胚胎造血干细胞发育全程线粒体动态特征及功能研究

目的:描绘线粒体在小鼠胚胎造血干细胞发育全程的动态特征并探究线粒体在此过程中的功能。方法:分析小鼠胚胎造血干细胞发育动态连续群体的单细胞转录组数据,描绘线粒体及能量代谢相关基因的动态变化特征;利用荧光探针染色结合流式细胞术对上述各个阶段细胞内线粒体的数量及膜电位进行检测,探究造血干细胞发育过程中线粒体数量和活性的动态变化特征;在共孵育诱导体系中加入抑制线粒体合成及能量代谢的小分子抑制剂,并结合造血集落形成实验评价抑制线粒体功能后对于体外造血诱导的影响。结果:(1)单细胞转录组数据分析显示,相较于糖酵解相关基因,线粒体合成及氧化磷酸化相关基因在生血内皮细胞和I型造血干细胞前体阶段呈现显著高表达,并且这部分基因能够显著区分连续动态发育群体。(2)荧光染色及流式细胞术结果显示,线粒体数量和膜电位在从生血内皮细胞到造血干细胞前体的连续发育过程中呈现不断上升的趋势,在II型造血干细胞前体阶段达到最高,而在胎肝造血干细胞中有所下降。(3)体外共孵育及造血集落培养结果显示,与对照组相比,抑制线粒体呼吸链I和V能够显著减少胚胎主动脉-性腺-中肾区CD31+细胞诱导产生的造血集落数量(P<0.05)。结论:(1)线粒体合成及氧化磷酸化相关基因在生血内皮细胞和I型造血干细胞前体中显著高表达,并能区分连续发育群体;(2)线粒体数量和膜电位在造血干细胞连续发育过程中不断上升,在II型造血干细胞前体中达到最高;(3)体外抑制线粒体呼吸链I和V能够显著降低造血产物生成。

2~10μm台阶高度标准物质候选物的研制和质量评价

微米台阶高度标准物质用于校准仪器z轴性能,传递准确的微米高度量值。利用光刻结合干法刻蚀工艺实现公称高度为2,5,10μm台阶高度标准物质候选物的制备,并对台阶高度、粗糙度和上下表面平行度进行表征。使用激光共聚焦显微镜和非球面测量仪进行测量,基于双边算法、直方图法、ISO算法和光学显微解耦合准则(LEL)法对台阶高度进行评定,对于同一标准物质候选物各评定方法间的标准差均不超过0.024μm,台阶高度评定值的相对偏差均在5%以内,表明不同算法的评定结果一致性水平较高且量值可靠;不同仪器的评定结果对比,说明了评定方法之间也具有良好的一致性;同时,粗糙度不超过0.04μm,上下表面平行度不超过0.03°,验证了标准物质候选物制备效果良好。

ERT法监测高压旋喷修复PAHs污染现场试验研究

选用过硫酸钠(PS)作为氧化剂,微米铁/纳米铁/碳载铁/NaOH作为激活剂,通过高压旋喷工艺氧化修复多环芳烃(PAHs)污染土,利用高密度电阻率法(ERT)监测旋喷过程中土壤的电阻值分布,分析了氧化药剂在修复过程中的迁移转化规律,比较了4组药剂旋喷后48h的修复效果.结果表明:ERT准确地反映了污染修复发生的位置,最大偏差小于0.5m;电阻变化值与萘修复值呈现正相关关系,通过拟合曲线估计的污染修复值与实际修复值之间存在误差,误差为10.3%~22.6%;碳载铁粉显示出良好的稳定与缓释性能,旋喷后稳定氧化阶段延长约8h;最终预设修复区域内污染去除量:碳载铁粉组>纳米铁粉组>微米铁粉组≈NaOH组.

