调控血红素加氧酶-1诱导K562A02细胞增殖、凋亡及耐药机制研究

目的通过血红素加氧酶-1(HO-1)诱导剂Hemin及抑制剂ZNPP IX调控HO-1,并联合阿霉素逆转K562A02细胞化疗耐药机制的研究,为慢性髓系白血病(CML)的逆转耐药提供新的策略。方法培养K562及K562A02细胞,采用荧光原位杂交(FISH)法检测K562A02细胞中bcr-abl融合基因表达。分别用HO-1诱导剂Hemin及抑制剂ZNPP IX调控HO-1基因表达联合阿霉素处理K562A02细胞后;流式细胞术检测药物诱导细胞凋亡情况。Western blot检测耐药相关基因及凋亡基因蛋白表达水平。结果 K562A02细胞中bcr-abl融合基因阳性细胞占94%。阿霉素处理细胞后,随着阿霉素浓度的增加,HO-1表达下降,耐药相关基因MDR1、NF-κB(P65)、MRP1、TopoⅡα、ABCD2表达亦降低;用HO-1诱导剂Hemin、抑制剂ZNPP IX、阿霉素单药分别及联合处理K562A02细胞后,显示HO-1高表达后耐药相关基因表达升高,细胞凋亡率下降。而降低HO-1表达,耐药相关基因表达下降,细胞凋亡率增加。结论 HO-1可作为逆转耐药的靶基因,可以使K562A02对阿霉素重新敏感,起到增敏效应。

谷氨酰胺对脓毒症模型大鼠心肌细胞的保护作用

目的:研究谷氨酰胺(Gln)对脓毒症模型大鼠心肌细胞的保护作用。方法:取大鼠随机分为假手术(生理盐水)组、模型(生理盐水)组和Gln低、中、高剂量(0.5、0.75、1.0 g/kg)组,每组10只。除假手术组大鼠行假手术外,其余各组大鼠采用盲肠结扎穿孔术复制脓毒症大鼠模型。术后10 min内各组大鼠分别尾iv相应药物,检测术后12 h各组大鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)、肌钙蛋白Ⅰ(TnⅠ)含量,观察心肌细胞特征和凋亡指数,检测心肌细胞中Bcl-2、p53 m RNA表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠心肌细胞出现坏死的病理现象,血清中CK、LDH、TnⅠ含量和凋亡指数升高,心肌细胞中Bcl-2 m RNA表达减弱、p53 m RNA表达增强,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,Gln中、高剂量组大鼠心肌细胞损伤程度明显减轻,血清中CK、LDH、TnⅠ含量和凋亡指数降低,心肌细胞中Bcl-2 m RNA表达增强、p53 m RNA表达减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Gln可明显改善脓毒症模型大鼠心肌细胞损伤,其机制可能与下调p53基因表达、上调Bcl-2基因表达有关。