附子乌头草乌及其炮制品的毒效比较

目的:从毒效角度出发,比较附子、乌头、草乌不同炮制品及提取物的毒性,为研究和应用这些生药提供相关实验依据。方法:以小鼠为主要研究对象,观察急性死亡率,心电影响阈剂量来观察毒性,以镇痛及其抗室颤来观察其药效。结果:从急性毒性看,白附片和黑顺片毒性较小,其最大给药剂量均为20.52 g.kg-1。盐附子毒性较大,LD50为11.301 g.kg-1。结合相关活性综合考察,临床安全指数由大到小依次为:黑顺片>白附片>盐附子。草乌毒性较大(LD50 292.38 mg.kg-1),经炮制后毒性明显减小,约降低70.32倍。结论:附子、乌头炮制后起到了减毒存效的作用,而草乌炮制后则表现为毒效同时降低。

人参皂苷抗金葡菌肺感染的作用

目的:观察研究人参皂苷对金葡菌感染的作用及其特点。方法:体外肺AⅡ型上皮细胞及小鼠肺感染为模型,观察金葡菌感染后细胞侵染相关因子、炎性相关因子以及细菌数和死亡率,以及人参皂苷及人参皂苷Rg1的作用。结果:金葡菌感染后,人参皂苷能够明显降低胞内菌含量,降低粘附因子及其整合素的表达,抑制相关炎性因子,人参皂苷Rg1是其主要活性成分。结论:在抗金葡菌急性感染过程中,人参皂苷发挥了对感染细胞和组织的保护作用,而这些作用不完全依赖于机体免疫系统的功能。

黄芩苷PC12细胞跨膜转运的实验研究

目的研究黄芩苷神经元跨膜转运的特点,部分阐释黄芩苷发挥神经系统保护作用的物质性基础。方法以PC12细胞为研究对象,使用高效液相色谱(HPLC)、质谱(MS)法检测黄芩苷孵育细胞内的物质含量及相关代谢产物。结果 100 mg.L-1黄芩苷给药30 min后,胞内黄芩苷浓度达峰值,8 h后胞内已测不出黄芩苷;在50～400 mg.L-1的给药浓度下,胞内黄芩苷含量与给药剂量呈正相关;抑制剂Verapamil与Nimodipine对黄芩苷转运有明显影响;同时胞内检测出黄芩素、6-甲氧基-黄芩苷两种结构类似物。结论黄芩苷能够浓度依赖性的跨膜入胞,此过程受相关抑制剂影响,并产生代谢产物。

统计学分析方法在普鲁兰发酵培养基优化中的应用

为了得到普鲁兰发酵的最佳培养基,在单因子实验的基础上,应用Plackett-Burman设计法对影响普鲁兰发酵的基本培养基组分中的关键因子进行了优选,并进一步采用响应面分析法(Response Surface Methodology,RSM)对影响普鲁兰产量的关键因素最佳水平范围作了深入的研究。实验结果表明:影响普鲁兰产量的关键因素为:葡萄糖、酵母粉和NaCl的浓度。通过RSM模型的拟合和推算得到在葡萄糖、酵母粉和NaCl质量浓度分别5.675、0.405、0.0815 g/dL时,此时模型预测发酵最佳的产量为32.071 44 g/L,验证值为32.16 g/L,预测值与验证值之间吻合较好,比原始培养基提高了约5倍。

