香薷的致突变性研究

本文采用Ａｍｅｓ试验，小鼠微核试验及小鼠睾丸染色体畸变试验，对香薷进行了致突变性研究。结果均呈阴性。

二硫化碳吸入染毒对雄性大鼠生殖功能及子代影响的研究

目的探讨二硫化碳对雄性大鼠生殖功能及子代的影响。方法选用健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为4组,以不同浓度二硫化碳(0、50、250、1250mgm3)静式吸入染毒,共10周。染毒结束前1周随机选对照、低、高浓度组各5只按经典致畸试验与健康雌鼠1∶2合笼交配,观察雌鼠受孕率、计流产数、吸收胎、活胎总数、每窝平均活胎数及称胎鼠体重,检查胎鼠外观及内脏、骨骼畸形,测量身长、尾长、腹围、肛殖距等;染毒结束后,称染毒大鼠体重及各脏器重、计算系数,测量睾丸横径,计附睾尾精子总数、精子活动率及分级、精子畸形率等。结果实验组雌鼠受孕率均低于对照组,但差异无显著性(P>0.05);高浓度组胎鼠各生长发育指标明显低于对照组(P<0.05或P<0.01);染毒大鼠体重、各脏器系数均低于对照组,但只有高浓度组大脑脏器系数与对照组比较差异有显著性(P<0.05);实验组睾丸脏器系数有随染毒剂量增加而降低的趋势,但只有高浓度组与对照组比较有差异(P<0.05);附睾重随染毒剂量增加而减轻,中、高浓度组与对照组比较差异分别有显著性(P<0.05)和极显著性(P<0.01),附睾尾精子总数及精子活动率染毒组均低于对照组,中、高浓度组与对照组比较差异分别有显著性(P<0.05)和极显著性(P<0.01),活动精子分级以原地运动为主。结论二硫化碳染毒对雄性大鼠生殖功能及子代有一定影响,可导致雌鼠受孕率降低、流产率升高,高浓度组胎鼠生长发育迟缓和畸形率增高,可能与雄性大鼠精子质、量下降有关。

二硫化碳对大鼠睾丸组织氧自由基及抗氧化水平的影响

目的探讨二硫化碳(CS2)对雄性大鼠睾丸组织氧自由基及抗氧化水平的影响。方法取健康Wistar雄性大鼠24只,随机将其分为4组,以不同浓度CS2(0、50、2501、250 mg/m3)静式吸入染毒,共持续10周。染毒结束后,处死动物取睾丸制备组织匀浆,分别测定组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量。结果与对照组比较,各染毒组睾丸组织中SOD活力下降,MDA含量上升,GSH含量及GST、GSH-px活力下降,NO含量及NOSi、NOS活力均下降。结论CS2染毒雄性大鼠睾丸组织的氧自由基增加,抗氧化能力减弱以及NO合成受抑制,与CS2所致雄性生殖功能障碍有关。

二硫化碳吸入染毒对大鼠睾丸组织病理改变及细胞凋亡的影响

[目的]观察二硫化碳(CS_2)对雄性大鼠睾丸组织病理改变及细胞凋亡的影响。[方法]24只健康雄性Wistar大鼠随机分为4组,以不同浓度CS_2(0、50、250、1250mg/m^3)吸入染毒,每天2 h,每周5 d,共10周。染毒结束后,取大鼠睾丸以HE染色,采用普通光镜、电镜及末端转移酶标记技术(TUNEL法)观察在CS_2作用下,睾丸组织的病理变化及细胞凋亡的情况。[结果]随CS_2染毒浓度的增加,大鼠睾丸间质水肿加重;高浓度组曲细精管生精细胞数目及层次明显减少。在低、中浓度组可见间质细胞内质网扩张,精原细胞、初级精母细胞的线粒体发生肿胀;高浓度组支持细胞、间质细胞、精原细胞、初级精母细胞及精子细胞均出现胞质空洞,精原细胞、初级精母细胞线粒体肿胀加重,精子细胞线粒体也出现肿胀,精子纵切面"9*2+2"轴丝结构紊乱,微管溶解缺失。随CS_2染毒浓度的增加,睾丸组织中细胞凋亡指数增高,中、高浓度组细胞凋亡指数与对照组比较有统计学意义(P<0.05),异常增多的凋亡细胞以精母细胞为主。[结论]CS_2可导致大鼠睾丸组织发生病理变化,生精细胞异常凋亡。

