构建中医学基础实验教学模式的研究

在论述构建中医学基础实验教学模式必要性的基础上，从几个方面探讨构建中医学基础实验教学模式的思路。

磁场对浅表性胃炎 返流性胃炎EGG影响的观察

磁场对人体的作用体现在对人体生物电的改变上.这种改变,即可影响到人体的某些生理功能,甚或对人体某些部位的病理变化能够产生积极的影响,最终达到治疗目的.有人动物实验证明,足三里穴上施加一定强度的磁场,对家兔病理状态下的胃电图具有'双向调节'作用,在人体的足三里施以一定强度的磁场,作用又如何,是否具有临床意义,笔者临床观察磁场对正常人浅表性胃炎及胆汁返流性胃炎病人空腹状态下胃电图的影响,观察结果表明,在人体足三里穴施加磁场对浅表性胃炎及胆汁返流性胃炎的病人胃电图均具有明显的作用.

线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型的方法研究

目的:建立一种比较系统,操作简单,成功率高的大鼠大脑中动脉缺血(MACO)再灌注动物模型,达到只要读者根据本文所述的方法操作就能制作出MACO再灌注模型的目的。方法:成年健康雄性SD大鼠40只,参照Longa法并适当改进建立MACO模型20只,假手术组20只。将详细叙述手术过程以及再灌注时间点的合理选择。最后利用行为学测试、四氮唑(TTC)染色对模型成功与否进行判定。结论:线栓法是一种操作简单的制备MACO再灌注动物模型的方法,并且此方法的再灌注效果较为明显。

痛泻要方对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠组织血管活性肠肽及受体1表达影响

目的:探讨痛泻要方治疗腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠的作用机制。方法:采用应激与束缚相结合的方法复制D-IBS模型后,应用免疫组化、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测结肠组织血管活性肠肽(VIP)与其受体1(VPAC1)蛋白和mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组结肠组织VIP与VPAC1蛋白、mRNA表达均上调(P<0.01);与模型组比较,痛泻要方组结肠组织VIP与VPAC1蛋白、mRNA的表达则下调(P<0.01)。结论:痛泻要方治疗D-IBS的作用机制与结肠组织VIP与VPAC1表达下调有关。

脾气虚大鼠海马神经元线粒体呼吸链功能及Lon蛋白酶表达变化及意义

目的观察脾气虚大鼠海马神经元线粒体呼吸链功能及Lon蛋白酶表达的变化,探讨线粒体蛋白质控在脾气虚发生中的作用。方法将16只雄性SD大鼠随机分为正常组和模型组各8只,模型组通过饮食失节和劳倦刺激制作脾气虚证模型,对照组正常饲养。15 d后麻醉大鼠,开颅取海马组织。采用透射电镜观察海马神经元线粒体内蛋白积聚情况;比色法检测海马神经元线粒体呼吸链复合物(C)Ⅰ~CⅣ活性和ATP水平;ELISA法检测反应性氧簇(ROS)含量;Western blotting法检测海马线粒体呼吸链CⅤ和Lon蛋白酶表达。结果与正常组比较,模型组线粒体内蛋白积聚较多;CⅣ活性、CⅤ表达、ATP水平和Lon蛋白酶表达均下降(P<0.05或<0.01)。两组CⅠ、CⅡ、CⅢ、ROS水平差异无统计学意义(P均>0.05)。结论脾气虚大鼠海马神经元线粒体呼吸链功能和Lon蛋白酶下降,线粒体蛋白质控水平下降与脾气虚的发生有关。

M_2和M_3型胆碱能受体在脾气虚大鼠小肠运动中的作用

目的:研究M2、M3型胆碱能受体表达与脾气虚小肠运动的关系。方法:20只SD大鼠按随机数字表法分为对照组和脾气虚模型组(模型组)各10只,模型组大鼠复制饮食不节加劳疲型脾气虚模型;小肠运动采用小肠推进率评价;ELISA法检测小肠组织Ach和c AMP含量,免疫组化法观察M2、M3型受体表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠的小肠推进率显著下降,Ach含量无变化,M2受体表达明显上升,M3受体表达和c AMP水平显著下降。结论:脾气虚小肠运动减弱与M2、M3型受体表达异常有关。