正品及伪品大黄药效与毒性的比较研究

目的:比较正品大黄与华北大黄的药效和毒性,论证临床上两种药物混用时的可行性。方法:通过整体动物实验观察小鼠排便潜伏期及其总排便量;小肠运动实验观察药物的小肠推进率;纤维蛋白形成实验观察药物对凝血时间的影响;小鼠LD50观察药物急性毒性。体外实验分别观察药物对小肠大肠的收缩影响;MTT法测定药物对肝细胞HepG2细胞的毒性。结果:正品大黄提取物能明显促进小鼠排便,但是对小肠推进无明显作用;口服等量的华北大黄提取物对排便无明显作用,但是能促进小肠的推进。正品大黄大剂量能缩短凝血时间,华北大黄无明显作用。华北大黄的细胞毒性大于正品大黄。华北大黄的急性毒性大于正品大黄,两者不同比例配合的急性毒性显示,毒性大小与华北大黄呈正相关,而与正品大黄呈负相关。土大黄苷未观察到明显的毒性反应。结论:华北大黄与正品大黄在药效与毒性方面有较大不同,不宜混用。

从黄芩苷对TLRs-NOD2的调控探讨肺、脑相关炎性反应的共同机制

目的:通过研究黄芩苷对脑缺血和肺炎模型中TLRs-NOD2受体的影响,探讨肺、脑相关炎性病变的共同机制。方法:分别建立小鼠脑缺血再灌和急性肺炎模型,造模后对小鼠腹腔注射黄芩苷,检测小鼠脑和肺组织中TLR2/4、NOD2和TNFα蛋白的表达。结果:脑损伤模型小鼠脑组织和肺组织中,TLR2/4、NOD2和TNFα显著高表达,黄芩苷能够不同程度的下调这些因子;肺炎模型小鼠脑组织和肺组织中,TLR2/4、NOD2和TNFα不同程度的高表达,黄芩苷可以在不同程度上抑制这些因子。结论:黄芩苷对TLR2/4、NOD2受体及下游炎性因子TNFα存在着显著的调控作用,这种调控作用及对炎性反应的影响可能是其对肺、脑病变作用的共同基础。

甘遂对正常小鼠肝脏相关炎性因子表达的影响

目的:观察甘遂醇提取物对正常小鼠肝脏功能及其相关炎性因子表达的影响,以探讨其对肝脏的安全性。方法:分别给小鼠灌胃给药(1.2、0.6、0.3 g.kg-1)2 h、4 h和7 d,取血清测ALT,取肝脏做组织学观察,并提取RNA,Real time PCR测IL-β、TNFα和Caspase3表达的变化。结果:甘遂醇提取物给药不同时间对正常小鼠肝脏组织形态影响不明显,给药2 h大剂量对ALT明显升高,对炎性因子IL-1β的mRNA表达明显上调,对凋亡相关因子Caspase3的mRNA表达影响不明显。结论:甘遂对正常小鼠肝脏具有确实的毒性。其作用特点主要与炎性损伤有关,与凋亡关系不明显。

新药用资源菠萝叶小鼠一般生殖毒性的研究

目的:对菠萝叶小鼠的一般生殖毒性进行研究,有助于更好的评价该植物的药用价值。方法:分别灌胃给予成年雄性和雌性小鼠菠萝叶,然后合笼进行交配。对于交配成功的雌鼠继续饲养。分别对孕鼠的妊娠、胎鼠的发育及生产的子代小鼠的情况进行实验观察。结果:菠萝叶除了大剂量(4 g·kg-1)对亲本雄性鼠体重有一定降低外,对其它各项指标均无明显影响。对孕鼠及其子代小鼠均未见有明显影响。结论:提示菠萝叶对小鼠一般生殖功能无明显毒性。

菠萝叶酚对小鼠急性糖脂负荷吸收及其小肠脂肪酶活性的影响

目的:研究表明从菠萝叶中制备的总酚类成分具有抗氧化和调血脂作用。由于其灌胃后吸收较快,血中5 min即达峰值,因此本文通过急性糖脂负荷实验观察菠萝叶酚对糖脂吸收的影响。方法:利用小鼠单次灌胃建立糖脂负荷模型,观察给药后不同时间对餐后血糖、血脂和小肠脂肪酶的变化。结果:菠萝叶酚在一定程度上能够抑制甘油三酯和葡萄糖的吸收。在给药30 min后未见到明显的作用,但此时正常小鼠小肠脂肪酶活性受到明显抑制,并且对高脂所致小肠脂肪酶活性下降有一定的解抑制作用。结论:提示菠萝叶酚的抑制脂类吸收可能与脂肪酶活性有关;其对于餐后高糖高脂吸收的有一定调控作用。

