油菜基因BnWRI1的克隆及RNAi对种子含油量的影响

【目的】阐明油菜基因BnWRI1对其种子含油量的影响。【方法】采用RT-PCR技术从油菜中克隆到BnWRI1基因编码区内384bp的片段,将该片段正反向插入干扰载体pGΩ4ARi中,构建成RNAi表达载体pGΩ4ARi-WRI1,通过花粉管通道法将其转入油菜受体品种中双9号中,【结果】获得3棵转基因植株,PCR扩增和基因组Southern杂交证实外源片段已整合在受体油菜基因组中。利用半定量RT-PCR和改进的索氏提取法分别检测转基因T1代植株的BnWRI1基因表达量和种子含油量,结果表明:与非转基因对照相比,转基因植株的BnWRI1基因均受抑制,种子含油量有所降低。【结论】采用RNAi技术可使油菜内源基因BnWRI1沉默,表明油菜基因BnWRI1能有效调控种子含油量。

植物内切β-1,4-葡聚糖酶基因研究进展

植物内切β-1,4-葡聚糖酶基因在植物生长发育过程中扮演重要角色。近年来,随着分子生物学的不断发展,对其研究也取得了重要进展。综述了植物内切β-1,4-葡聚糖酶基因的克隆、功能、表达调控以及编码蛋白质的结构、底物等方面的研究进展,可为进一步阐明该基因对植物生长发育的影响提供依据。

逆境对大豆脱落纤维素酶基因时间表达模式的影响

用灵敏度较高的RT-PCR检测培养4周的大豆幼苗的5个不同组织:嫩叶、老叶、茎、离层和根,测得脱落纤维素酶基因的表达量互不相同,离层中表达量最高,茎中表达量最低。选取表达量最高的离层作为逆境处理材料,分别用高温(46℃)、干旱、盐(200 mm o l/L N aC l)处理不同时间后,检测脱落纤维素酶基因的时间表达模式。结果表明:3种逆境条件下,脱落纤维素酶基因的时间表达模式各不相同,但总的来说,高温能抑制脱落纤维素酶基因的表达,干旱和盐都能促进脱落纤维素酶基因的表达。

推进宿舍文化建设 提高大学生思想政治教育实效性

本文分析了高校思想政治工作与宿舍文化建设的内在关联性,提出了宿舍文化建设在创新思想政治工作的内容方法、手段和机制、实现二者良性互动的方法和途径。对提高思想政治工作的针对性与实效性,实现高校良性发展和大学生的成才有积极的借鉴意义。

试论高职院校学生创新创业教育体系的构建

通过调查,了解就业创业指导教师学历结构、知识结构、专兼情况、培训和实习实践经历、工作满意度、工作状态等情况,提出加强就业创业指导教师师资队伍建设的解决策略,提升指导教师的职业化能力和素质,加强"双师"队伍建设,是提高高职院校就业创业指导服务水平的关键。

河北承德“一村一名大学生”培养模式与绩效研究——以河北旅游职业学院为例

以河北旅游职业学院为例,在介绍研究背景的条件下,提出了河北省承德市"一村一名大学生"的实践内容,并分析了所取得的绩效。

白菜型油菜PABP5基因启动子的克隆及表达特性分析

本研究中利用基因组步移法从白菜型油菜中克隆到Poly(A)结合蛋白基因PABP5起始密码子上游长588bp的一段序列,经软件分析预测表明,该序列具有典型的启动子结构,并且具有多个与花药特异性表达相关的顺式作用元件,如TATA box,CAAT box,AGAAA motif,AGGTCA motif,AAACCCTAA motif,GTGA motif等。为了研究该片段的表达特性,本文将克隆到的序列置换pPBI121中的CaMV35S启动子,驱动其下游的GUS基因,构建了植物表达载体,转化拟南芥,获得了转基因植株。组织化学染色表明,在PABP5启动子Ppabp5的驱动下,报告基因GUS在拟南芥的根尖、第一片真叶叶原基以及花药中特异表达。本研究为PABP5基因的进一步功能研究奠定了基础。