便携式X射线荧光光谱仪对粉丝中KAl(SO_(4))_(2)的快速检测技术研究

硫酸铝钾[KAl(SO_(4))_(2)]又称明矾,常被加入到粉丝的制作工艺中为了改善粉丝韧劲差、易断裂的缺点,也能在一定程度上提升粉丝的口感。硫酸铝钾中的铝元素具有神经毒性,长期摄入过量的铝对人身体健康具有极大危害。常规测定粉丝中硫酸铝钾时,样品需要消解,处理方法繁琐且费时。而便携式X射线荧光光谱仪(XRF)具有体积小、操作简便、检测速度快和灵敏度高等优点还能同时测定多种金属元素。以粉丝为研究对象,以电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)为参比,建立了XRF对粉丝中的KAl(SO_(4))_(2)的快速检测与鉴别新方法,并将XRF技术用于鉴别粉丝中是否添加KAl(SO_(4))_(2)。首先使用方程对仪器进行基体效应修正,建立了峰面积和浓度的线性曲线,校正的工作曲线拟合R^(2)>0.99,可用于粉丝样品的测定。对仪器的检测条件进行优化。将样品直接上机测定时,XRF测试结果相对误差在0.65%~24.33%范围内。针对KAl(SO_(4))_(2)中铝含量小于100 mg·kg^(-1)的粉丝样品可采用快速碳化处理,将粉丝中低含量的铝富集后再测定,XRF测试结果相对误差为1.36%~15.39%,碳化处理极大缩短了样品直接测定的相对误差。研究发现添加了硫酸铝钾的粉丝标样Al、S和K元素成相关性,三种元素的比例在1∶3∶1~1∶4∶1范围内,而未添加硫酸铝钾的粉丝并不满足这个比例。便携式XRF能高效完成大批量样品分析,单次测试仅需5 min,方法快速、简便、经济、精密度高,同时可快速鉴别粉丝中是否添加KAl(SO_(4))_(2),及时发现食品质量安全隐患,为粉丝的质量控制提供了新思路,具有广泛的实际推广意义。

日粮代谢能和粗蛋白质水平对育成期坝上长尾鸡生长性能及血液生化指标的影响

试验通过研究不同代谢能和粗蛋白质水平日粮对育成期坝上长尾鸡生长性能和血液生化指标的影响,确定饲粮中适宜的代谢能和粗蛋白质水平,为制定饲养标准提供理论依据。研究采用2因素3水平的试验设计,日粮代谢能水平分别为11.0、11.5 MJ/kg和12.0 MJ/kg,粗蛋白质水平分别为14.00%、15.00%和16.00%。结果表明:日粮代谢能水平对生长性能有显著影响(P<0.05),粗蛋白质水平对生长性能的影响不显著(P>0.05),代谢能和粗蛋白质水平互作效应显著。日粮代谢能水平对血液中除尿酸和胆固醇含量之外的指标均有显著影响。日粮代谢能、粗蛋白质水平对血糖和胆固醇含量有显著影响,综合考虑生长性能和血液生化指标,建议坝上长尾鸡育成期日粮适宜代谢能水平为11.0~11.5 MJ/kg、粗蛋白质水平为14%~15%。

不同水平张杂谷对育成期坝上长尾鸡生长性能和血液抗氧化指标的影响

试验旨在研究饲粮中不同水平张家口杂交谷子(简称"张杂谷")对11~18周龄坝上长尾鸡生长性能和血液抗氧化指标的影响,为张杂谷的应用提供依据。试验选取11周龄坝上长尾鸡576只,随机分为6组,每组设4个重复,每重复24只鸡,Ⅰ~Ⅴ组为试验组,分别饲喂5%、10%、15%、20%和25%的张杂谷饲粮,张杂谷替代部分玉米和麸皮(换算比例为1谷子=0.66玉米+0.34麸皮)配制的试验日粮。预试期7 d,正试期49 d。结果表明:(1)蛋鸡日粮中应用一定比例张杂谷对试验鸡日增重和料重比未产生显著影响,其中试验Ⅱ组(应用量10%)日增重数值最大,料重比数值最低,但与对照组差异均不显著(P>0.05);(2)饲粮中应用张杂谷对血清SOD、MDA、GSH-Px和CAT均有显著影响(P<0.05),随着张杂谷应用水平的增加,血液中SOD活力、GSH-Px活力和CAT活力呈现先增加后降低的趋势,MDA含量呈现先降低后增加的趋势,试验Ⅱ组和Ⅲ组显著优于其他组。综合以上测定指标,张杂谷能量饲料替代一定比例玉米和麸皮饲喂坝上长尾鸡可行,并有改善抗氧化功能的作用。在坝上长尾鸡饲粮中适宜水平为10%~15%。