HepG2^(IgG)转基因细胞应用于中药致敏物质预测研究

本文对HepG2IgG细胞对于Ⅱ型致敏性预测进行了较为深入系统的研究,其中包括转染宿主细胞的筛选、转染最佳条件、最适检测仪器以及转染持续时间等。并对己知致敏原及其市售的几种中药注射剂进行了致敏性筛选。结果表明,该细胞系具有检出灵敏性高,细胞转染成功率高,致敏因子表达稳定等特点。为早期预测II型致敏反应的中药提供了一个有价值的工具。

黄芩苷对模式识别受体TLR2/4-NOD2的作用及其成药性意义

激活模式识别受体可以引起下游信号通路启动,炎性因子表达,最终引起免疫炎性反应。无论是外源性病原微生物,还是内源性组织成分均可以配体方式不同程度上激活这种模式识别受体,引起机体免疫炎性反应。因此,抑制相关受体进而在一定程度上抑制这种免疫炎性反应,对于避免疾病过程中组织损伤具有重要的意义。黄芩苷能够特异性的抑制疾病过程中TLR2/4-NOD2的表达,抑制下游炎性因子IL-1β,IL-6和TNF-α的表达,可以减轻疾病过程中组织细胞的损伤。并且这种作用具有组织的非特异性。在成药性方面具有重要的理论和实际意义。此外,本文还从药物代谢和毒性等方面进一步探讨了其成药性。

甘遂致小鼠稀便与炎性分泌相关(英文)

目的:甘遂在我国有着几千年的应用历史,主要用于促进肠运动。通过实验观察甘遂通便促进肠推进同时是否伴有病理变化。方法:应用30%甘遂提取物给小鼠灌胃后排便及其大小肠的影响,进行组织学检查。同时观察大小肠IL-1β,TNFα和Caspase3的mRNA和蛋白表达的变化。结果:甘遂能够明显促进小鼠排稀便,抑制肠平滑肌收缩,肠粘膜出现明显炎性损伤,并伴有IL-1β和TNFα表达的上调。结论:甘遂促进排便与刺激肠粘膜分泌和炎性反应有关。

小檗碱作用靶点及其吸收特点——老药如何新用

随着研究的不断深入,小檗碱的多种药理作用不断被发现。随之而来的是如何针对小檗碱的这些新的药理作用来合理用药。由于小檗碱具有一定的心肌毒性、且其口服吸收较差,因此导致了在如何提高生物利用度与控制其可能产生的毒性之间的矛盾。同时一些新的用途如调血脂、降血糖以及防治神经退行性病变等都需要长期给药,从而形成了长期口服与对肠道菌群失调及其对机体其他生理功能影响可能产生潜在的风险之间的矛盾。该文在阐明小檗碱作用靶点及其相关药学特性的基础上,就这方面议题进行了综合讨论分析。最后提出建议:长期口服给药对机体尤其是肠道菌群的影响尚需进一步考察;通过改变制剂提高口服药物的吸收率时应考虑由此带来的风险;对于药物浓度需求较高的治疗用药(如肿瘤),靶向给药值得考虑。