二硫化碳对大鼠睾丸组织的影响及维生素E的干预作用

目的探讨二硫化碳(CS2)对雄性大鼠生殖功能及睾丸组织中铜、锌、钙、镁水平的影响,同时观察维生素E对其的干预作用。方法36只雄性Wistar大鼠随机分为6组,以不同浓度CS2(0、50、250、1250 mg/m3)静式吸入染毒,共10周,另设CS2(1250 mg/m3)+维生素E(250 mg/kg)组和维生素E组(250 mg/kg)。染毒结束后,检测大鼠生殖毒性指标,测定睾丸铜、锌、钙和镁水平。结果各染毒组睾丸脏器系数、附睾重、睾丸横径、附睾尾精子总数及精子活动率均低于对照组,畸形精子率则高于对照组;睾丸组织铜、锌和镁含量而随染毒浓度增加而降低的趋势。维生素E干预后,精子畸形率降低,睾丸横径、精子总数、精子活动率及睾丸铜、锌和镁均有增加,与高浓度组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论维生素E可干预CS2的睾丸生殖毒性。

预防医学实验教学示范中心的建设与探索

根据预防医学教学体系和构筑＂宽口径实验教学平台＂构思的总体要求,在全国率先组建涵盖多学科的预防医学实验教学中心,现已批准为国家级预防医学实验教学示范中心。该中心对预防医学各学科开设的实验教学内容打破学科界限,统筹安排,有机整合,优势互补,取得了显著成效。创建的实验教学新体系得到了国内外40多所高校的专家认可,以学生为本的实验教学方法使学生的综合素质明显提高。

维生素E对二硫化碳致雄性大鼠睾丸组织脂质过氧化的拮抗作用

目的探讨二硫化碳(CS2)对雄性大鼠睾丸组织氧自由基及抗氧化水平的影响,同时观察维生素E(VE)对其的拮抗作用。方法取健康Wistar雄性大鼠36只随机分为6组,以不同浓度CS2(0、50、250、1250mgm3)静式吸入染毒,共10周,另设1250mgm3(CS2)加VE(250mgkg)组和单纯VE(250mgkg)组,VE拌入饲料中,染毒结束后,处死动物取出睾丸制备组织匀浆,分别测定各组SOD、MDA、GST、GSH、GSHpx、NO、总NOS和iNOS水平,同时检测VE对其的拮抗水平。结果睾丸组织中SOD活力下降,MDA含量上升,与对照组比较有显著差异(P<0.05);GSH含量、GST、GSHpx活力总体趋势下降,与对照组比较有显著差异(P<0.05或P<0.01);NO含量及总NOS、iNOS活力均下降,有随染毒浓度增加而降低的趋势,与对照组比较有显著差异(P<0.05或P<0.01)。但用VE干预后,SOD、GST、GSHpx、总NOS、iNOS活力均有不同程度上升,GSH、NO含量亦是如此,而MDA含量则下降。结论VE对CS2致睾丸组织脂质过氧化有拮抗作用。

硒多糖、亚硒酸钠对大鼠肝线粒体酶的影响及其拮抗亚砷酸钠毒性作用的机理

采用体内、体外实验方法研究了硒化合物（硒多糖、亚硒酸钠）和亚砷酸钠对大鼠肝线粒体丙酮酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性以及对肝线粒体膜脂质过氧化、还原型谷胱甘肽含量的影响，探讨了其作用机理。结果表明：硒化合物可明显拮抗亚砷酸钠对线粒体丙酮酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶活性的抑制作用，且硒多糖的抑制作用较亚硒酸钠强。这种拮抗作用在防治砷中毒方面具有重要意义。

氟乐灵对大鼠肝、肾微粒体酶的影响

目的 研究除草剂氟乐灵对大鼠肝、肾微粒体酶的作用。方法 采用体内和体外方法 ,研究了氟乐灵对大鼠肝、肾微粒体酶影响以探讨其毒作用及可能机制。结果 ①连续灌胃 5天后氟乐灵 ( 5 0 0mg/kg)能诱导肝微粒体细胞色素P45 0和苯胺羟化酶 (AH )活性 (P <0 0 5 ) ,明显诱导细胞色素b5含量和NADPH 细胞色素C还原酶活性 (P <0 0 1) ,同时使肝重、肝微粒体蛋白含量显著增加。体外实验中 ,氟乐灵在高浓度 ( 2 5× 10 -4 mol/L)条件下可明显诱导肝细胞色素P45 0 (P <0 0 1)。对AH的酶动力学研究表明氟乐灵可增加AH的最大反应速度 (Vmax) ,对其米氏常数 (Km)无明显影响 ,可见氟乐灵对AH的诱导不是通过改变AH与底物的亲和力实现的 ,而可能与促进蛋白合成有关。②体内实验中氟乐灵可使肾微粒体NADH 细胞色素C还原酶活性显著增加 (P <0 0 5 ) ,而对肾细胞色素P45 0、b5以及NADPH 细胞色素C还原酶无明显影响。结论 氟乐灵可明显诱导大鼠肝微粒体混合功能氧化酶系。