IGS精密星历文件的读取及内插方法研究

利用matlab软件编程实现了精密星历文件的读取及信息筛选。在GPS精密单点定位的过程中,需要比国际全球导航卫星系统服务(IGS)组织提供的15min更小的精密星历时间间隔的观测数据,介绍了拉格朗日和牛顿两种插值方法,对IGS精密星历进行了内插,并对插值的结果进行对比分析,得到了一些有益的结论。

台湾乡村旅游开发模式分析及启示

台湾乡村旅游起步于20世纪60年代后期,经历了萌芽期(1960～1982年)、发展期(1983～1994年)、转变期(1994～1996年)和成熟期(1997年至今)。但长期以来,乡村旅游处于低水平重复开发状态,产品的同质、单一导致利润不断下降,乡村旅游发展缓慢。在对台湾地区乡村旅游发展背景及进程进行比较分析的基础上,吸取台湾地区乡村旅游(休闲农业)在战略转型、产品设计和保障体系等方面的优秀经验,提出乡村旅游产业的升级建议。

人鬼绝恋,因梦成戏——《牡丹亭》的叙事特点分析

汤显祖的《牡丹亭》是我国戏曲史上重要的传奇作品。这部作品不仅继承了明清传奇情节创作的传统,而且在情节构架中体现出了作者别具匠心的才思,但其叙事结构历来颇受争议。本文通过对《牡丹亭》文本的研究,从叙事的主题、情节、时空、模式等方面来客观分析这部作品的叙事特点,从而全面把握该剧的叙事结构和艺术特色,这对研究明清传奇也有重要的启发意义。

短信教育对直肠癌结肠造口术后患者焦虑和自理能力的影响

目的探讨短信教育对直肠癌结肠造口术后患者焦虑和自理能力的影响。方法便利抽样法选取2010年2月至2011年11月在哈尔滨医科大学附属第四医院消化科治疗的84例直肠癌患者为研究对象。按入院时间先后将其分为对照组和观察组,每组42例。对照组接受常规治疗和护理,观察组在接受常规治疗和护理的基础上进行短信教育,即观察组患者出院后每2～7d由专门的护士进行1次短信督导及健康教育,为期3个月。3个月后随访时,采用焦虑自评量表(self-ratinganxiety scale,SAS)和自我护理能力测定量表(exercise of self-care agency scale,ESCA)测评两组患者的焦虑情况和自我护理能力。结果 3个月后随访时,观察组患者的SAS评分为(41.59±5.60)分,低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);而自我护理能力优于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论短信教育对于直肠癌结肠造口患者心理健康状况的改善和自理能力的提高具有促进作用。

白术多糖、枯草芽孢杆菌对育成期蛋鸡生长性能和血清免疫指标的影响

试验旨在研究饲粮添加白术多糖、枯草芽孢杆菌对育成期蛋鸡生长性能和血清免疫指标的影响。选用体重相近、健康的11周龄海兰褐蛋鸡480只,随机分成12组,每组4个重复,每个重复10只。采用4(白术多糖:0、0.2%、0.4%和0.6%)×3(枯草芽孢杆菌:0、250 mg/kg和500 mg/kg)因子设计试验。试验期为7周,其中预试期1周,正试期6周。结果显示:(1)饲粮中添加白术多糖对育成期蛋鸡的平均日采食量和血清Ig M含量无显著影响(P>0.05),但可以显著提高其末体重、平均日增重和血清Ig A、Ig G含量(P<0.05),降低料重比(P<0.05);(2)饲粮中添加枯草芽孢杆菌对育成期蛋鸡的末体重、平均日采食量和料重比及血清Ig A含量均无显著影响(P>0.05),但可以显著提高其平均日增重(P<0.05),并提高血清Ig G和Ig M含量(P<0.05);(3)白术多糖和枯草芽孢杆菌的互作效应对育成期蛋鸡的平均日采食量和血清Ig A、Ig M含量无显著影响(P>0.05),但可显著提高其末体重、平均日增重和血清Ig G含量,降低料重比(P<0.05)。试验表明,白术多糖和枯草芽孢杆菌两者互作对育成期蛋鸡的生长性能和血清免疫指标有协同作用,且以添加0.4%白术多糖和250 mg/kg枯草芽孢杆菌组的效果较佳。

