上中下通用痛风汤对大鼠急性痛风关节炎模型TLR/MYD88信号通路影响的研究

目的:研究上中下通用痛风汤对尿酸钠诱导大鼠急性痛风关节炎(GA)滑膜组织TOLL样受体(TLR)/髓样分化因子88(MYD88)信号通路相关蛋白表达的影响,揭示上中下通用痛风汤治疗痛风关节炎的作用机制。方法:取60只SD雄性大鼠,按随机数字表法分成对照组、模型组、吲哚美辛组、上中下通用痛风汤高、中、低剂量组6组各10只。除对照组外,其余5组采用尿酸钠晶体溶液踝关节注射建立急性痛风关节炎模型,以上中下通用痛风汤与吲哚美辛对比治疗,观察关节肿胀度、关节滑膜病理变化和关节滑膜TLR/MYD88蛋白表达。结果:上中下通用痛风汤高、中、低剂量在致炎后各时间点均能不同程度地减轻关节肿胀程度,可改善急性痛风关节炎大鼠模型踝关节组织的炎细胞浸润、滑膜组织破坏、血管扩张及充血,滑膜组织中TLR4、MYD88蛋白表达下降,与模型对照组比较差异有统计学意义。结论:上中下通用痛风汤对尿酸钠所致急性痛风关节炎症有较好的抗炎镇痛作用,其作用机制可能与降低炎症信号通路TLR4、MYD88的表达有关。

二参颗粒对冠心病心肌缺血大鼠NF-κB信号通路中炎症因子的影响

目的观察二参颗粒对冠心病心肌缺血大鼠 NF-κB 信号通路中炎症因子的影响。方法 60只健康雄性SD大鼠,随机分为6组:正常组、模型组、二参颗粒高剂量组、中剂量组、低剂量组,冠心生脉丸对照组。于末次灌胃给药前72 h,连续3 d腹腔注射垂体后叶素形成冠心病心肌缺血模型。检测二参颗粒对冠心病大鼠心电图S-T段的影响、采用酶联免疫法测定血清IL-8和IL-6影响、采用实时定量PCR方法分析TLR4、NF-κB含量的影响。结果与模型对照组相比,二参颗粒治疗后二参颗粒高、中、低剂量组各时间点T波的变化值显著降低;与对照组相比,二参颗粒高剂量组、中剂量组、低剂量组均能明显降低大鼠血清IL-8和IL-6含量(P<0.05);冠心病大鼠心脏细胞TLR4和NF-κB基因表达水平明显高于正常组,二参颗粒高、中、低剂量组和冠心生脉丸组对大鼠TLR4和NF-κB基因的表达明显下降,与模型组比较差异显著(P< 0.01)。结论二参颗粒可有效改善冠心病大鼠心律失常,激活NF-κB 信号通路,从而阻止冠心病大鼠炎症反应的发生与发展,充分发挥心肌细胞的营养和再生作用。

上中下通用痛风汤对痛风性关节炎模型TLR4信号通路的影响

目的研究上中下通用痛风汤对大鼠急性痛风性关节炎TLR4信号通路的影响,揭示上中下通用痛风汤治疗痛风性关节炎的作用机制。方法 60只SD雄性大鼠,随机分成6组,即对照组,模型组,上中下通用痛风汤高、中、低剂量组,吲哚美辛组。除对照组外,其余5组采用尿酸钠晶体溶液踝关节注射建立急性痛风性关节炎模型。观察大鼠关节肿胀度,关节滑膜病理变化,关节滑膜TLR4/NF-kb表达。结果上中下通用痛风汤可减轻关节肿胀程度;改善大鼠模型踝关节组织的炎细胞浸润;滑膜组织中TLR4、NF-kb蛋白表达下降,与模型对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论上中下通用痛风汤具有抗炎镇痛作用,可能与调节TLR4信号通路有关。

二参颗粒对垂体后叶素诱导冠心病心肌缺血大鼠血液流变学及血脂的影响

目的:观察二参颗粒对冠心病心肌缺血大鼠血液流变学指标及血脂的影响。方法:将雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、二参颗粒高剂量组、中剂量组、低剂量组、冠心生脉丸组6组,通过高脂饮食喂养和腹腔注射垂体后叶素形成大鼠冠心病心肌缺血模型,检测二参颗粒对冠心病心肌缺血大鼠心电图ST段的影响、血液流变学指标及血清TC、TG含量的影响。结果:与正常组比较,模型组心电图ST段、血液流变学指标及血清TC、TG含量均显著性升高;与模型组比较,二参颗粒高、中剂量组心电图T段区、低切变率时全血黏度、大鼠血清TC、TG含量均显著性降低。结论:二参颗粒可有效改善冠心病大鼠心律失常,可降低冠心病大鼠全血黏度,能有效降低冠心病大鼠血清中TC和TG含量。