匹维溴胺对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠组织AQP3表达影响

目的观察匹维溴胺对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠血清以及结肠组织血管活性肠肽(vasoactiveintestinal peptide,VIP)含量、结肠组织水通道蛋白3(aquaporin 3,AQP3)表达的影响,探讨其治疗D-IBS的作用机制。方法采用慢性应激与束缚相结合方法建立D-IBS大鼠模型。采用ELISA法检测VIP含量;采用Real time-PCR法和SABC免疫组化法检测AQP3的表达。结果在血清和结肠组织中VIP的含量,与对照组[(3.092±0.613)ng/ml,(3.811±0.275)ng/ml]比较,模型组[(10.460±1.666)ng/ml,(4.495±0.341)ng/ml]与匹维溴胺组[(5.639±1.163)ng/ml,(4.063±0.534)ng/ml]均升高(P<0.05),尤以模型组升高的更为明显(P<0.01);两组AQP3的表达均下调(P<0.01),尤以模型组AQP3蛋白表达下调显著。结论匹维溴胺治疗D-IBS的作用机制之一,可能与抑制结肠组织中VIP分泌和上调AQP3表达有关。

旋复代赭汤防治化疗诱发呕吐反应的研究

观察旋复代赭汤加味防治肿瘤化疗所致恶心呕吐反应的效果。应用旋复代赭汤加味对 5 8例患者进行治疗 ,同时设西药枢复宁为对照 ,对化疗药所致恶心呕吐反应的防治效果以及副作用进行临床研究。结果 ,治疗组对化疗所致呕吐显效率 86 .2 % ,高于对照组 6 4.8% (P<0 .0 5 ) ;治疗组总有效率为 93.1% ,与对照组 83.3%比较无显著性差异。治疗组副作用为 15 .5 % ,与对照组 6 8.5 %比较差异显著 (P<0 .0 1)。该方具有防治肿瘤患者化疗所致呕吐反应的作用 ,且毒副作用较枢复宁低。

眼针对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠水通道蛋白3表达的影响

目的:研究眼针对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠结肠血管活性肠肽(VIP)和水通道蛋白3(AQP3)表达的影响,探讨眼针对D-IBS模型大鼠结肠水液代谢的调控作用和机制.方法:SPF级Wistar大鼠30只,随机分为对照组、D-IBS模型组和眼针组,每组10只.采用慢性应激结合束缚方法建立D-IBS大鼠模型.采用RT-PCR检测结肠VIP的mRNA表达水平变化;采用Realtime-PCR法检测AQP3的mRNA表达水平变化,采用SABC免疫组织化学法检测结肠AQP3的蛋白表达水平变化.结果:与对照组比较,D-IBS模型组结肠VIP的mRNA表达水平显著升高(0.94±0.07vs0.64±0.15,P<0.01),而结肠AQP3的mRNA和蛋白表达水平显著降低(1.09±0.09vs7.02±1.25;0.284±0.020vs0.601±0.027,均P<0.01).与D-IBS模型组比较,眼针组结肠VIP的mRNA表达水平显著降低(0.78±0.15vs0.94±0.07,P<0.01),而结肠AQP3的mRNA和蛋白表达水平显著升高(2.33±0.66vs1.09±0.09;0.374±0.03vs10.284±0.020,均P<0.01).结论:通过抑制结肠中VIP的表达和分泌及升高AQP3的表达,调控结肠水液代谢可能是眼针治疗D-IBS的作用机制之一.

β-内啡肽过度释放参与脾气虚纳少和腹胀的形成

目的:研究β-内啡肽(β-endorphin,β-EP)与脾气虚纳少和腹胀的关系。方法:20只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组和脾气虚模型组(模型组),每组10只;代谢笼检测大鼠24 h进食/水量,炭末法评估胃残留率和小肠推进率,ELISA法检测下丘脑、胃和小肠组织β-EP含量,免疫组化法检测下丘脑、胃和小肠组织中μ受体表达。结果:模型组大鼠的进食/水量显著下降,小肠推进率明显下降,下丘脑、胃和小肠组织中β-EP水平和μ受体表达显著增加。结论:β-EP过度释放参与了脾气虚纳少和腹胀的形成。