影响产蛋后期蛋壳质量的饲料营养因素及调控措施

蛋壳质量影响鸡蛋破损率,直接影响蛋鸡产业的经济效益。在产蛋后期,蛋重增大而钙的沉积能力有限,使蛋壳变薄容易破损,蛋壳的质量问题仍然比较突出。影响产蛋后期蛋壳质量的因素有很多,文章主要从蛋壳的结构形成和成分、评价蛋壳质量的指标、影响产蛋后期蛋壳质量的饲料营养因素及调控措施等方面来进行论述。

日粮代谢能和粗蛋白质水平对0-6周龄太行鸡育肥公鸡生长性能及营养物质表观代谢率的影响

试验通过研究日粮中不同水平代谢能和粗蛋白质对0~6周龄太行鸡育肥公鸡生长性能和营养物质表观代谢率的影响,确定日粮中适宜的代谢能和粗蛋白质水平,为太行鸡公鸡育肥提供依据。选取1日龄540只健康太行鸡公鸡,随机分成9组,每组4个重复,每个重复15只。采用两因素三水平的试验设计,设置日粮代谢能水平分别为11.75、12.15、12.55 MJ/kg,粗蛋白质水平分别为16.1%、17.6%、19.1%,共9种日粮。结果表明:日粮中不同代谢能水平对0~6周龄太行鸡育肥公鸡的生长性能有显著影响(P<0.05),不同粗蛋白质水平对期末体重和日增重有显著影响(P<0.05),代谢能和粗蛋白质水平在生长性能上表现出显著交互作用(P<0.05)。日粮中不同代谢能水平对0~6周龄太行鸡育肥公鸡的能量和粗蛋白表观代谢率均有显著影响(P<0.05),而不同粗蛋白质水平对能量、粗蛋白、钙和磷表观代谢率均无显著影响(P>0.05),日粮代谢能和粗蛋白质水平在能量和粗蛋白表观代谢率上表现出显著交互作用(P<0.05)。综合考虑生长性能和营养物质表观代谢率指标,建议0~6周龄太行鸡育肥公鸡日粮适宜代谢能水平为12.15 MJ/kg,粗蛋白质水平为17.6%。

不同钙磷水平对育雏期坝上长尾鸡生长性能和血液生化指标的影响

试验通过调整日粮钙磷水平,观察其对坝上长尾鸡生长性能和血液生化指标的影响,筛选出坝上长尾鸡育雏期日粮对钙磷适宜的需要量。采用3×3双因子试验设计(钙水平为1.23%、1.00%、0.77%,总磷水平为0.680%、0.615%、0.550%),选用1日龄坝上长尾鸡900只,分成9个试验组,每组5个重复,每个重复20只,试验期42 d。结果显示:(1)坝上长尾鸡雏鸡日粮总磷含量0.615%组日采食量和料重比显著高于0.680%和0.550%组(P<0.05),表明育雏期坝上长尾鸡日粮总磷水平在0.680%和0.550%时减少饲料消耗,降低料重比,以0.550%磷水平效果最佳。坝上长尾鸡雏鸡日粮随着钙水平变化,日增重有显著影响,1.00%钙水平日增重最低,其次是1.23%钙水平,以0.77%钙水平日增重最高。(2)日粮钙磷水平对坝上长尾鸡雏鸡血钙、血磷、碱性磷酸酶、总蛋白和白蛋白影响均不显著(P>0.05)。但随日粮总磷水平的升高,雏鸡血钙和总蛋白含量逐渐升高,血磷含量逐渐降低,随日粮钙水平的升高雏鸡血磷水平、碱性磷酸酶水平有升高趋势。综上所述,日粮钙水平为0.77%、总磷含量为0.55%时,坝上长尾鸡雏鸡具有较大日增重和较低料重比。

日粮钙磷水平对育成期坝上长尾鸡生长性能和血液生化指标的影响

为研究日粮不同钙磷水平对坝上长尾鸡生长性能和血液生化指标的影响,试验采用3×3双因子试验设计,钙水平分别为1.1%、0.9%和0.7%,总磷水平分别为0.65%、0.60%和0.55%,选用13周龄坝上长尾鸡900只,分成9个试验组,每组5个重复,每个重复20只鸡,进行7周饲养试验。结果表明,日粮钙和磷水平对坝上长尾鸡青年鸡平均日增重和料重比有显著影响(P<0.05),且日粮钙水平和磷水平交互作用显著(P<0.05);试验处理LH(钙水平为1.1%,磷水平为0.55%)表现出最高的日增重、最低的料重比;日粮钙和磷水平对鸡只血液生化指标无明显影响(P>0.05)。综上,本试验9种钙和磷的组合中,以日粮钙水平为1.1%和磷水平为0.55%的组合,对青年鸡坝上长尾鸡的生长和骨骼发育效果最佳。

