利用内生细菌防治小麦全蚀病的研究

为了研究小麦内生细菌对小麦全蚀病的生物防治作用,采用表面消毒后涂布平板的方法,从来自河南麦区不同品种的82份健康小麦根系内分离获得530株小麦内生细菌。采用土壤浇灌法,于小麦活体上测定了内生细菌对小麦全蚀病的生防效果,从中获得15株可显著降低小麦全蚀病发病率和严重度的细菌。其中菌株WG-2和Y106对小麦全蚀病的防治效果分别达到83.25%和80.37%,显著优于常用化学农药三唑酮的防治效果(77.05%)。综合利用形态学、生理生化分析以及16SrDNA序列测定分析等方法对WG-2和Y106进行鉴定,结果表明,WG-2属于变形斑沙雷氏菌(Serratia proteamaculans),Y106属于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。将WG-2和Y106 2个菌株混合,测定菌株混合后对小麦全蚀病的防治效果,发现菌株混合使用不能提高生防效果,2个菌株之间可能具有干扰作用。利用不同平板测定了WG-2和Y106 2个菌株对小麦全蚀病菌的拮抗能力以及产生葡聚糖酶、几丁质酶、壳聚糖酶和蛋白酶等真菌细胞壁降解酶的能力,发现2个菌株间差别明显,暗示不同内生生防菌株对小麦全蚀病可能具有不同的生防机制。

生防菌株336x在小麦内部的定殖研究

变形斑沙雷氏菌(Serratia proteamaculans)336x是一株对小麦全蚀病具有生防作用的小麦内生细菌。为研究336x在小麦内部的定殖及分布,将336x基因组酶切片段与携带绿色荧光蛋白基因(gfp)的质粒pAD123进行连接,筛选产生荧光的质粒并转化336x菌株,获得336x的荧光标记菌株336x-gfpa。对比336x-gfpa与野生型菌株在小麦中的定殖能力及对小麦全蚀病的生防能力,发现二者无显著差异;荧光显微镜观察结果表明,336x-gfpa主要定殖于小麦根部细胞间隙和维管组织。