碱性磷酸酶和骨钙素在成骨过程中表达的定量研究

目的定量分析碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OC)在成骨过程中不同时期的表达,从而了解骨形成的进程,为正畸治疗提供一些理论依据。方法用雄性C57BL/6J小鼠建立骨折模型,并从新生的C57BL/6J小鼠头盖骨提取初级成骨细胞,采用苏木精-伊红染色法,Northern blot法及Real Time PCR(定量PCR)法对骨形成过程进行体内体外形态学及ALP、OC表达的分析。结果骨折后ALP和OC的表达逐渐增加,第10天达高峰,其后开始下降;体外初级成骨细胞培养发现ALP和OC的表达于第14天达高峰,随后开始下降,但至21 d时,两者仍维持在相当高的水平。结论ALP和OC在新骨形成过程中并不是无止境的增加,其表达随成骨细胞的不断分化而逐渐增加并随成熟骨细胞的增多而下降。

破骨细胞相关因子在骨再建过程中表达的定量分析

目的研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核因子-κB受体激动剂(RANKL)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)在骨再建过程中的表达。方法用8周龄雄性C57BL／6J小鼠建立骨折模型,用RT-PCR法对骨形成过程中TNF-α、 RANKL和TRAP的表达进行时程分析。结果骨折后TNF-α、RANKL、TRAP的表达均上调,但峰值在不同的时间点出现。TNF-α在骨折后2 d达峰值,BANKL的峰值出现在骨折5 d后,而TRAP的表达在骨折后10 d达到峰值。结论骨的再建也有破骨细胞相关因子的参与,它有赖于成骨和破骨的精确平衡。