武汉市某高校预防医学实验教学法的探索与实践

预防医学是一门实践性很强的应用学科,其专业人才培养目标必须满足社会需要,其培养模式、能力训练、综合素质培养等必须与我国的公共卫生事业发展相适应。为此,某校预防医学实验中心实验教学注重以能力(学习、实践和创新)培养为目标,在实验教学方法上进行了大胆的改革创新,多年来对五结合的实验教学法进行探索与实践,提高了学生的整体素质,收到了显著的成效。

地虫磷毒理学研究

地虫磷是一种有机磷土壤杀虫剂。本研究包括急性毒性、亚慢性毒性及致突变性等一系列毒性试验；并通过其对肝微粒体细胞色素Ｐ４５０影响的研究，从亚细胞水平上对该农药的毒作用机理进行了探讨。结果表明该农药急性毒性属高毒农药。亚慢性毒性试验结果表明其对大鼠一般健康状况及生长发育，血红蛋白含量和白细胞计数，肝、肾功能及其组织结构均无明显不良影响。根据对全血胆碱酯酶活性测定结果，其对大鼠的最大无作用剂量为０．０５毫克／公斤。其在微核试验及睾丸染色体畸变试验中均为阴性结果，在Ａｍｅｓ试验中仅在高剂量时对ＴＡ９７菌株呈阳性结果，提示该农药在高剂量情况下有致突变可能性。地虫磷对细胞色素Ｐ４５０有明显抑制作用。

亚砷酸钠对大鼠肝线粒体和微粒体酶的影响

研究了亚砷酸钠在体内、体外对大鼠肝线粒体丙酮酸脱氢酶（ＰＤＨ）、琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）和微粒体酶细胞色素Ｐ－４５０、ｂ５、ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ－细胞色素Ｃ还原酶、谷胱甘肽硫转移酶（ＧＳＴ）的影响；并通过观测亚砷酸钠与亚硒酸钠的作用及其对肝谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽含量和线粒体脂质过氧化的影响，探讨亚砷酸钠的作用机理。结果表明：连续７天腹腔注射２０ｍｇ／ｋｇ的亚砷酸钠，线粒体ＰＤＨ、ＳＤＨ被抑制，分别相当于对照组的５１％和５８％。而亚硒酸钠可有效拮抗砷对ＰＤＨ、ＳＤＨ的抑制作用。亚砷酸钠显著降低肝ＧＳＨ的含量，并增强线粒体膜脂质过氧化作用（Ｐ＜０．０５）。在体内试验中，亚砷酸钠对谷胱甘肽过氧化物酶和肝微粒体酶无明显影响。亚砷酸钠在体外实验中，浓度在１０－７～１０－３ｍｏｌ／Ｌ的范围内，抑制ＳＤＨ的活力，提高ＧＳＨ的含量，且呈剂量－效应关系。结果提示。

净地灵对大鼠肝微粒体酶及全血胆碱酯酶活性影响的研究

研究了有机磷农药净地灵对大鼠肝微粒体细胞色素Ｐ４５０、细胞色素ｂ５、苯胺羟化酶及全血胆碱酯酶活性的影响。结果表明：以净地灵１ｍｇ／ｋｇ灌胃，每天１次，连续１周后，对大鼠肝微粒体细胞色素Ｐ４５０有明显抑制作用，对细胞色素ｂ５和苯胺羟化酶无显著影响。大鼠按净地灵１ｍｇ／ｋｇ经口１次授药后，对全血胆碱酯酶活性影响的时相效应表明，其最大抑制作用是在授药后２ｈ，授药后２４ｈ胆碱酯酶活性基本恢复至正常水平。根据在亚慢性实验中期（４５ｄ）和结束时（９０ｄ）分别测定各组动物全血胆碱酯酶活性的结果，表明该农药对大鼠的最大无作用剂量为０．０５ｍｇ／ｋｇ。

除草剂草甘膦对大鼠肝微粒体酶及脂质过氧化作用的影响

通过体内和体外试验，研究了草甘膦对大鼠肝微粒体酶、脂质过氧化作用及还原型谷胱甘肽的影响。体内试验结果表明：草甘膦能显著诱导增加微粒体细胞色素Ｐ（４５０）含量，与对照组比较［ｘ±ｓ（下同）分别为（０．６８±０．１２）、（０．５９±０．０９）μｍｏｌ／ｇ］具有显著意义（Ｐ＜０．０５）。并且可使还原型谷胱甘肽的含量显著增加，与对照组比较［分别为（１２８１．５±７４．０）、（１１７８．９±２２．０）μｇ／ｇ］具有极显著意义（Ｐ＜０．０１）。体外试验结果表明：草甘膦在１０（－８）～１０（－４）ｍｏｌ／Ｌ浓度范围内对细胞色素Ｐ（４５０）无明显影响，但能显著抑制脂质过氧化作用，在１０（－７）～１０（－４）ｍｏｌ／Ｌ时可增加还原型谷胱甘肽的含量，且呈明显剂量效应关系。