巴西苏木红素对小鼠脑缺血中能量代谢的影响

目的:研究巴西苏木红素对小鼠脑缺血损伤中能量代谢的影响作用。方法:将40只小鼠随机分为假手术组、脑缺血组、苏木红素5,10 mg.kg-1组,每组10只,构建脑缺血模型。脑缺血手术前3 d开始静脉注射苏木红素,给药剂量依据预试验确定,随后处死小鼠,制备大脑匀浆液。利用HPLC对脑内三磷酸腺苷、二磷酸腺苷、腺苷一磷酸和乳酸含量进行测定,RT-PCR检测脑内单羧酸转运体(MCT1,MCT2)基因水平的表达。结果:小鼠脑缺血20 min后,脑内乳酸含量迅速升高,再灌注1 h内逐渐减低,再灌注24 h后逐渐降低至正常水平。缺血再灌的最初,能荷值迅速显著减低,再灌1 h过程中能荷恢复较快,但再灌24 h后能荷仍未恢复至正常水平。脑缺血过程中,随着脑内乳酸的升高,MCT1和MCT2的表达也随之上调,预先静脉注射苏木红素5 mg.kg-1能上调MCT2 mRNA的表达,与模型组相比差异显著(P<0.05),苏木红素10 mg.kg-1组能上调MCT1和MCT2 mRNA的表达,与模型组相比差异显著(P<0.01)。结论:苏木红素所具有的神经保护作用可能是通过改善能荷水平而实现的。

通过促进poly A和PABP蛋白结合抑制mRNA降解:小檗碱作用的新机制（英文）

小檗碱(BBR)是一种天然小分子药物,具有多种药理活性,作用于多个靶点。我们在之前的研究中发现,小檗碱具有稳定mR NA、避免其降解的活性,并初步证实这与它和mR NA 3′端polyA尾部的结合有关,然而其具体机制尚不清楚。本文首次报道了相关的机制研究。研究结果表明,小檗碱结合于poly A、避免mR NA降解的这一过程需要PABP(poly A结合蛋白)参与。利用RNA-EMSA(RNA凝胶电泳迁移)、RIP(RNA免疫共沉淀)和荧光光谱等多项技术证明了小檗碱能够促进PABP与poly A的结合,从而增强mR NA的稳定性。此外利用二维核磁共振技术揭示BBR与AMP结合的特异性。本文结论是小檗碱促进蛋白表达的机制与其作用于poly A、稳定m RNA,从而促进蛋白翻译、上调蛋白表达相关。

巴西苏木红素与血清白蛋白及血浆成分结合率研究

目的建立测定巴西苏木红素与血浆结合率的平衡透析方法,并测定其体外与血浆总物质及牛血清白蛋白结合率。方法采用平衡透析法测定巴西苏木红素与血浆总物质及牛血清白蛋白结合率,采用HPLC测定各成分的血药浓度及游离药物浓度,生物样品用乙酸乙酯液萃取的方法。结果在低、中、高3种浓度下,巴西苏木红素与牛血清白蛋白的结合率为38.5%～50.8%,与大鼠血浆总物质的结合率为86.2%～97.3%。结论巴西苏木红素与大鼠血浆有较高的结合率,血浆中的磷脂部分可能为参与两者之间结合的主要物质。

人参皂苷Rg_1通过作用于炎性因子和糖皮质激素受体减少金葡菌对肺上皮细胞的损伤(英文)

本文旨在探讨人参皂苷Rg_1体外对金葡菌感染肺上皮细胞所致病变的作用及其可能的机制。实验采用体外大鼠原代肺上皮细胞感染模型。RT-PCR和Western blot方法观察肺细胞中integrinβ1,NF-κB和糖皮质激素受体(GR)等相关因子的表达。结果表明人参皂苷Rg_1可以明显抑制金葡菌感染后肺上皮细胞整合素integrinβ1的表达,下调炎性因子NF-κB,ICAM-1,TNF-α,IL-2和IL-6,上调GR的表达。人参皂苷Rg_1可以明显抑制金葡菌感染肺上皮细胞后的炎性因子,从而对肺脏起到一定的保护作用。

选择性5-羟色氨受体抑制剂——巴西苏木红素(英文)

