响应面法优化豆渣DNA提取中的细胞裂解工艺

采用响应面法对豆渣DNA提取中的细胞裂解工艺进行优化。在单因素实验基础上,选取SDS(十二烷基硫酸钠)浓度、裂解液pH、裂解温度为影响因子,利用Box-Behnken中心组合进行三因素三水平的实验设计,以DNA提取率为响应值,进行响应面分析。结果表明,裂解时间70min时,豆渣细胞裂解的最优条件为:SDS浓度1.84%、裂解液pH5.95、裂解温度81℃。在此条件下,DNA提取率的理论值为0.63%,实测值为0.625%。

豆渣DNA及其酶解物的体内抗氧化作用

研究豆渣DNA及其酶解物对正常小鼠的体内抗氧化作用。将80只昆明小鼠随机分为8组,每天分别灌胃VE(30 mg/kg)、生理盐水(NS)、不同剂量的DNA(30、60、120 mg/kg)及DNA酶解物(30、60、120 mg/kg)。30天后,取血、肝脏和脑,测定其中SOD、CAT、GSH-Px的活性及MDA含量。试验结果表明豆渣DNA及其酶解物均可以提高正常小鼠血清、肝脏和脑中SOD、CAT及GSH-Px活性,降低MDA含量,尤以DNA酶解物组效果为佳。此说明豆渣DNA及其酶解物均具有一定的抗氧化能力,且豆渣DNA酶解物的抗氧化能力强于豆渣DNA。

工业化方法提取及纯化豆渣RNA的工艺研究

以新鲜豆渣为原料,在单因素试验基础上,根据中心组合试验设计原理进行四因素三水平的响应面分析试验,对豆渣中提取RNA的工艺参数进行优化,同时对RNA的最优沉淀剂进行了筛选。结果表明,其最适裂解条件为裂解温度92℃,裂解时间70 min、裂解液pH 5.4、液料比10∶1,且在此条件下的最适沉淀剂为异丙醇-高NaCl溶液。此法最终的豆渣RNA得率为0.48%,OD260/OD280为1.83。

豆渣DNA酶解物制备及其体外抗氧化活性

以豆渣DNA为原料,以OD260为检测指标,通过单因素和正交试验优化DNase I对其最佳酶解工艺,并比较豆渣DNA酶解前后的抗氧化活性。结果表明,豆渣DNA酶解的最佳条件为:酶解温度37℃,pH 7.5,加酶量(E/S)3 000 U/g,底物浓度2.5%,此时OD260为1.57。豆渣DNA酶解物的·OH清除率、DPPH·清除率及其还原力均明显高于豆渣DNA。