抗ICAM-1单克隆抗体的制备与特性鉴定

目的:制备有生物学活性的抗人细胞间黏附分子-1(ICAM-1)单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定。方法:以纯品ICAM-1为抗原免疫BALB/c小鼠4次。采用杂交瘤技术,经3次亚克隆筛选稳定分泌抗人ICAM-1 mAb的杂交瘤细胞株。采用动物体内诱生的方法大量制备mAb。以protein G对其进行纯化后,用间接ELISA法测定mAb的效价并鉴定其Ig亚类。用Western blot鉴定mAb的特异性。结果:筛选出4株可稳定分泌抗人ICAM-1 mAb的杂交瘤细胞株,分别命名为B9株、F1株、C11株和D6株。4株mAb的Ig亚类均为IgG1。4株mAb培养上清的效价均为1∶1 000;腹水的效价B9株与D6株为1∶2×105,F1株与C11株为1∶4×105。纯化后mAb的蛋白浓度为1.2 g/L,均可与ICAM-1特异性结合。结论:成功制备出效价高、特异性良好的4株抗ICAM-1 mAb,为进一步研究ICAM-1的生物学功能和临床应用奠定了基础。

抗ICAM-1单克隆抗体在治疗方面的研究进展

细胞间黏附分子-1（ICAM-1；CD54）属于免疫球蛋白超家族成员，是一种跨膜的单链糖蛋白，相对分子质量（Mr）为80000～110000，在细胞膜上分为细胞外段，疏水的跨膜段和短的细胞内区段。

Graves病治疗前后甲状腺轴功能、自身抗体和细胞间黏附分子-1的变化

目的通过前瞻性临床试验观察Graves病(GD)患者抗甲状腺药物(ATD)系统治疗前后甲状腺轴功能、自身抗体和可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)的变化,探讨有效监测GD转归及预后的免疫学指标。方法初发GD患者134例,根据是否伴突眼分为突眼组(A组)和非突眼组(B组),A组根据早期是否加用强的松分为Aa、Ab亚组,B组根据后期是否加用左旋甲状腺素片分为Ba、Bb亚组。规范治疗2年以上逐渐减量停药后随访,观察治疗前、治疗后3~36个月患者甲状腺轴功能、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)、甲状腺刺激性抗体(TSAb)和sICAM-1的变化规律。结果患者初诊年龄、sTSH、游离甲状腺素(FT4)、TSAb、sICAM-1是GD复发的主要影响因素。血清TSAb随疗程延长逐渐下降,至治疗12个月时显著低于治疗前(t=2.787,P<0.01),30个月时降低到与健康人无差异(t=1.031,P>0.05)。血清sICAM-1水平随疗程而缓慢下降,30个月后明显低于治疗前(χ2=46.420,P<0.01),36个月时与健康人无异(χ2=17.311,P>0.05)。TPOAb、TgAb水平均差异无统计学意义(P>0.05)。按转归分为缓解组与复发组,29例患者在24~36个月出现复发,总复发率为21.6%。复发组TSAb显著高于同期治疗缓解者(t=1.783、2.075、3.837,均P<0.05),复发组sICAM-1水平始终高于缓解组(P<0.05)。不同治疗组复发率分别为Aa 12.5%、Ab 38.5%、Ba 29.8%、Bb 10.0%,Bb组复发率显著低于其余三组(χ2=5.638,P=0.018)。Aa、Ab、Ba三组的复发率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GD患者血清TSAb、sICAM-1水平随疗程缓慢下降,明显晚于甲状腺功能恢复,sICAM-1水平恢复晚于TSAb,动态监测血清TSAb和sICAM-1变化,可以作为ATD疗效评价指标。ATD治疗至少应坚持sICAM-1水平恢复正常即治疗30月以上,才能有效降低复发率。

Graves病诊治与骨转换标志物的相关性研究

目的探讨Graves病(GD)患者相关指标与骨转换标志物(BTMs)的关系及其治疗前后变化的预测价值。方法回顾性研究458例GD患者和109名健康体检者(对照组)。比较2组的甲状腺激素[游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺素(TSH)]和BTMs[骨钙素、Ⅰ型前胶原N-末端肽(PⅠNP)、Ⅰ型胶原C-末端肽(CTX)]水平。采用单、多因素分析探讨GD患者14项相关指标与BTMs的相关性。所有GD患者均接受抗甲状腺药物(ATD治疗组)或放射性碘治疗(RAI治疗组)。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析治疗后FT3、FT4水平/治疗前FT3、FT4水平(FT3-P/FT3-A,FT4-P/FT4-A)的变化对BTMs是否恢复正常的预测价值。结果GD组FT3、FT4、骨钙素、PⅠNP、CTX水平均显著高于对照组(P<0.05),治疗6个月后均有所下降。FT3、FT4、促甲状腺素受体抗体(TRAb)、血钙和碱性磷酸酶(ALP)是预测骨钙素升高的危险因素。病程、FT3、25-羟维生素D(25-OHD)、ALP是预测PⅠNP升高的危险因素。年龄、病程、FT3、血钙和ALP是预测CTX升高的危险因素。ATD治疗组FT3-P/FT3-A和FT4-P/FT4-A预测骨钙素恢复的曲线下面积(AUC)分别为0.680和0.640(P<0.05),临界值分别为0.535和0.595。RAI治疗组FT3-P/FT3-A和FT4-P/FT4-A预测骨钙素恢复的AUC分别为0.730和0.670(P<0.05),临界值分别为0.355和0.595,2个治疗组对PⅠNP和CTX的恢复无预测价值(P>0.05)。结论GD患者的BTMs异常升高。ATD治疗6个月后FT3下降超过46.5%,FT4下降超过40.5%;RAI治疗组治疗6个月后FT3下降超过64.5%,FT4下降超过40.5%是GD骨形成指标骨钙素恢复的独立预测因子。

