母代孕期应激在损伤成年子代认知功能中对CX3CL1/CX3CR1轴的影响

背景孕期应激可损害子代发育过程中中枢神经系统之间的交流,而CX3CL1/CX3CR1轴在神经元-小胶质细胞间建立了一个独特的通讯系统。目的明确孕期应激在损伤子代认知功能中是否对CX3CL1/CX3CR1轴产生影响并探究其作用机制。方法将12只SD孕鼠随机分为应激组和对照组,每组6只,应激组在孕15~21 d进行限制性应激,对照组正常饲养。用旷场、高架十字迷宫、新物体识别及Y迷宫四种行为学实验评估成年子代认知功能,ELISA检测母代及子代糖皮质激素,免疫荧光染色、Western blot检测子代海马CX3CL1、CX3CR1、Iba-1表达情况。结果母代孕期应激组及子代糖皮质激素升高(P<0.05)。母代孕期应激组子代在旷场实验中,中央区滞留时间与对照组相比减少,差异有统计学意义(P<0.05);在高架十字迷宫中进入开放臂次数和滞留时间与对照组相比减少,差异有统计学意义(P<0.05),表现出焦虑样行为;在新物体识别实验中识别指数降低(P<0.05),表现出学习记忆能力下降;在Y迷宫实验中对新异臂的识别减少(P<0.05),表现出空间记忆能力下降。母代孕期应激组子代小胶质细胞激活Iba-1表达升高,CX3CR1表达升高,CX3CL1表达下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论孕期应激损害成年子代认知功能可能与CX3CL1/CX3CR1通讯障碍有关。

菟丝子总黄酮对小鼠睾丸间质细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3的影响

背景研究表明睾丸间质细胞的凋亡是造成男性不育的重要因素之一,而菟丝子总黄酮(total flavonoids from semen cuscutae,TFSC)具有抗凋亡、抗炎等药理活性,并在治疗男性不育方面有一定疗效。目的 观察菟丝子总黄酮对小鼠睾丸间质细胞(TM3细胞)凋亡的影响并探究其可能作用机制。方法 体外培养TM3细胞,将其分为对照组(不含药物的完全培养基)、模型组[35μmol/L丙烯醛(acrolein,ACR)]、TFSC低剂量组(100μg/m L)、TFSC中剂量组(200μg/m L)、TFSC高剂量组(400μg/m L)。采用CCK-8法筛选ACR的半数致死量和TFSC的作用剂量。采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况、Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达情况。结果 TFSC浓度为100、200、400、600μg/m L时明显促进TM3细胞增殖(P<0.05);ACR浓度为33.97μmol/L时,达到细胞半数致死量。与模型组比较,TFSC中、高剂量组可提高细胞存活率(P<0.05)。流式结果显示,与模型组相比,TFSC中、高剂量组细胞凋亡明显减少。Western blotting结果显示,与模型组比较,TFSC低、中、高剂量组Bcl-2蛋白表达明显升高(P<0.05),TFSC中、高剂量组Bax、Caspase-3蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论 TFSC能够促进TM3细胞的增殖,抑制TM3细胞的凋亡,其机制可能是通过降低凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达以及升高抗凋亡的蛋白Bcl-2的表达来改善抗凋亡与促凋亡蛋白之间的失衡。

氟通过AKT/mTOR/ULK1信号通路对破骨细胞自噬的影响

背景氟可诱导破骨细胞分泌多种酶,使其吸收骨质的功能增强或减弱,从而溶骨或成骨,破骨细胞活化后骨吸收过程又与自噬密切相关。目的探究氟通过AKT/mTOR/ULK1信号通路对破骨细胞自噬的影响。方法采用RAW264.7细胞诱导形成的破骨细胞进行实验,分为对照组、NaF组、CQ组、CQ+NaF组、RAP组、RAP+NaF组,分别对相应组进行10 mg/L NaF、5 mmol/L CQ和5 mmol/L RAP给药,24 h后进行激光共聚焦显微镜检测,对破骨细胞自噬小体进行定量;荧光定量PCR检测Cathepsin K和TRAP的基因转录表达;Western blotting检测AKT/mTOR/ULKl磷酸化蛋白p-AKT、p-mTOR、p-ULK1水平,探究自噬在染氟破骨细胞的作用。结果激光共聚焦显微镜结果显示10 mg/L氟化钠溶液能够促进自噬小体的产生,自噬小体的数量明显增多,氟化钠协同RAP激动自噬。荧光定量PCR结果显示氟化钠使Cathepsin K基因和TRAP基因的表达降低,并且氟化钠与CQ对两种基因的表达降低有协同作用,氟化钠拮抗RAP,激发自噬,抑制Cathepsin K和TRAP基因上调。Western blotting显示氟化钠能够使p-AKT和p-mTOR蛋白表达量上调,并且能协同RAP使p-AKT、p-mTOR和p-ULK1表达量增高。结论10 mg/L氟化钠溶液促进破骨细胞自噬,抑制其骨吸收能力从而成骨,可能与AKT/mTOR/ULK1信号通路有关。

温通活络汤治疗腰椎间盘突出症的临床疗效

目的探讨温通活络汤治疗腰椎间盘突出症(肾阳虚型)的临床疗效。方法选定2016年3月-2019年3月到本院接受治疗的144例腰椎间盘突出症(肾阳虚型)患者,随机分为观察组72例(温通活络汤)与对照组72例(基础治疗),比较两组JOA评分、NRS评分、直腿抬高积分、感觉积分、下肢肌力积分、步行能力积分、下肢疼痛积分、腰痛积分及疗效有效率指标。结果治疗结束,观察组JOA评分、直腿抬高积分、感觉积分、下肢肌力积分、步行能力积分、下肢疼痛积分、腰痛积分及疗效有效率指标均高于对照组且差异有显著意义(P<0.05);观察组NRS评分指标低于对照组且差异有统计学意义(P<0.05)。结论温通活络汤方法可有效改善腰椎间盘突出症(肾阳虚型)患者预后,提升患者治疗效果。