副干酪乳酪杆菌N1115的巨噬细胞免疫活化产物促进原代海马神经细胞发育

目的初步探究副干酪乳酪杆菌N1115活菌介导免疫途径对体外培养的原代海马神经细胞发育的影响。方法以适宜浓度的副干酪乳酪杆菌N1115活菌悬液为实验组,以肽聚糖(PGN)、脂多糖(LPS)为阳性对照,以RPMI1640培养基为空白对照,分别与RAW264.7细胞共培养,获得共培养上清液及细胞总RNA,测定细胞因子的表达及分泌情况。各组上清液经离心后以适当的比例与原代海马神经细胞共培养,收集共培养上清液,提取细胞总RNA,测定神经细胞突触发育相关基因的表达情况;原代海马神经细胞免疫荧光染色后对突触前后膜相关蛋白——突触后膜致密蛋白95(PSD95)、突触生长蛋白(SYP)及神经细胞成熟标志物——微管相关蛋白2(MAP-2)、双皮质素(DCX)进行定量分析,对神经细胞的形态发育进行测量。结果与空白对照相比,N1115活菌干预RAW264.7细胞后,细胞免疫功能激活,白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA相对表达量分别提高7471%、926%,分泌量分别提高184.16 pg/mL、12320.76 pg/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);N1115活菌的激活能力强于PGN,但弱于LPS,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照相比,N1115活菌-RAW264.7细胞共培养上清液干预原代海马神经细胞后,10%上清干预组原代海马神经细胞活率提升19.25%,差异有统计学意义(P<0.05),突触前后膜SYP、PSD95 mRNA相对表达量分别提高137%、159%,差异有统计学意义(P<0.05)。N1115活菌上清干预组神经细胞的突起总长度(489.88μm)较空白对照组(381.51μm)增加,胞体面积(2092.22μm^(2))、轴突长度(184.78μm)、突起总长度、平均突起长度(108.38μm)、分支点(4.84个)较两阳性对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论副干酪乳酪杆菌N1115可激活巨噬细胞的免疫调节功能,从而促进神经细胞的形态发育以及突触功能。