发展和强能视角下的高校勤工助学管理策略——以杭州师范大学医学院为例

文章主要是通过对杭州师范大学医学院学生从事勤工助学工作的调查,了解医学院学生在学院及学校相关岗位的工作现状,分析存在的问题,并根据调查结果提出有关意见和建议,探讨在"发展"和"强能"的视角下勤工助学工作的管理策略。

复方碘溶液对格雷夫斯病患者摄131I功能及131I疗效的影响

目的探讨停用复方碘溶液不同时间对格雷夫斯病(GD)患者摄131I功能及131I疗效的影响。方法回顾性纳入2012年1月至2016年11月首次接受131I治疗GD的患者1585例(男415例,女1170例;年龄17~62岁),分为预治疗组(131I治疗前服用过复方碘溶液)85例[停用复方碘溶液4~7d组(A组)35例,停用8~14d组(B组)28例,停用15~30d组(C组)22例]和对照组(未服用复方碘溶液)1500例。比较4组患者的最高摄131I率(RAIU)、有效半衰期、131I治疗前的游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)和游离甲状腺素(FT4)水平,并进行疗效评价。采用单因素方差分析、Ridit分析和χ^2检验分析数据。结果A^C组与对照组最高RAIU分别为(64.86±13.20)%、(67.40±9.10)%、(73.46±4.65)%和(74.14±9.87)%,差异无统计学意义(F=1.658,P>0.05)。4组有效半衰期差异亦无统计学意义(F=0.651,P>0.05)。A^C组与对照组患者的FT3水平分别为(11.90±4.85)、(15.51±2.95)、(22.08±2.31)和(23.98±4.98)pmol/L(F=13.972,P<0.01),其中A组与B组明显低于对照组及C组(t值:6.57~12.08,均P<0.05);上述4组FT4水平分别为(25.65±11.95)、(32.33±6.25)、(68.41±13.94)和(73.65±21.55)pmol/L(F=21.238,P<0.01),A组与B组FT4水平明显低于对照组及C组(t值:36.09~48.00,均P<0.01)。预治疗组与对照组患者总体疗效比较差异无统计学意义(u=0.397,P>0.05);4组间完全缓解率差异亦未见统计学意义(χ^2=1.169,P>0.05)。结论131I治疗GD前使用复方碘溶液行预治疗,停药后2周内行131I治疗;为避免131I治疗后出现甲亢加重,建议停用4~7d即可行131I治疗。

荧光酶联免疫分析技术测定人甲状腺过氧化物酶抗体

目的以重组人甲状腺过氧化物酶（hTPO）为抗原建立定量检测hTPO抗体（hTPOAb）的板式荧光酶联免疫技术（FEIA），用于甲状腺疾病的临床检测。方法用该法测定326名健康人和各类甲状腺疾病患者279例，包括慢性淋巴细胞性甲状腺炎（HT）119例，初诊Graves病（GD）116例，结节性甲状腺肿28例，亚急性甲状腺炎10例，单纯性甲状腺肿6例的血清hTPOAb水平。组间比较采用秩和检验，组间阳性率的比较用，检验。结果（1）确立该法阳性切限值为第95百分位数（％）4000U／L（即hTPOAb浓度值大于4000U／L定为阳性）。（2）批内、批间变异系数（CV）分别为4．59％～6．52％、17．37％～17．45％。（3）该法与商品试剂盒雅培微粒荧光法检测同批血清hTPOAb结果显著相关（r=0．80，P〈0．01）。（4）用该法测定各类甲状腺疾病患者hTPOAb浓度值结果以中位数表示，HT为7000U／L，阳性率85．70％；初诊GD为4000U／L，阳性率39．65％；结节性甲状腺肿为4000U／L，阳性率28．57％；亚急性甲状腺炎为4000U／L，阳性率30．00％；单纯性甲状腺肿为3500U／L，阳性率0。HT患者血清hTPOAb阳性率与其他各甲状腺疾病组之间的差异有统计学意义（，=53．45，39．30，15．41和21．74，P均〈0．01）。结论该定量检测hTPOAb的FEIA应用于临床甲状腺疾病患者的血清学检查，在HT中有很高的阳性率，故可作为HT的诊断手段。

