海参乙酰胆碱酯酶的酶学特性研究

对海参乙酰胆碱酯酶（AChE）粗酶的酶学性质进行研究。采用含0.1%Triton X-100的PBS缓冲液（0.1 M,pH7.4）分别从海参肠和海参体壁中提取AChE,配合Ellman法测定AChE酶活力。结果表明,海参肠与体壁AChE具有相似的酶学性质,其最适反应pH值为8.0,pH在6~8时稳定;最适反应温度为35℃左右,在25~45℃内热稳定性较好。海参乙酰胆碱酯酶粗酶液能有效水解碘化硫代乙酰胆碱（AcSChI）,但对碘化硫代丁酰胆碱（BuSChI）的作用较弱。当底物AcSChI浓度大于50 mM时产生明显的底物过量抑制效应。金属离子Sn2＋、Zn2＋、Hg2＋、Ag＋、Cr6＋、Cu2＋及毒扁豆碱和BW284c51均对海参肠和海参体壁乙酰胆碱酯酶有不同程度的抑制作用。

内源酶对刺参肠自溶的作用

以刺参肠为原料,通过诱导自溶并添加各种酶抑制剂,以三氯乙酸可溶性寡肽和还原糖释放量为指标,并采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测方法,研究内源酶在刺参肠自溶过程中的作用。结果表明,在一定的浓度范围内,胃蛋白酶抑制剂、胰蛋白酶抑制剂、丝氨酸蛋白酶抑制剂、α-淀粉酶抑制剂和β-1,3-葡萄糖苷酶抑制剂对刺参肠的自溶均具有一定的抑制作用,且丝氨酸蛋白酶抑制剂N-甲苯磺酰-L-赖氨酸氯甲基化酮作用较强。说明胃蛋白酶、胰蛋白酶、丝氨酸蛋白酶、α-淀粉酶和β-1,3-葡萄糖苷酶参与刺参肠自溶过程。