眼针对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠组织5-HT表达的影响

目的:观察眼针对D-IBS模型大鼠结肠5-HT表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠分为正常组、D-IBS模型组和眼针组3组。采用慢性应激结合束缚方法建立D-IBS模型并进行眼针治疗。采用ELISA测定血清和结肠5-HT含量;采用免疫组化法测定结肠5-HT表达。结果:与正常组比较,模型组血清和结肠组织中5-HT含量显著升高(P<0.01),结肠组织中5-HT的表达水平显著升高(P<0.01);与D-IBS模型组比较,眼针组血清和结肠5-HT含量显著降低(P<0.01),结肠5-HT表达显著降低(P<0.01)。结论:眼针能够调控D-IBS模型大鼠结肠5-HT的表达。

医学机能仿真实验室的建立与实施

我校的医学机能仿真实验室是以VBL-100虚拟实验室系统为基础建立起来的。目前该仿真实验室已经能够模拟大部分生理学实验项目,每个实验均由仪器介绍、实验原理、手术操作、模拟仿真和实验测试等部分组成。该仿真实验室的建立极大地降低实验成本,对真实实验具有补充价值,能够辅助理论教学,提高实验室开放率,丰富网络教学,并成为展示我校实验教学成果的重要平台。但该仿真实验室还存在一定问题,如实验项目还未实现全覆盖、人机对话不足、实验效果评价不够客观深入等,这将在以后工作中逐步完善。

眼针与体针对腹泻型肠易激综合征大鼠下丘脑及结肠组织P物质及神经激肽Ⅰ型受体表达的影响

目的观察比较眼针及体针对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)大鼠下丘脑及结肠组织P物质(SP)及神经激肽Ⅰ型受体(NK-1)表达的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、眼针组、体针组4组,每组10只。采用慢性应激结合束缚方法建立IBS大鼠模型。眼针组取下焦区、大肠区、肝区、脾区进行针刺,治疗7 d。用免疫组化方法检测大鼠下丘脑及结肠组织中SP和NK-1蛋白的表达;用RT-PCR方法检测大鼠下丘脑及结肠组织中SP m RNA的表达。结果与模型组比较,眼针组大鼠下丘脑和结肠组织SP和NK-1蛋白的表达以及SP m RNA的表达均明显减少(P<0.01)。结论眼针疗法优于体针,对D-IBS有治疗作用。

四神丸对小鼠结肠炎性病变后诱发结肠癌化学预防作用研究

目的:观察四神丸对小鼠结肠炎性病变后诱发结肠癌化学预防作用。方法:40只ICR小鼠,随机分为正常对照组、模型组、四神丸口服给药组和四神丸灌肠给药组4组。以40mg/g 1,2-二甲肼(DMH)腹腔注射、20g/L右旋葡聚糖苷钠(DSS)饮用水诱导小鼠结肠炎性病变后诱发结肠癌模型。口服和灌肠四神丸组分别给予0.2mL四神丸浸膏剂(生药浓度2g/mL),共21周后,观察小鼠脾脏、胸腺、结肠质量,结肠组织病理变化和四神丸对小鼠结肠炎性病变后诱发结肠癌发生率的影响。结果 :与模型组相比,四神丸可以明显改善小鼠DMH+DSS诱癌过程中胸腺等组织的改变和恶病质状态,同时四神丸明显抑制小鼠结肠炎性病变后诱发结肠癌,并降低成癌率。但口服和灌肠两种给药方式对结果没有影响。结论:四神丸能抑制小鼠结肠炎性病变后诱发结肠癌。

牡荆素葡萄糖苷在小鼠体内的药代动力学研究

目的:通过对牡荆素葡萄糖苷单体在小鼠体内的吸收、分布、排泄的研究,为其在动物体内全面的药代动力学的探索增加科学依据。方法:采用3p97药代动力学软件处理由液相色谱得到的数据。结果:小鼠口服牡荆素葡萄糖苷后的吸收过程是迅速的,在胃肠道的环境下处于一个弱吸收,在小鼠体内存在肝肠循环,还经历了较大程度的首过效应,被代谢成其它化合物。结论:建立了两种测定小鼠生物样品中牡荆素葡萄糖苷的高效液相色谱方法,一种用于血浆和组织样品,另一种用于排泄物尿液和粪便。两种方法都具有高度的专属性和可重复性。得到的实验数据真实可靠,填补了山楂叶中牡荆素葡萄糖苷的临床前药代动力学研究的空缺。