参景固本方对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠的抗氧化作用

目的研究参景固本方对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠的影响。方法将70只小鼠随机分为7组,即正常对照组,模型组,参景固本方低、中、高剂量组,金匮肾气丸组及维生素E组,每组10只,除正常对照组外全部小鼠按125 mg/kg剂量颈背部皮下注射D-半乳糖建立衰老模型。以参景固本方与金匮肾气丸和维生素E对比治疗,观察其学习记忆能力,测定增重率、胸腺指数及脾脏指数,测定脑组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)等指标。结果参景固本方高、中、低剂量组平均寻台时间显著降低(P<0.01);参景固本方高剂量组增重率降低(P<0.01);参景固本方高剂量组胸腺指数及脾脏指数明显增高(P<0.01),参景固本方中剂量组脾脏指数略增高(P<0.05);参景固本方高剂量组MDA含量显著降低(P<0.01),SOD、T-AOC活性显著升高(P<0.01),参景固本方中剂量组SOD活性略有升高(P<0.05)。结论参景固本方能够改善D-半乳糖致衰老模型小鼠的学习记忆能力,提高脑组织的抗氧化能力,具有一定延缓脑衰老的作用。

参景固本方体外抗氧化能力的研究

目的采用对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的清除实验,对参景固本方的清除自由基能力和体外抗氧化活性进行评价。方法以维生素C(VC)为对照试剂,进行DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基清除实验。结果参景固本方对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基均有不同程度的清除作用,在浓度为1 mg/m L时对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的清除率达到了71.18%、66.58%、36.59%。结论参景固本方具有一定的抗氧化作用。

参景固本方抗衰老及调节血脂作用研究

目的研究参景固本方对D-半乳糖致亚急性衰老模型大鼠的影响。方法将60只大鼠随机分为6组,即正常对照组、模型组、参景固本方低、中、高剂量组及金匮肾气丸组,每组10只,全部大鼠(除正常对照组外)按125 mg/kg剂量颈背部皮下注射D-半乳糖建立衰老模型。以参景固本方与金匮肾气丸对比治疗,测定增重率、胸腺指数及脾脏指数,测定脑组织中MDA、T-SOD含量以及血脂变化。结果参景固本方组胸腺指数及脾脏指数均明显升高,与模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,参景固本方中剂量组SOD活性明显升高(P<0.05),参景固本方高剂量组MDA含量降低,SOD活性明显升高(P<0.01);与模型组比较,参景固本方中剂量组HDL-C含量显著降低(P<0.01),参景固本方高剂量组T-CHO含量明显升高(P<0.01),HDL-C含量显著降低(P<0.01)。结论参景固本方具有一定的抗氧化、抗衰老作用,同时也具有一定的改善血脂平衡的作用。

辛开苦降法对脾胃湿热证小鼠炎症因子和免疫功能的影响

目的观察连朴饮对小鼠脾胃湿热证的炎症因子与凋亡基因、抑癌基因蛋白表达的调节作用,探讨辛开苦降法对脾胃湿热证免疫功能的影响。方法采用内因湿热法即高脂高糖饮食复制脾胃湿热证动物模型。SPF级昆明小鼠,雌雄各半随机分成6组,即正常组,模型组,黄芩滑石汤组,连朴饮低、中、高剂量组(6.2、12.4、24.8 g/kg),每组10只。用ELISA法检测干扰素-γ(interferen-gamma,IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)的含量;用HE染色法观察胃肠组织形态学的变化;用蛋白质印迹法检测Bcl-2、p53的蛋白表达水平。结果与正常组相比,模型组小鼠血清中IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4值明显升高(P<0.05)。与模型组比较,连朴饮各剂量组均显著降低小鼠血清中上述指标的含量(P<0.05)。高剂量组的指标降低最明显,其次是中剂量组,低剂量组的指标降低的较少。结论连朴饮能降低IFN-γ、IL-4值,抑制Bcl-2、p53蛋白的表达,其发挥作用的机制可能是降低机体的炎症反应,改善免疫状态,恢复免疫平衡。

