miR-146a通过靶向CCNJ调控鼻咽癌细胞HNE-1/DDP对顺铂敏感性的影响

目的探讨miR-146a对鼻咽癌耐顺铂细胞HNE-1/DDP顺铂敏感性的作用及可能机制。方法实验分空白组、阴性对照组及mimics-miR-146a组。MTT检测HNE-1/DDP细胞在不同方法处理后的增殖抑制作用;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况;Western blot检测周期蛋白CCNJ、MRP1、P-gp的相对表达水平;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CCNJ mRNA的相对表达水平。结果与其他两组相比,mimics-miR-146a组存活率降低,凋亡率升高,MRP1、P-gp、CCNJ蛋白表达量降低,CCNJ mRNA的相对表达量降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miR-146a可增加HNE-1/DDP对DDP的敏感性,机制可能是miR-146a抑制CCNJ的表达而调控下游蛋白MRP1、P-gp,降低细胞耐药性。

紫草素通过上调RIP1、RIP3蛋白诱导下咽癌细胞发生坏死性凋亡

目的探究紫草素对下咽癌细胞(Fadu)的增殖和死亡的影响。方法不同浓度的紫草素(0,2,4,6,8,10μmol/L)分别处理Fadu细胞24,48,72 h,检测细胞的存活率,其中0μmol/L组为空白对照组。MTT法检测紫草素对Fadu细胞增殖的影响;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测不同浓度紫草素(0,2,4,6μmol/L)作用于Fadu细胞24 h的凋亡率;Western blot法检测紫草素作用Fadu细胞后Bcl-2、Bax、RIP1、RIP3蛋白相对表达水平。结果 MTT结果显示,紫草素对Fadu细胞的增殖抑制作用呈时间依赖性及剂量依赖性(P <0. 05),24,48,72 h的IC50分别为6. 012,4. 120,3. 939μmol/L;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法可知紫草素可随浓度依赖性诱导Fadu细胞凋亡;Western blot结果显示,紫草素(2,4,6μmol/L)可以下调Bcl-2和上调Bax,诱导Fadu细胞凋亡,上调RIP1、RIP3蛋白诱导下咽癌细胞坏死性凋亡。结论紫草素可诱导Fadu细胞的凋亡和坏死性凋亡,凋亡机制可能为下调凋亡抑制蛋白Bcl-2和上调凋亡诱导蛋白Bax的表达,坏死性凋亡的机制可能为上调RIP1、RIP3蛋白的表达。

残喉黏膜瓣在下咽癌手术修复中的应用

目的探讨残喉黏膜瓣在下咽癌手术修复中的应用。方法收集2015年9月—2017年9月蚌埠医学院第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科行残喉黏膜瓣修补下咽缺损的下咽癌修复手术患者48例。TNM分期为,T2N0M08例,T2N1M07例,T2N2M07例,T3N0M010例,T3N1M09例,T3N2M06例,T4N2M01例。根据肿瘤的原发位置部位选择手术入路:会厌谷、梨状窝外侧壁或尖部三种路径进入咽腔,切除范围距肿瘤1.5~2.0 cm,切缘快速冰冻检查,利用残存喉黏膜瓣进行下咽缺损修复。评估患者病情变化及身体状况,术后1个月行放疗或化疗治疗。结果48例患者均在短期内恢复正常吞咽功能。其中3例患者于术后6 d发现局部感染和咽瘘,咽瘘<2 cm,占6.25%(3/48),经局部换药2周内愈合;2例患者术后出现吻合口狭窄,6.25%(2/32),经相应扩张后好转。其中16例患者为全喉切除,术后呼吸通畅;28例患者于术后3个月内拔除气管套管,2例患者于术后6个月拔管,拔管率94%(30/32)。2例患者术后喉腔狭窄,无法拔管。2例3年内局部复发+颈部转移+远处转移(肺转移);1例3年内局部复发+食管转移;1例患者抑郁(自行脱管),5例失访。3年生存率为81.3%(39/48)。结论利用残喉黏膜瓣修补部分下咽癌切除术后的下咽缺损,就近取材,不增加切口、创伤不大,抗感染能力强、易成活,并发症相对较少。