高职院校创新创业教育与就业指导相融合的实践探索

高职院校创新创业教育是综合素质教育的深化和具体化,将创新创业教育融入到就业指导全过程,以体验式教学为主体培养学生创业意识、创新精神和创新创业能力,以第二课堂活动为载体培养学生创业品质,引导学生树立"大创业"就业理念。

油料作物EST资源的生物信息学分析

利用生物信息学方法,收集整理GenBank数据库中截至2008年5月收录的油料作物油菜、花生、芝麻、大豆、向日葵、蓖麻、亚麻、棕榈等八种油料作物的表达序列标签(EST)序列信息,共获得1,185,911条EST序列,使用Crosmatch、RepeatMask-er、Phrap、CAP3、EMBOSS、Blast、EST-pipeline、ORF finder、Interproscan、blast2go、IdentiCS等软件,基于Linux操作系统,进行了综合及分类分析。共获得289,892条UniEST序列,通过以上对EST序列信息的基因注释信息,筛选出与油脂代谢相关的基因信息,并以此为基础构建了油料作物油脂代谢途径比较结构图。本研究为油料作物油脂代谢相关基因数据库的构建和不同油料作物油脂代谢异同的比较打下基础。

饮用水中粪性大肠菌群检测方法的研究与应用

粪性大肠菌群是总大肠菌群的—部分。为了区别存在于自然环境中的大肠菌群和存在于温血动物肠道内的大肠菌群，刊各温度提高到44.5℃±0.2℃，在此条件下生长的菌群被称为粪性大肠菌群。通过对“粪陆大肠菌群”的检测可以直接了解水质污染的途径是来自于粪便而不是其它的污染渠道。所以粪性大肠菌群的检测更具有它的现实意义和必要性。

拟南芥AtGA3OX1和AtGA3OX2基因影响茎秆次生细胞壁增厚的分子机理

赤霉素不仅对植物的种子萌发、叶片伸展和开花结果有重要的影响,而且在茎秆的发育过程中扮演关键的角色。它的生物合成受到多种酶的调控,其中赤霉素3-氧化酶(GA3OX)是关键的限速酶,备受重视。拟南芥AtGA3OX基因由4个成员组成,其中AtGA3OX1和AtGA3OX2基因在茎中超量表达,可能与茎的发育有关。目前,尚未见到AtGA3OX1、AtGA3OX2基因调控次生细胞壁增厚的报道。文章以拟南芥AtGA3OX1和AtGA3OX2基因双突变体atga3ox1atga3ox2为材料,系统研究了AtGA3OX1和AtGA3OX2基因对次生细胞壁的影响。结果表明:同时突变AtGA3OX1和AtGA3OX2基因不仅显著抑制了茎秆次生细胞壁纤维细胞的增厚(对导管细胞没有影响),而且也明显降低了次生细胞壁3个组分(纤维素、半纤维素和木质素)的含量。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进一步分析次生细胞壁3个组分生物合成基因及相关的转录因子的表达情况,结果显示这些基因在双突变体中均受到显著影响,表明拟南芥AtGA3OX1和AtGA3OX2基因可能是通过调控这些转录因子进而调控了次生细胞壁的加厚。研究结果为基因工程调控拟南芥AtGA3OX1、AtGA3OX2基因(或其他物种同源基因),进而增强粮食作物抗倒伏性和提高能源植物纤维生物质量提供了理论依据。

《呐喊》、《徬徨》叙述视角探析

叙述视角的成熟,是现代小说成熟的一个重要标志。鲁迅小说《呐喊》、《徨》中有五种叙述视角:即第一人称主人公叙述与第一人称见证人叙述;第三人称全知全能叙述和第三人称旁观者叙述及第三人称人物有限视角叙述。因而《呐喊》、《徨》比之古典小说更利于传递作者的情感信息和认知信息,具有与古典小说完全不同的现代性质。从叙述视角角度来看,《呐喊》、《徨》的风格特征除了长期以来公认的"深沉幽默"外,还应加上"迸发"这一特点。