湿热中阻方对脾胃湿热证小鼠氧化应激和炎症因子影响研究

目的观察湿热中阻方对脾胃湿热证小鼠氧化应激和炎症因子的调节作用,探讨湿热中阻方治疗脾胃湿热证的作用机制。方法采用高脂高糖饮食建立脾胃湿热证模型,以湿热中阻方(6.2、12.4、24.8 g/kg)进行干预。采用Western blotting法检测细胞磷酸化p38丝裂原活化蛋白酶(P-p38MAPK)、磷酸化核因子-κB(P-NF-κB)、磷酸化人核因子κB抑制蛋白α(P-IKBα)表达水平;ELISA法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的释放和检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)含量;实时荧光定量PCR(qPCR)检测COX2 mRNA、HO-1 mRNA、iNOS mRNA表达。观察不同浓度的湿热中阻方和阳性药对脾胃湿热证小鼠炎症因子诱导的氧化应激影响。结果与正常组比较,湿热模型组小鼠SOD、CAT、GSH-Px含量显著降低(P<0.001),LDH、COX2 mRNA、HO-1 mRNA、iNOS mRNA含量显著升高(P<0.001),MDA含量明显升高(P<0.05),TNF-α、IL-6含量显著升高(P<0.01);P-p38MAPK、P-NF-κB、P-IKBα含量显著升高(P<0.001)。与湿热模型组比较,湿热中阻方组LDH释放水平显著降低(P<0.05、P<0.01、P<0.001);减少了炎症因子COX2 mRNA、HO-1 mRNA、iNOS mRNA表达;ROS生成受到显著抑制(P<0.01);TNF-α、IL-6释放受到显著抑制(P<0.001);丙二醛(MDA)释放显著降低;SOD、CAT、GSH-Px释放均显著升高(P<0.05、P<0.01、P<0.001);湿热中阻方高剂量组P-p38MAPK、P-NF-κB、P-IKBα蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论湿热中阻方可以通过抑制氧化应激,增加细胞内SOD、CAT、GSH-Px的含量,降低ROS、MDA、LDH的含量,改善脾胃湿热型小鼠炎症反应。

金银花黄酮提取物的降血糖作用

目的:研究金银花黄酮提取物的降血糖作用。方法:用75%乙醇对金银花黄酮进行超声提取,小鼠适应性喂养一周,将其分为正常组、模型组、金银花黄酮提取物低(200 mg/kg·BW)、高剂量组(400 mg/kg·BW)、阳性组(200 mg/kg·BW),除正常组外,其余各组一次性腹腔注射STZ(130 mg/kg·BW),造模成功后开始灌胃,实验期间记录小鼠体重及空腹血糖值(FBG),并进行口服糖耐量(OGTT)测试,测定小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的变化,ELISA法测定小鼠肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素6(IL-6)的变化。结果:金银花黄酮提取物含量为43.62 mg/g,与模型组相比,试验组能够有效缓解1型糖尿病小鼠(T1DM)体重的下降,极显著降低其FBG(P<0.01),极显著提高OGTT水平(P<0.01),金银花黄酮高剂量组TC、TG、LDL-C、MDA极显著低于模型组(P<0.01),HDL-C、SOD、GSH、CAT极显著高于模型组(P<0.01)。与模型组相比,经金银花黄酮提取物治疗后的TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-6水平极显著下降(P<0.01),并能够改善糖尿病引起的肝脏损伤。结论:金银花黄酮提取物具有较好的降血糖作用,并能够改善T1DM小鼠异常脂代谢、炎症以及肝脏损伤。

二参汤治疗本虚标实类疼痛疾病的应用研究

以本虚标实为病机的疾病,多以气虚,血虚常见;致病因素主要有气滞、血瘀、痰浊等,这些因素可引发脏腑功能失调,经络气血运行不畅的情况,临床症状多以疼痛为主。基于此类病机,临床当从益气活血祛瘀,祛痰止痛,通窍活血等角度立法成方。此文探索二参汤在治疗本虚标实类疼痛疾病的用药调整,以及应用面的拓展通过对本虚标实类疼痛疾病病因病机的分析,研究二参汤的临床应用。发现二参汤治疗本虚标实类疼痛疾病的用药变化灵活,尚有不少可拓展空间以供研究。

二参颗粒对氯化钴诱导的H9C2细胞氧化应激介导的细胞凋亡的保护作用

目的:通过观察二参颗粒对氯化钴(CoCl2)诱导的缺氧损伤和大鼠心肌细胞H9C2凋亡的影响,阐明二参颗粒对心脏的保护作用。方法:以500μmol/L的CoCl2与H9C2细胞共同作用24 h,建立心肌细胞缺氧缺血模型。将H9C2细胞分为空白对照组、模型对照组、二参颗粒50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL组。酶联免疫法检测胞外培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量,流式细胞术检测胞内活性氧(ROS)含量、线粒体膜电位(MMP)和凋亡水平,蛋白质印迹分析法检测细胞内Bcl-2/Bax、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9和Cleaved PARP的表达水平。结果:与空白对照组比较,模型对照组细胞活力下降、活性氧(ROS)荧光表达值升高、线粒体膜电位JC-1单体阳性细胞显著升高以及细胞培养液中LDH含量升高,凋亡率显著升高,凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9和Cleaved PARP的蛋白表达上调,Bcl-2/Bax比值降低(P<0.05或P<0.01);与模型对照组比较,二参颗粒能有效改善细胞活力,降低LDH的含量,显著降低胞内ROS荧光表达值,改善线粒体膜电位和凋亡水平,下调凋亡相关蛋白Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9和Cleaved PARP的蛋白表达,升高Bcl-2/Bax的比值(P<0.05或P<0.01)。结论:二参颗粒可以抑制CoCl2诱导的心肌细胞ROS水平,减少氧化应激发生,进而改善氧化应激介导的心肌细胞的细胞凋亡。