定量检测人甲状腺过氧化物酶抗体化学发光酶免疫分析法的临床应用

目的应用人甲状腺过氧化物酶抗体（hTPOAb）的化学发光酶免疫分析（CLEIA）试剂盒，检测正常人及各类甲状腺疾病患者，探讨该试剂盒在临床应用中的价值。方法用该试剂盒共测定333例样品血清中的hTPOAb，包括正常人133名，各类甲状腺疾病患者200例，其中桥本甲状腺炎（HT）94例，Graves病68例，结节性甲状腺肿19例，亚急性甲状腺炎10例，单纯性甲状腺肿9例。结果确立本试剂盒hTPOAb阳性切限值为3．22IU／ml，hTPOAb浓度以中位数表示，分别为HT5．48IU／ml，阳性率为91．50％；Graves病1．88IU／ml，阳性率为29．40％；结节性甲状腺肿1．83IU／ml，阳性率为10．50％，亚急性甲状腺炎2．54IU／ml，阳性率为20．00％；单纯性甲状腺肿2．21IU／ml，阳性率为0。HT患者血清hTPOAb阳性率高于其他患者（X2=67．22，60．13，35．49，49．89，P均〈0．01）。结论该定量检测hTPOAb的CLEIA试剂盒在HT中有很高的阳性率，可作为HT有效的诊断手段。

左旋甲状腺素治疗新生儿先天性甲状腺功能减退体、智发育的远期疗效

观察长期左旋甲状腺素（L-T4）治疗对新生儿先天性甲状腺功能减退患者体、智发育的影响，探讨青春期和成年后的远期疗效。15例早年患者中14例是筛查发现，现年15～31岁，男9例、女6例。（1）治疗10多年至青春期时，回访年龄12．6～18．1岁，患者身高14例正常，体重8例正常，6例超重，只筛查出的首例患者身高154cm，体重43．5kg，均低于标准。X线骨龄9例正常，1例发育较快，4例左腕骨龄发育迟缓。智商联合型瑞文测验（CRT）3例优良，7例正常，3例边缘，2例低下。综上14例筛查中1例体、智发育迟滞占7％，而93％患者处在基本正常发育过程。（2）接受20多年治疗进入成年期的13例患者中4例失访，回访的9例（8例是筛查出的）年龄23～31岁，男5例、女4例，身高和x线骨龄全部正常，体重基本正常，只2例体重指数轻微超重。智商7例良好，2例轻度低下。7例患者接受了中等以上的教育，除1例在学。余均就职。1例小学毕业后学国画出师售画，1例初小毕业务农，每人都是胜任其职的劳动者。综上8例筛查的患者中1例为智力轻度低下，占12．5％，而87．5％的患者体、智都达健康人群水准。

左旋甲状腺素凝胶剂治疗大鼠甲状腺功能减退模型的初步研究

目的:考察左旋甲状腺素(L-T 4)凝胶剂对甲状腺功能减退(简称甲减)大鼠模型的初步治疗效果。方法:取健康成年清洁级Wistar大鼠30只(雌雄各半,2月龄),完全随机设计分为6组(每组5只),1组为正常对照组,另外5组腹腔注射131I 18.5 MBq制备甲减模型:其中3组隔日分别给予每100 g体质量0.2 g(高剂量组)、0.1 g(中剂量组)、0.05 g(低剂量组)L-T 4凝胶;1组每日给予每100 g体质量0.1 g空白凝胶;另1组每日灌胃每100 g体质量5μg L-T 4钠片(优甲乐)。利用放射免疫分析法和化学发光免疫分析法分别于给药第2、4和8周测定血清甲状腺素总量(TT 4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT 3)、游离甲状腺素(FT 4)、促甲状腺激素(TSH)的含量。采用单因素方差分析和Bonferroni检验分析数据。结果:给药第2周,与正常对照组相比,口服优甲乐组TT 4、FT 4降低,TSH增高,差异均有统计学意义[TT 4:(65.04±8.20)与(40.34±1.41)nmol/L,FT 4:(29.63±4.03)与(18.03±2.76)pmol/L,TSH:(6.04±0.80)与(10.07±1.01)mU/L;F值:60.081~108.128,t值:-4.44~4.86,均P<0.05];而L-T 4凝胶剂低剂量组的TT 4[(67.88±14.27)nmol/L]、FT 3[(4.04±0.84)pmol/L]、FT 4[(33.76±7.71)pmol/L]、TSH[(8.20±0.40)mU/L]与正常对照组[FT 3:(4.45±0.34)pmol/L]的差异均无统计学意义(t值:0.44~2.61,均P>0.05)。给药第4周,L-T 4凝胶剂低剂量组、口服优甲乐组和正常对照组的TT 4、FT 3、FT 4、TSH差异均无统计学意义(F值:34.527~90.976,t值:-0.95~0.35,均P>0.05)。给药第4周,L-T 4凝胶剂低剂量组和口服优甲乐组的TT 4、FT 3、FT 4、TSH差异均无统计学意义(t值:-0.71~1.03,均P>0.05);一直到第8周,2组各指标差异也均无统计学意义(F值:47.239~160.679,t值:-0.58~1.02,均P>0.05)。结论:L-T 4凝胶剂对大鼠甲减具有明显的治疗作用,其起效快、效果平稳,治疗效果优于L-T 4钠片(优甲乐)。