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垂体腺苷酸环化酶激活肽基因的合成表达与活性研究 被引量:3
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作者 陈哲宇 柴延丰 +2 位作者 何成 路长林 吴祥甫 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第2期192-197,共6页
根据文献报道垂体腺苷酸环化酶激活肽 (pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAP)的氨基酸序列 ,推导出其核苷酸序列并设计成部分互补的 6条寡核苷酸片段 ,利用DNA合成仪人工合成、纯化这 6条寡核苷酸片段 ,通过片段退火... 根据文献报道垂体腺苷酸环化酶激活肽 (pituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAP)的氨基酸序列 ,推导出其核苷酸序列并设计成部分互补的 6条寡核苷酸片段 ,利用DNA合成仪人工合成、纯化这 6条寡核苷酸片段 ,通过片段退火、连接、克隆及测序鉴定获得了PACAP基因 .将PACAP基因克隆至 pGEX 4T 3质粒中转化BL2 1进行表达分析 ,融合蛋白约占细胞总蛋白的 30 % ,其中部分为可溶性 ,部分以包涵体形式存在 .通过亲和层析纯化GST PACAP融合蛋白 ,该蛋白质能促进PC12细胞轴突生长及脊髓神经元存活 . 展开更多
关键词 垂体腺苷酸环化酶激活肽 基因克隆 基因表达 PC12细胞 脊髓神经元
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重组大鼠质粒pEGFP-GDNF的构建和在脊髓内表达的实验研究 被引量:6
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作者 鲁凯伍 陈哲宇 +4 位作者 柴延丰 侯铁胜 傅强 路长林 李明 《中国神经科学杂志》 CSCD 2001年第3期226-229,共4页
采用RT PCR方法从大鼠胎脑组织总RNA中扩增出该基因的全序列cDNA ,并以融合蛋白方式克隆到增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)报告基因的真核表达载体中 ,成功构建了重组质粒 pEGFP GDNF在体表达载体。采用基因注射法将阳离子脂质体DC Chol和pEG... 采用RT PCR方法从大鼠胎脑组织总RNA中扩增出该基因的全序列cDNA ,并以融合蛋白方式克隆到增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)报告基因的真核表达载体中 ,成功构建了重组质粒 pEGFP GDNF在体表达载体。采用基因注射法将阳离子脂质体DC Chol和pEGFP GDNF基因混合后转染至大鼠胸段脊髓组织中 ,观察GDNF在大鼠脊髓中的表达。RT PCR结果表明注射局部GDNFmRNA表达增加。荧光显微镜下观察发现 ,注射局部灰质和白质神经细胞内均有较多绿色荧光蛋白表达。本研究结果提示 ,阳离子脂质体介导GDNF体内转基因的方法是可行的 ,EGFP可作为报告基因观察GDNF在体内的表达。 展开更多
关键词 胶质细胞源性神经营养因子 逆转录-聚合酶链反应 融合蛋白 阳离子脂质体 基因转染 脊髓 大鼠 重组质粒
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中国生物医学期刊应用结构式摘要的调查分析
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作者 李胜利 柴延丰 +4 位作者 刘雪立 乔汉臣 刘鹤香 谭豫川 李梅 《中华医学写作杂志》 1996年第4期41-44,共4页
为促进我国生特医学期刊结构式摘要的应用并使之规范化,对其应用现状进行了调查。我国应用结构式摘要的期刊己由1995年的7份增长到37份,摘要内容有多种形式,但以4项式结构式摘要为主,共28份;应用结构式摘要的论文以论著为主,少数... 为促进我国生特医学期刊结构式摘要的应用并使之规范化,对其应用现状进行了调查。我国应用结构式摘要的期刊己由1995年的7份增长到37份,摘要内容有多种形式,但以4项式结构式摘要为主,共28份;应用结构式摘要的论文以论著为主,少数期刊的其它论文也有用结构文摘要者;25份采用了中英文结构式摘要,仅中文或英文摘要为结构式摘要者分别为3份和9份:分段排列者12份,连排者25份;摘要的编排格式有较大差异。建议我国生特医学期刊奎部采用结构式摘要,提倡应用4项式、Relman式和LiuQiao式站构式摘要,并对结构式摘要的编排格式提出了建议。 展开更多
关键词 结构式摘要 英文摘要 论文 编排格式 论著 中文 差异 生物医学期刊 中国 排列
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GDNF家族信号传导的研究进展——来自基因工程动物模型的启示
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作者 柴延丰 陈哲宇 +2 位作者 何成 崔瑞耀 路长林 《国外医学(分子生物学分册)》 CSCD 2001年第1期58-61,共4页
生化及GDNF家族相关基因工程动物模型的研究使GDNF家族在信号传导、功能及发育方面的作用更为清楚。Ret和GFRαs在GDNF家族信号传导中均必不可少 ,GFRαs是真正受体成分且有受体特异性 ,Ret单独不结合配体但调节配体和GFRαs间的作用。... 生化及GDNF家族相关基因工程动物模型的研究使GDNF家族在信号传导、功能及发育方面的作用更为清楚。Ret和GFRαs在GDNF家族信号传导中均必不可少 ,GFRαs是真正受体成分且有受体特异性 ,Ret单独不结合配体但调节配体和GFRαs间的作用。Ret激活后发生磷酸化并激活细胞内信号传导通路。 展开更多
关键词 胶质细胞源性神经营养因子 GFRαs 受体酪氨酸激酶 信号传导
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