草乌与瓜蒌、白及配伍对心肌细胞毒性与增毒机制研究

目的:探讨草乌、草乌与瓜蒌和草乌与白及配伍对大鼠心肌细胞毒性作用与增毒作用机制。方法:体外培养大鼠心肌细胞,给予2%,8%,16%浓度的含药大鼠血清作用于心肌细胞后,采用MTT法测定心肌细胞活力,比较对心肌细胞毒性大小,再利用试剂盒测定细胞外乳酸脱氢酶(LDH)含量、Na+-K+-ATP酶活力与含量以及细胞凋亡率,研究增毒机制。结果:与对照组相比,随着大鼠含药血清浓度的升高,心肌细胞存活率下降(P<0.05)。给药组LDH含量显著升高(P<0.05);Na+-K+-ATP酶活力随着浓度升高而降低(P<0.05);Na+-K+-ATP酶含量明显降低(P<0.05),血清浓度在8%,16%时,细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。结论:草乌对心肌细胞有明显毒害作用,与瓜蒌、白及配伍后毒性增强;其增毒的机制是能显著增大心肌细胞膜通透性,破坏细胞能量系统,诱导细胞自身凋亡,加速细胞死亡。

HPLC测定草乌与瓜蒌配伍前后6种毒性成分量的变化

目的研究草乌Aconiti Kusnezoffi Radix与瓜蒌Trichosanthis Fructus按照13个不同比例配伍后,苯甲酰新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、中乌头碱、乌头碱、次乌头碱成分量的变化。方法草乌与瓜蒌的干燥粉末,混匀,分别用10倍量蒸馏水和75%乙醇浸润1 h,提取2次,每次1 h,合并提取液,离心,取上清液。HPLC采用Welch Xtimate C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-40 mmol/L乙酸铵(氨水调pH 10.0)梯度洗脱;体积流量1 mL/min,检测波长235nm。结果草乌与瓜蒌配伍后,随瓜蒌比例增加,药液pH值逐渐降低,单酯型生物碱总量变化不明显,而双酯型生物碱总量增加。结论草乌与瓜蒌配伍后,从化学成分来看,双酯型生物碱类成分增加导致毒性增加。

草乌与瓜蒌白及半夏配伍的急性毒性研究

目的探讨与瓜蒌、白及或半夏配伍对草乌急性毒性的影响。方法采用动物急性毒性实验,以动物死亡数为观测指标,计算草乌醇提液灌服给药的LD50;固定草乌剂量在LD50,与13个不同比例的反药瓜蒌、白及或半夏配伍,探讨草乌配伍禁忌的毒性变化;选用上述实验中死亡率为75%的配伍比例,即与瓜蒌（36∶1）配伍或白及（10.8∶1）配伍,测算草乌与反药配伍的LD50。结果草乌醇提液灌服给药的LD50为8.45 g·kg^-1,95%置信区间为7.58-9.43 g·kg^-1。与瓜蒌或白及配伍草乌的毒性随着瓜蒌或白及用量的增大而增强;而草乌与半夏配伍小鼠死亡率没有出现上升,反而随着半夏用量的增大呈现下降的趋势。与瓜蒌（36∶1）配伍草乌配伍禁忌的LD50为6.45 g·kg^-1,95%置信区间为5.64-7.34g·kg^-1;与白及（10.8∶1）配伍草乌配伍禁忌的LD50为5.94 g·kg^-1,95%置信区间为5.21-6.73 g·kg^-1。结论草乌与瓜蒌或白及配伍的急性毒性强于单独草乌的急性毒性;但草乌与半夏配伍的毒性没有上升,表明草乌与反药配伍禁忌不是绝对的。