止呕合剂防治化疗诱发恶心呕吐反应的临床观察

目的：观察中药止呕合剂防治肿瘤化疗所致恶心呕吐反应的效果。方法：应用止呕合剂对８８例患者进行治疗，同时设西药枢复宁为对照，对化疗药所致恶心呕吐反应的防治效果以及副作用进行临床研究。结果：中药组防治化疗所致呕吐显效率为８４．７％，枢复宁组为６６．６％（Ｐ＜０．０５）；中药组总有效率为９３．３％，枢复宁组为８５．７％，两组比较无显著性差异。中药组副作用为６．５％．枢复宁组为５４．７％，两组比较差异有非常显著性意义（Ｐ＜０．０１）。结论：该方具有防治肿瘤患者化疗所致呕吐反应的作用。

香砂六君丸对肥胖大鼠胃黏膜JAK2/STAT3通路的影响

目的:研究香砂六君丸对肥胖大鼠胃黏膜JAK2和STAT3表达的影响,探讨该方控制肥胖人群罹患胃癌风险的可能性。方法:40只雄性SD大鼠,随机分为对照组、肥胖组(模型组)、香砂六君丸低剂量治疗组(香低组)、香砂六君丸中剂量治疗组(香中组)和香砂六君丸高剂量组治疗组(香高组),每组8只;全自动生化分析仪检测血脂;ELISA法检测血清超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;免疫组化法检测胃黏膜磷酸化(p)-JAK2/STAT3表达。结果:与对照组比较,模型组的总甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)和MDA水平以及p-JAK2、p-STAT3表达均显著增加,但SOD和高密度脂蛋白(HDL)水平以及GSH-px活性均明显下降。与模型组相比,香低、中和高组的TG和LDL水平显著下降,而SOD水平和GSH-px活性明显上升;香中组和香高组MDA水平和p-JAK2、p-STAT3表达均显著下降;香高组HDL水平明显上升。结论:香砂六君丸能够调控血脂,对抗氧化应激,抑制胃黏膜JAK2/STAT3通路,可能具有降低肥胖人群罹患胃癌的作用。

止呕合剂对猫化疗后体内5-HT和NO含量的影响

目的 :研究DDP诱发呕吐的胃肠道机制和止呕合剂对其的作用。方法 :记录 30只猫的呕吐发生率 ,并用生物化学分析法测定 5 -HT和NO含量。结果 :DDP增加了呕吐发生率 ,提高体内 5 -HT的含量 ,减少NO的含量 ;止呕合剂降低了呕吐发生率 ,减少 5 -HT的含量 ,提高NO的水平。中药组血、胃肠组织中 5 -HT、5 -HIAA浓度都较NS组明显下降而NO水平却明显高于NS组。认为 ,DDP致呕与胃肠组分泌 5H增多、NO减少有关。结论 :DDP诱发呕吐的机制与其提高5 -HT水平 ,降低NO水平有关 ,止呕合剂的胃肠道机制与其降低 5 -HT水平 ,提高NO水平有关。

脾气虚大鼠焦虑样行为及其初步机制研究

目的研究脾气虚大鼠焦虑程度的变化并探讨其可能机制。方法选取雄性SD大鼠16只,体质量(200±10)g,将其随机分为对照组和脾气虚组(模型组),每组8只。旷场实验评价大鼠焦虑程度;ELISA法测定海马组织ATP和缩胆囊素-8(CCK-8)含量;免疫组化法检测海马CCKB型受体(CCKBR)表达。结果与对照组比较,模型组的焦虑程度显著降低(P<0.01),海马组织的ATP含量降低(P<0.05),海马CCK-8水平变化不明显(P>0.05),但其受体表达下降(P<0.05)。结论脾气虚时焦虑程度下降,其初步机制与海马能量不足和CCKBR表达减少有关。

牡荆素-4″-O-葡萄糖苷大鼠体内药动学研究

目的:阐明山楂叶活性成分牡荆素-4″-O-葡萄糖苷在大鼠体内药物特征。方法:采用反相高效液相色谱法进行测定,牡荆素-4″-O-葡萄糖苷多剂量及多途径给药后大鼠血浆中含量。结果:静脉给药牡荆素-4″-O-葡萄糖苷与口服相比,静脉给药牡荆素-4″-O-葡萄糖苷在大鼠血浆中药-时曲线的符合三室模型,口服给药牡荆素-4″-O-葡萄糖苷在大鼠血浆中药-时曲线的符合二室模型。在大鼠体内360 min内基本消除,符合非线性动力学过程行为。结论:实验首次建立了HPLC法研究山楂叶单体成分牡荆素-4″-O-葡萄糖苷在大鼠体内药代动力学。