织中LINC01605表达高于癌旁组织(P<0.01);LINC01605表达与TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05~P<0.01);与CK组、si-NC组比较,si-LINC01605组CAL-27细胞中吸光度值、克隆形成率、侵袭细胞数目、划痕愈合率、PCNA、MMP-2、MMP-9、N-cadherin蛋白表达及裸鼠体内移植瘤质量均降低(P<0.01),E-cadherin蛋白表达升高(P<0.01);与CK组、pcDNA组比较,pcDNA-LINC01605组CAL-27细胞中对应指标变化趋势与上述相反(P<0.01)。结论:LINC01605在口腔鳞癌组织中高表达,沉默LINC01605可抑制CAL-27细胞侵袭和迁移。