草本植物半纤维素研究进展

半纤维素是草本植物细胞壁的重要组成成分,可以直接或者间接应用于食品、材料、医药、化工等领域。半纤维素成分多样,主要包括木聚糖(xylan)、木葡聚糖(xyloglucan)、甘露聚糖(mannan)和它们的衍生物。这些糖在结构上不仅有长短不一的主链,还有结构特异的侧链,在不同物种甚至同一物种不同细胞类型之间差异都很大。本文结合最新进展详细评述了草本植物主要半纤维素成分的结构、生物合成过程以及在生长发育过程中的作用,为全面、深入研究草本植物半纤维素奠定基础。

甘蓝型油菜作图群体亲本基因组及性状QTL密集区变异特点

为了解作图群体亲本间基因组和密集QTL区的遗传变异,促进QTL定位与克隆,本研究对一个甘蓝型油菜(Brassica napus)重组自交系(recombinant lnbred lines,RIL)群体双亲M083和888-5(二者株高、分枝数、开花时间、菌核病抗性等性状差异显著)的基因组进行深度测序和分析。研究结果表明:在M083和888-5中分别检测到SNP个数为1 941 397和2 046 009,In Del个数为410 961和428 572,结构变异个数为90 384和88 456,拷贝数变异个数为46 655和46 008。对包含开花时间、菌核病抗性、株高等多个性状主效QTL密集的A02染色体进行分析发现,在包括上述性状QTL密集的6.4~6.9Mb的0~8.5Mb基因组区间内,两品系SNPs和In Dels变异数量/密度总体呈相反的趋势;片段丢失也有热点区,888-5和M083均在两个共同区域高频发生,其中一个为QTL密集区;倒位在染色体上的分布虽然也是不均匀的,但两品种间发生区域不同,且与QTL无关。本文关于基因组变异(SNPs、In Dels、除倒位外的结构变异)热点区和QTL密集区重复的结论对性状控制位点精细定位、基因克隆及育种亲本选择有一定的指导意义。

杨树BAG基因的鉴定及表达模式分析

【目的】杨树是我国人工林的重要组成部分,也是公认的模式木本植物。植物BAG蛋白作为保守的分子伴侣,在生长发育和抗逆性中起到关键作用。研究杨树BAG蛋白家族的进化与表达模式,鉴定BAG基因的生物学功能对于林木遗传改良具有重要的指导意义。【方法】以拟南芥7个BAG蛋白为诱饵,搜索毛果杨、水稻和小立碗藓在线数据库(https://phytozome.jgi.doe.gov)获得这3个物种同源的BAG蛋白。利用生物信息学构建毛果杨、拟南芥、水稻和小立碗藓BAG蛋白的系统进化树,分析这些蛋白的生化特性及进化关系。结合杨树芯片(http://bar.utoronto.ca)数据,利用qRT-PCR检测杨树BAG基因的组织和逆境(旱和热胁迫)表达模式。【结果】毛果杨包含14个BAG基因,按照国际命名法(以染色体位置进行排序),将其命名为PtrBAG1—PtrBAG14。系统进化树表明杨树、拟南芥、水稻和小立碗藓BAG蛋白相对保守,大体可以分为2个亚家族。第1个亚家族中,大部分BAG蛋白N端含有UBL结构域,可能作为分子桥梁参与降解某些蛋白;第2个亚家族的大部分BAG蛋白含有IQ结构域,意味着这些蛋白可能与Ca^(2+)信号相关。杨树BAG基因在不同逆境处理(热胁迫和干旱胁迫)条件下有不同的表达模式。热处理诱导所有BAGs基因表达发生变化,其中BAG1、BAG4、BAG6、BAG7和BAG8表达被激活,而另9个BAG基因的表达被抑制;特别是,热诱导BAG4和BAG6表达上调超过90倍。干旱胁迫条件下,大部分BAG表达变化幅度很小。组织表达模式分析表明,大部分杨树BAG基因在根、叶、芽、小苗、雌花序、雄花序和木质部中表达量很低,只有BAG2和BAG12在木质部中大量表达。【结论】杨树BAG家族共有14个成员,大体分为2个亚家族,在进化上与本文选用的陆生植物拟南芥和水稻BAG蛋白有更高的相似性。杨树14个BAG基因可能都参与了热胁迫调控,但不同成员在抗热过程中起不同作用。相比而言,大部分杨树BAG基因可能并不参与抗旱。值得指出的是,杨树BAG4和BAG6可能在热胁迫中作用最明显,而BAG2和BAG12可能参与木材形成。

