海鞘真菌的形态鉴定及其代谢产物抗菌活性研究

为寻找产生新颖抗菌活性物质的海洋真菌,以海鞘为原料,采用平板涂布法分离出14株真菌,并对其进行形态学鉴定和抗菌活性的初筛。结果显示:从海鞘中共分离出14株真菌,根据形态观察初步鉴定其分属青霉属(Penicillium sp.)、曲霉属(Aspergillus sp.)、枝孢属(Cladosporium sp.)、麦轴梗霉属(Tritirachium sp.)等4个属。14株菌中有抗菌活性的共11株,优选出抗菌活性较强抗菌谱较广的4株菌分别是Asc-2-4(青霉属)、Asc-2-12(青霉属)、Asc-1-1(青霉属)和Asc-2-1(曲霉属)。青霉属菌株Asc-2-12的抑菌活性最明显,抑菌圈直径最大达到21.91 mm。海鞘共附生真菌是寻找抗菌物质的一个资源,其中的3株青霉属和1株曲霉属的抗菌活性有深入研究的价值。

高产不饱和油脂海鞘真菌桔青霉Asc-2-4的诱变选育

诱变育种是获得高产菌株,实现微生物工业化生产油脂的重要措施。以前期获得的高产不饱和油脂菌株桔青霉(Penicillium citrinum)Asc-2-4为出发菌株,利用丙二酸建立快速筛选高产不饱和脂肪酸突变菌的方法,通过紫外线-氯化锂复合诱变得到1株高产油脂突变菌Asc-2-4-1,油脂含量比出发菌株提高了92.98%。经过初步的培养基无机盐优化,其油脂得率和不饱和脂肪酸产量达到了7.10 g/L和3.84 g/L,与Asc-2-4相比,分别提高了84.42%和77.78%。结果表明,通过复合诱变选育技术可选育出高产突变菌株,选育的Asc-2-4-1可望作为产油微生物被开发利用。

海鞘中产油脂共附生真菌的筛选及脂肪酸组成成分分析

从20株海鞘共附生真菌中筛选产油脂菌。采用苏丹混合溶液染色法初筛,摇瓶复筛,酸热法提取油脂油脂,气相色谱-质谱联用法(GC-MS)测定其脂肪酸组成,形态学观察结合分子生物学鉴定产油脂真菌。结果表明:经初筛和复筛得到3株油脂含量均达20.00%以上的菌株,分别为菌株P2-18、P1-17和P2-4,脂肪酸组成分析不饱和脂肪酸分别占其脂肪酸组成的93.90%、55.80%和65.00%。其中γ-C18:3(γ)亚麻酸、C16:1棕榈一稀酸和C18:1油酸含量最多。P2-4含23.2%的γ-C18:3(γ)亚麻酸,约占其不饱和脂肪酸的24.50%。3株真菌经形态学鉴定,结合分子生物学ITS区序列鉴定,菌株P2-4为桔青霉(Penicillium citrinum),P1-17为青霉属(Penicillium sp.12 BRO-2013),P2-18为土曲霉(Aspergillus terreus)。因此,该海鞘共附生真菌具备开发微生物功能性油脂的潜力,具有良好的开发应用前景,值得进一步研究。