目的研究BMP-2、iRoot BP Plus、BMP-2与iRoot BP Plus联合对牙髓细胞增殖、分化方面的影响,以期为活髓保存治疗提供实验参考。方法采用改良组织块酶消化法进行人牙髓细胞(hDPCs)的原代及传代培养。经流式细胞仪对所培养的牙髓细胞进行...目的研究BMP-2、iRoot BP Plus、BMP-2与iRoot BP Plus联合对牙髓细胞增殖、分化方面的影响,以期为活髓保存治疗提供实验参考。方法采用改良组织块酶消化法进行人牙髓细胞(hDPCs)的原代及传代培养。经流式细胞仪对所培养的牙髓细胞进行鉴定。取生长状态良好的3-5代牙髓细胞分为四组:A组为对照组,B、C、D组分别加入0.2 mg/mL iRoot BP Plus、0.2 mg/mL iRoot BP Plus+100 ng/mL BMP-2及100 ng/mL BMP-2。培养1、3、5、7 d后绘制各组细胞生长曲线;培养5、7 d通过qPCR检测成牙本质相关基因ALP、DSPP、BSP的mRNA相对表达量;培养7、14d行ALP活性检测。结果成功分离培养出人牙髓细胞,经流式细胞仪检测证明所培养的牙髓细胞具有间充质干细胞特性。随着培养时间的延长,各组牙髓细胞OD值逐渐增长,3~5 d时为对数增长期,7 d以后缓慢增长;培养第1 d各组OD值之间无明显差异(P>0.05),第3、5、7 d时C组OD值均高于其它各组,差异具有统计学意义(P<0.05),其中第3、5 d时B组与D组之间无明显差异(P>0.05),第7 d时D组OD值明显高于B组OD值,差异具有统计学意义(P<0.05)。qPCR结果显示:培养5 d时,除BSP基因外,ALP、DSPP基因mRNA相对表达量均提高,其中C组显著高于B、D组,D组高于B组,差异具有统计学意义(P<0.05);培养7 d时,各组基因表达量均上调,DSPP、ALP、BSP基因mRNA相对表达量均高于A组,其中C组高于B、D组,D组高于B组,差异具有统计学意义(P<0.05)。ALP活性检测显示:培养7、14 d时,B、C、D组ALP活性均高于A组,其中C组最高,D组次之,最后是B组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论BMP-2较iRoot BP Plus在诱导hDPCs增殖、分化方面更具优势;两者联合可发挥协同作用,较单独使用对人牙髓细胞增殖及成牙本质分化有明显促进作用。展开更多