上呼吸道分泌物中α-L-岩藻糖苷酶活性测定对头颈部恶性肿瘤诊断价值的研究

采用微量比色法对２０例正常人、头颈部良性疾病和恶性肿瘤患者各２０例上呼吸道分泌物中α－Ｌ－岩藻糖苷酶（ＡＦＵ）活性进行对比研究，结果表明：３组上呼吸道分泌物中ＡＦＵ活性顺次增高，但前两组间差异无显著性意义（Ｐ＞０．０５），而第３组与前两组的差异均有显著性意义（均为Ｐ＜０．０１），其敏感性、可靠性和特异性分别是７５％、８５％和９５％，提示上呼吸道分泌物中ＡＦＵ活性的检测可作为头颈部恶性肿瘤早期诊断的一项新的有价值的辅助指标，该方法具有样本易采集、检测快速。

硒多糖与亚硒酸钠的抗突变性研究

采用Ames试验方法，对硒多糖和亚硒酸钠的抗突变作用进行了研究。试验结果：硒多糖和亚硒酸钠在以硒浓度为0．0336～105μg／皿时，对道诺霉素致突变性的抑制率分别为27．0％～96．3％和20．1％～90．0％；对间接致突物环磷酰胺的抑制率分别为15．4％～51．1％和17.0％～47.6％。硒多糖对叠氮钠致突变的抑制率为1.7％～15．5％。表明硒多糖和亚硒酸钠对道诺霉素致突变性有明显的抑制作用，对环磷酰胺的致突变性有一定抑制作用。而硒多糖对叠氮钠致突变性的抑制作用不明显。

二硫化碳对大鼠睾丸c-myc表达的影响

目的检测二硫化碳(CS2)对大鼠睾丸c-myc表达水平的影响。方法取健康Wistar雄性大鼠36只随机分为6组,以不同浓度CS2(0、50、250、1250mg/m3)静式吸入染毒,共10周。另设1250mg/m3(CS2)加VitE(250mg/kg)组和单纯VitE(250mg/kg)组,作为实验干预组,VitE拌入饲料。染毒结束后,处死动物取出睾丸组织制备组织匀浆,分别测定各组超氧化的歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量。蛋白定量后用WesternBlot法检测c-myc表达水平。结果睾丸中SOD活力下降,MDA含量上升,前者在各个浓度时与对照组比较均有显著差异(P<0.01),后者在最高浓度时与对照组比较有显著差异(P<0.01)。c-myc的表达出现双向变化,即在低浓度时被抑制,中、高浓度时被诱导,且最高浓度时与对照组比较有显著差异(P<0.05)。当用VitE干预后,SOD活性回升(P<0.05),MDA含量下降(P<0.01),c-myc的表达明显降低(P<0.05)。结论脂质过氧化可能参与了CS2对大鼠睾丸c-myc表达的调节。

CS2致大鼠睾丸Sertoli细胞DNA损伤的研究

目的研究CS2对离体培养大鼠睾丸Sertoli细胞DNA的损伤作用。方法从大鼠睾丸组织中分离Sertoli细胞进行离体原代培养、纯化及鉴定,用不同浓度(0、0.36、0.72和1.44μmol/ml)CS2染毒,应用SCGE检测CS2诱导Sertoli细胞DNA损伤,以彗星尾DNA%和Olive尾距反映DNA损伤水平。结果染毒组Sertoli细胞呈彗星状,尾DNA%[(13.91±3.23)、(37.07±5.42)和(49.10±5.26)]和Olive尾距[(3.71±1.66)、(11.73±2.65)和(19.54±3.41)]随CS2染毒浓度的增高而逐渐增高,与阴性对照组比较差异均有显著性(P<0.01),且与剂量对数呈明显的剂量-效应关系。结论CS2可诱导大鼠睾丸Sertoli细胞DNA损伤。

制牛黄的致突变性研究

制牛黄是利用体外培养方法获得的天然牛黄代用品。本文采用Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验及人外周血淋巴细胞染色体畸变试验对其致突变性作用进行了研究。Ames试验点试法样品加入量为20微克/皿,样品回变菌落数与自发回变菌落数比较,结果为阴性;Ames试验标准平皿掺入法样品加入量从1,250微克/皿到10,000微克/皿,各剂量的回变菌落数在加活化系统（+S9）和不加活化系统（-S9）的条件下均未超出正常范围,试验结果亦为阴性。微核试验三个试验组的剂量分别为50,150。