非梗阻性无精子症与正常人睾丸间质细胞差异表达基因及核心基因的生物信息学分析

目的通过生物信息学方法分析非梗阻性无精子症(NOA)和正常男性睾丸间质细胞中的差异表达基因及其核心基因。方法采用生物信息学方法整合GEO(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo)中的GSE149512数据集,选取无生精障碍的人群为正常组,NOA患者为NOA组。运用R软件(版本4.02)中的Seurat包(版本4.0)整合分析GSE149512的数集,并采用非线性降维UMAP的方法进行细胞聚类分析;通过Find All Markers函数,获取细胞聚类的Marker基因,并查询Human Cell Landscape(HCL)数据库进行细胞注释,并绘制差异表达基因的可视化热图;运用Cytoscape软件(3.6.1版)的ClueGO和CluePedia插件对差异基因的进行GO功能富集和KEGG通路分析;通过String数据库(http://string-db.org),构建差异基因的PPI网络;运用CytoHubba插件中的5种运算方法(Degree、DMNC、EPC、MCC、MNC)识别PPI网络中的核心基因并绘制韦恩图。结果整合GSE149512数据集,最终形成1个由39392个细胞、40210个基因、31个聚类细胞构成的数据集,其中,NOA组有17415个细胞、正常组有21977个细胞。通过Find All Markers函数识别聚类细胞的Marker基因发现,NOA组的细胞主要由体细胞构成,其睾丸间质细胞占比最高,为44.4%(7736/17415);分析两组研究对象睾丸间质细胞共得到145个差异表达基因,与正常组相比较,NOA组82个基因上调、63个基因下调。GO富集分析结果显示,在生物学过程方面,睾丸间质细胞发挥作用较多,且在免疫抗原提呈功能方面也发挥着重要作用;在细胞组分方面,主要在细胞膜、胞质和核糖体中发挥作用;在分子功能方面,主要发挥细胞周期蛋白激酶的调控、核苷核酸的链接等作用。KEGG通路分析结果显示,主要通过病毒感染、炎症细胞因子等通路发挥显著作用。PPI网络结果显示,差异表达基因构建了158个点和2132条边的蛋白互作网络,识别出RPS11等10个核心基因。结论本研究通过生物信息学方法显示了NOA患者睾丸间质细胞中的差异表达基因及核心基因,为后续探讨NOA的新机制奠定了基础。

不同卵子质量下精子DNA碎片对体外受精临床结局的影响

目的探讨不同卵子质量下精子DNA碎片对体外受精(IVF)临床结局的影响。方法回顾性分析2018年9月至2019年12月在金华市人民医院生殖医学中心接受IVF治疗的896组不孕不育夫妇。促排卵方案根据女方卵巢储备功能制定,正常行促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)长方案(LP,593例),下降行GnRH-a短方案(SP,303例)。根据LP/SP中精子DNA碎片指数(DFI)分为正常组(DFI<10%,300例/150例)、轻度组(10%≤SDFI<20%,206例/104例)和重度组(DFI≥20%,87例/49例),分别比较三组的临床结局。结果在LP中,三组间的受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎种植率、临床妊娠率和异位妊娠率差异均无统计学意义(P>0.05),重度组的早期流产率比正常组和轻度组高,但三组间差异无统计学意义(P>0.05)。在SP中,三组间的受精率、卵裂率、优质胚胎率和异位妊娠率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。胚胎种植率和临床妊娠率三组间比较,差异具有统计学意义(P<0.05),重度组的胚胎种植率显著低于正常组(P<0.0167),轻度组和重度组的临床妊娠率也分别显著低于正常组(P<0.0167)。早期流产率三组间差异虽然有统计学意义(P<0.05),但两两之间比较,差异无统计学意义(P>0.0167)。结论DFI对IVF临床结局有不利影响,尤其是卵巢储备功能下降的治疗周期,卵子质量可能在DFI对IVF影响中起决定作用。

中药固精培肾汤治疗43例早泄患者的临床观察

早泄(premature ejaculation,PE)是最常见的男性性功能障碍疾病,统计表明20%~40%男性受PE的困扰[1]。PE影响患者的性生活质量,常导致夫妻关系紧张和家庭不和谐和,严重者会导致心理疾病发生,反过来又加重早泄症状。以往治疗有心理、行为干预、药物、手术等方式,随着新型药物的出现以及检测技术的更新,治疗手段也变得多样化[2];不过还是难以达到令患者满意的效果。中医治疗PE方法众多,经验丰富,副作用少,患者乐于接受。中医认为肾主生殖,藏精,早泄的核心病机为肾失封藏,笔者临床拟方固精培肾汤治疗PE患者43例,统计临床疗效较西药治疗明显为优,现报道如下。

缩短禁欲时间对重度精子DNA损伤患者体外授精结局的改善作用

目的探讨缩短禁欲时间对重度精子DNA碎片指数(DFI)患者体外授精(IVF)结局的改善作用。方法选取2018年11月至2020年6月行IVF治疗的DFIM20%的不孕不育夫妇200对,随机分为两如(毎组100对),设定WF治疗时禁欲时间1〜5 h为观察组,2~7 d为对照组。分别比较两组IVF治疗前和IVF治疗时的精液常规质量指标与DFI,并比较两组IVF临床结局。结果调整前,两组精液常规质量指标和DFI均无差异无统计学意义(均P>0.05)o调整后,-观察组精液体积、精子浓度和DFI均极低于对照组(均P<0.01),前向运动率高于对照组(P<0.01)。IVF结局,观察组优质胚胎率达39.09%,高于对照组31.18%(P<0.01)o胚胎移植后,观察组种植率、临床妊甥率和早期流产率分别为33.54%、55.95%和14.89%,优于对照组21.93%、37.10%和39.13%,差异有统计学意义(均P<0.05)o结论缩短禁欲时间可以降低重度DFI患者的精子DNA损伤程度,并可改善重度DFI患者IVF结局中的优质胚胎率、种植率、临床妊娠率和早期流产率。

精子DNA碎片对IVF/ICSI结局的影响

目的探讨精子DNA碎片对体外受精/卵胞浆内单精子注射(IVF/ICSI)结局的影响。方法回顾性的分析了行IVF/ICSI治疗的725例不孕夫妇(IVF 502例、ICSI 223例)的临床资料。根据精子DNA碎片指数(DFI)分为正常组(DFI<10%)、轻度DFI组(10%≤DFI<20%)和重度DFI组(DFI≥20%),分别比较了IVF和ICSI中三组的受精率、卵裂率、可用胚胎率、优质胚胎率和临床妊娠率。结果在IVF周期中,DFI对受精率、卵裂率、可用胚胎率、优质胚胎率和临床妊娠率均无影响(P>0.05);在ICSI周期中,DFI对受精率和卵裂率无影响(P>0.05),但可用胚胎率和优质胚胎率三组之间有显著性差异(P<0.05),临床妊娠率虽然随着DFI的增高而下降,却无显著相关性(P>0.05)。结论精子DNA碎片对IVF结局基本无影响,但与ICSI结局中的可用胚胎率和优质胚胎率呈负相关,这可能与受精过程中IVF周期中卵子对精子有自然选择的过程,而ICSI周期中则是人为的选择精子有关。