甘蓝型油菜CCCH基因BnaA07g26050D的克隆及表达分析

油菜是我国重要的油料作物,它的产量受到各种逆境胁迫的影响.我们之前的研究表明,拟南芥CCCH锌指蛋白At C3H14控制植株生长发育的诸多过程.在本研究中,我们证实甘蓝型油菜CCCH基因Bna A07g26050D(At C3H14的同源基因)响应盐胁迫和干旱胁迫.Bna A07g26050D蛋白C端包含两个串联的CX8CX5CX3H结构域,在酵母中具有转录激活活性,类似于At C3H14.将Bna A07g26050D融合GFP转化拟南芥原生质体,发现其主要定位于细胞质和P-body中.qRT-PCR检测Bna A07g26050D基因的组织表达模式,结果表明该基因主要在上部茎、根和花中大量表达,而在其他组织中表达较低.此外,qRTPCR证实Bna A07g26050D基因在盐胁迫和干旱胁迫下表达量都明显上调,证明该基因可能参与干旱和盐胁迫.我们的研究为利用基因工程技术培育耐盐、旱油菜新品种提供了基因源.

改进光照鲁棒的视觉背景提取算法

视觉背景提取算法(visual background extraction algorithm,ViBe)建立背景模型时采用首帧图像进行初始化容易引入鬼影,且在光照变化的情况下出现许多误检。针对这些问题,提出一种改进的视觉背景提取算法(Modified ViBe,MViBe)。用邻域像素具有空间一致性的性质对可疑的鬼影像素做出进一步判断,实现对鬼影的快速消除;根据光照变化的情况进行分类,对不同的情况做出相应改进,实现对光照变化的鲁棒;对检测出的结果进行后处理,实现更好的检测效果。实验结果表明,M-ViBe算法可以快速去除鬼影,提高了光照变化情况下的检测精度。

高三如何高效讲评试卷

准备好素材是高效讲评试卷的前提。备素材一般要从两个方面人手：一是教师一定要独立完成试卷。教师只有做了试题，才会有切身体会，讲评试卷时才容易引起学生的共鸣。二是教师必须认真批改试卷，注重收集有效信息并进行归类，对各题得分情况、习惯性错误、典型错误、审题错误等要做到心中有数，尤其要重视学生因明白了但未深刻理解而犯的错误。只有经过认真批改、科学归纳，讲评试卷时才可以做到有的放矢。

改写与比较:优化小说教学的新途径

改写法是一种常用而有效的教学法，只是不少教师为改写而改写，或为练写作而改写，以致不能发挥出改写法的真正优势。改写法与比较法结合使用正是笔者依据自己阅读与写作的体验对小说教学进行的一种探索，这种方法把阅读教学与写作教学融于一体．运用得当可以使学生收到读能透彻、写能明白的双重功效。使用这种方法的重点在于比较．即把改写的习作与经典小说进行比较，在比较中找差异，并引导学生去分析这种差异，借此提高学生的阅读与写作水平。下面笔者以《孔乙己》及《杜十娘怒沉百宝箱》为例，谈谈此种方法的具体运用。