目的:子宫平滑肌内存在多种5-HT受体,5-HT通过作用于5-HT受体实现其对子宫收缩活性的影响。本研究探讨巴西苏木红素对5-HT受体的作用及其特点。方法:小鼠分离子宫平滑肌条,采用受体拮抗实验和real time PCR方法,对巴西苏木红素的5-HT受体的抑制作用进行研究。结果:巴西苏木红素虽然对正常子宫平滑肌的收缩幅度和频率无影响,但能明显抑制5-HT2受体激动剂马来酸麦角新碱的收缩活性,其pA2为5.71±0.21。而5-HT亚型的选择性激动剂舒马普坦(5-HT1D)、AL34662(5-HT2A)、MCPP(5-HT2C)的收缩子宫活性同样能够被巴西苏木红素抑制,pA2分别为4.58±0.06;4.91±0.15;5.38±0.15。巴西苏木红素明显抑制了5-HT受体1D和2C亚型mRNA的表达。结论:巴西苏木红素能够阻滞小鼠子宫5-HT受体,并通过可能影响5-HT受体所介导的子宫功能。

吴茱萸收缩血管作用的体内体外研究(英文)

目的:对吴茱萸的收缩血管作用及其机制进行了研究。方法:吴茱萸提取物经透析袋(100D)处理后,对吴茱萸透析液(ED,>100D)进行了体内和体外实验研究。结果:ED能够明显增加小鼠脑血流,并能够诱导大鼠胸主动脉环的收缩,且均具有一定的剂量效应。在苯肾上腺素收缩血管的基础上ED能够引起进一步的收缩反应。250mg·L-1 ED的血管收缩活性,其诱导血管收缩的程度是50mmol·L-1 KCl最大收缩的113%,是10μmol·L-1苯肾上腺素的78%,为20mmol·L-1咖啡因的183%。细胞表面α受体的拮抗剂酚妥拉明,能够明显抑制吴茱萸收缩血管活性,而β,M和血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂普萘洛尔、阿托品和氯沙坦均未对ED的收缩血管活性带来影响。去除细胞外的钙离子或者使用L-型钙离子通道拮抗剂尼卡地平可以显著地抑制ED的缩血管作用,而钙离子通道开放剂BAY-K8644和钾离子通道开放剂吡那地尔对ED收缩血管作用也有一定影响。利用选择性受体抑制剂对ED可能的信号通路研究显示,使用肌球蛋白激酶(MLCK)抑制剂、RhoA抑制剂和三磷酸肌醇(IP3)受体抑制剂均可以抑制ED的活性,而蛋白激酶C(PKC)抑制剂和胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂对吴茱萸的活性则无影响。结论:ED能够引发钙依赖性和非钙依赖性血管收缩,其中机制包括细胞外钙内流,α受体、ROK和IP3受体信号通路以及MLCK的激活等。吴茱萸的收缩血管作用不仅包括细胞膜钙通道的调节机制也包括对细胞内钙的调节。

吴茱萸次碱对血管收缩及RhoA/MLCP-MLC信号通路的影响(英文)

本文对吴茱萸次碱的收缩血管效应及其机制进行了研究。结果表明,吴茱萸次碱体外可明显的引起大鼠胸主动脉血管平滑肌收缩。与血管平滑肌收缩相关的信号蛋白Rho激酶(RhoA)和IP3受体(IP3R)的抑制剂可以抑制吴茱萸次碱的缩血管效应。血管平滑肌细胞A7r5的实验发现,吴茱萸次碱(300μg/L)可以明显升高胞内Ca2+浓度,促进IP3R的mRNA表达,而后者与胞内Ca2+浓度升高有关。预先使用RhoA抑制剂H-1152,吴茱萸次碱仍能使RhoA mRNA表达升高。此外,吴茱萸次碱能够促进肌球蛋白轻链磷酸酶(MLCP)以及肌球蛋白轻链(MLC)的磷酸化。提示吴茱萸次碱的缩血管效应与RhoA/MLCP-MLC信号转导通路有关。本工作对于深入认识吴茱萸次碱的药理活性具有重要的意义。