抗菌肽FAPs在毕赤酵母中的重组表达研究

将4种抗菌肽Fowlicidin-2、Cecropin B、Cecropin A(1-8)-Melittin(1-18)和Thanatin串联,并在每种抗菌肽N-末端加上Kex2蛋白酶裂解位点,根据毕赤酵母密码子偏爱性,化学合成四种抗菌肽(Fusion Antimicrobial Peptides,FAPs)编码基因,连接到pPICZαC载体中,构建分泌型重组表达载体并转化毕赤酵母。经甲醇诱导后,Tricine-SDS-PAGE分析获得与目蛋白大小一致特异表达蛋白条带,每升发酵液上清含量达到32 mg。初步鉴定FAPs对大肠杆菌(E.coli)ATCC25922、金黄色葡萄球菌(S.aureus)ATCC25923、鼠伤寒沙门氏菌(S.syphimurium)C77-31和绿脓杆菌(P.aeruginosa)ATCC27853均有抑菌活性,且对S.aureus ATCC25923活性最强,最小抑菌浓度MIC为8.0μg·mL-1。

日粮钙磷水平对育雏期太行鸡生长性能和血液生化指标的影响研究

试验旨在研究不同钙磷水平日粮对育雏期太行鸡生长性能和血液生化指标的影响,探讨太行鸡雏鸡日粮适宜钙磷需要量。试验采用2因素3水平试验设计,日粮钙水平分别设定为1.23%、1.00%和0.77%,磷水平分别为0.68%、0.62%和0.55%。1日龄健康太行鸡雏鸡720只,随机分为9组,每组4个重复,每重复20只鸡。试验分别测定试验鸡期末体重、日采食量、日增重、料重比和血液生化指标。结果发现:日粮磷水平增加时,试验组雏鸡表现为期末体重和日增重逐渐增加,高磷组期末体重和日增重分别比低磷组增加了8.84%和9.54%,料重比则降低了10.56%,采食量没有明显差异;日粮钙水平对试验鸡采食量和料重比有显著影响(P<0.05),表现为随日粮钙水平升高太行鸡采食量和料重比有降低趋向,高钙组(1.23%)雏鸡采食量和料重比分别较低钙组降低了8.68%和15.25%,期末体重和日增重则差异不显著;日粮磷和钙水平对育雏期太行鸡的采食量和料重比有显著交互作用(P<0.05)。日粮磷水平对太行鸡的血液生化指标影响不明显,高磷组太行鸡血磷含量分别比中、低磷组升高了17.94%和7.96%;日粮钙水平对太行鸡总蛋白和白蛋白的含量有显著性影响(P<0.05),中钙组血清总蛋白和白蛋白的含量都显著高于高钙组(P<0.05),分别高出12.46%和11.49%;日粮磷和钙水平对育雏期太行鸡血清白蛋白含量有交互作用(P<0.05),中磷中钙组血清中的白蛋白含量明显高于其他组。综上,育雏期太行鸡日粮适宜钙和磷水平分别为1.23%和0.680%。

表达克隆技术在蛋白质相互作用研究中的应用

相互作用蛋白的发现与研究有助于精确地掌握蛋白质相互作用网络中各个蛋白之间的联系以及这些联系产生的生理功能。表达克隆筛选技术是经典的相互作用蛋白筛选技术之一,其基本原理是选择可能还有目的基因的文库,根据实验需要设计不同的筛选方式,经过反复筛选富集目的基因,再通过大规模测序获得目的基因序列。本文着重对报告基因筛选、黏附筛选、血清学筛选等不同筛选方法进行概括总结,为更好地利用这一方法进行相互作用蛋白筛选提供参考。

星地光通信多点地面接收方案的初步研究

分析了大气和背景辐射对星地光通信质量的影响,提出了一种新型的多点地面接收方案,用来提高通信质量.进行了原理性演示实验和对大气信道的理论仿真.结果均说明采用该方案来提高星地光通信质量是可行的.