塑化标本在高校动物解剖学实验教学中的应用及体会

塑化技术是通过真空物理过程,利用液态高分子多聚物作为生物塑化剂对标本进行浸渗,替代组织细胞中的水分和脂质,从而使其聚合塑化的技术。本文的教学实践表明,塑化标本具有无毒无味、持久耐用,可触摸,便于携带及维护等特性,摆脱了福尔马林浸泡式标本的毒性和强烈刺激性,从而改善了实验教学环境,深得学生欢迎,并获得了良好的实验教学效果,提高了教学质量。

动物福利课程“小组合作”教学模式研究

分析动物福利课程教学中存在的问题,主要有教学课时不足、学生参与度不高,思辨能力不强。构建以任务驱动为导向基于翻转课堂的“小组合作”教学模式,教学过程以小组形式开展,小组成员动态更新促进全员积极参与;重构的模块化教学内容、小组任务驱动、细化优化的教学环节提高学生的思辨能力;积分制评价体系综合反映学生的学习过程。“小组合作”教学模式激发学生的参与热情,提高学习效率,提升学习能力和思辨能力,适合在动物医学、畜牧学等相关专业推广。

草地贪夜蛾体表靶向TRPV1的毒素分子筛选及其功能研究

[目的]探究草地贪夜蛾诱发人畜危害的分子机制,以草地贪夜蛾诱发人畜呼吸道炎症、疼痛等危害的潜在生理靶点(瞬时电位感受器香草酸受体1,TRPV1)为切入点,揭示草地贪夜蛾体表物质诱发人畜危害的毒素物质基础和生理靶点。[方法]通过凝胶分子筛以及高效液相色谱等方法对草地贪夜蛾体表物质进行分离和纯化,结合膜片钳电生理技术筛选草地贪夜蛾体表物质中靶向TRPV1的活性毒素组分。[结果]从草地贪夜蛾体表物质中分离纯化到一种能够高效(100 mg/L)激活TRPV1的毒素组分V-7,该组分能特异性作用于TRPV1,而对常见离子通道类膜蛋白生理受体(如钠离子通道NaV1.4、NaV1.5、NaV1.7,以及钾离子通道KV1.1、KV2.1、KV4.1)没有作用。[结论]从草地贪夜蛾体表混合物中可分离得到一种高效且特异性激活动物生理靶点TRPV1的毒素组分,部分揭示了外来入侵农业害虫草地贪夜蛾诱发人畜危害的物质基础及生理靶点。

“互联网+”时代关于新形态教材建设与应用的思考

"互联网+"时代,传统纸质教材与数字化教学资源融合形成的新形态教材,将成为教材建设的一种新趋势。作者结合实践应用,探讨了新形态教材建设与应用过程中的注意事项:重视教材纸质部分的编写,充分融合精品资源共享课、MOOC等在线开放课程已有数字化教学资源,重视读者对数字化教学资源建设的意见,开发支持多种智能终端的APP,优化数字资源内容。考虑到数字资源在不同终端运行的兼容性和优化应用模式,提出应建设一支稳定的制作团队。

葛氏鲈塘鳢耐受完全结冰缺氧环境的能力及生理生化响应

为研究葛氏鲈塘鳢Perccottus glenii对完全结冰缺氧环境的耐受能力和生理生化响应,试验测定了体质量为(30.0±2.7)g的葛氏鲈塘鳢在不同水体结冰温度下的存活率,以及水体结冰前(0℃)、水体完全结冰(-2℃持续24 h)、鱼体复苏(4℃,1、24、72 h)各阶段的生理生化指标。结果表明:葛氏鲈塘鳢在-2℃冰中持续24 h的存活率为100%,随着温度降低存活率明显下降,-5℃下持续24 h时的存活率为0;与水体结冰前的各指标相比,葛氏鲈塘鳢在水体完全结冰和鱼体复苏阶段的肝糖原含量显著降低(P<0.05),肌糖原变化趋势与肝糖原相似但未达到显著性水平(P>0.05),心脏、脑、鳃和肌肉中的葡萄糖含量显著升高(P<0.05),鳃、脑和心脏中的乳酸含量显著升高(P<0.05),但各组织中的乳酸脱氢酶活性变化不显著(P>0.05)。研究表明,葛氏鲈塘鳢可以短时间耐受较温和的水体完全结冰缺氧环境,通过分解肝糖原在组织中积累葡萄糖作为主要的抗冻保护剂,增强无氧糖酵解代谢来应对结冰缺氧环境。

东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST的表达、纯化及抑菌活性分析

【目的】利用毕赤酵母菌真核表达系统重组表达东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST,分析评价dybowskin-1ST的抑菌活性。【方法】采用TRIzol法提取蛙皮总RNA,经RT-PCR扩增获得抗菌肽dybowskin-1ST基因,将目的基因克隆到毕赤酵母菌分泌型表达质粒pPIC9K中,得到重组质粒pPIC9K-1ST。经电转化将pPIC9K-1ST转入到毕赤酵母菌GS115中,获得高效表达dybowskin-1ST的重组菌株。以甲醇诱导重组菌株,上清液经SDS-PAGE检测表明有目的蛋白dybowskin-1ST分泌表达。目的蛋白经Ni-agarose色谱柱分离纯化后,对大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯氏杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、肠炎沙门氏菌和蜡状芽孢杆菌进行抑菌活性分析。【结果】成功构建了东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST的毕赤酵母真核表达系统,且dybowskin-1ST对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有良好的抑菌效果。【结论】东北林蛙皮肤抗菌肽dybowskin-1ST具有良好的广谱抗菌活性和潜在的研发价值。

虎源大肠杆菌耐药性的检测与分析

对黑龙江省哈尔滨市东北虎林园虎源大肠杆菌进行分离培养,开展大肠杆菌耐药性调查。采用纸片扩散法测定各分离菌株对14种抗生素的敏感性,结果表明:虎源大肠杆菌各分离株对各抗生素的敏感性不同。对氨苄西林高度耐药,耐药率为100%;对四环素、复方新诺明的耐药率也均在80%以上;对氨曲南、阿莫西林/克拉维酸钾敏感率为70%以上。

中国林蛙皮肤抗菌活性肽的分离提取

将中国林蛙毁双髓,置冰浴中迅速剥皮,冲洗血污后粉碎,经 80%甲醇抽提 2次;再经sephadexG-100、sephadexG-25和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离等,从林蛙皮肤中分离获得 5种小分子多肽。抗菌活性试验表明:经sephadexG-25凝胶过滤获得的小分子多肽洗脱峰第 6峰,对革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌具有较强的抗菌活性;SDS-PAGE电泳表明为单一区带,此抗菌活性多肽的相对分子量为 4. 31ku。

人为补水对扎龙湿地芦苇生长的影响

2009年5—6月,测定了扎龙淹水区(RH)和非淹水区(RA)芦苇在补水前5 d、补水后10、20、30 d的株高、株密度和地上生物量。为排除其他环境因子对芦苇生长的影响,试验分别设置RH和RA的对照组CH、CA。结果显示:补水前5 d,RH芦苇的株高和地上生物量均大于RA,但株密度小于RA;补水引起RH芦苇株高、株密度和地上生物量分别增加12 cm、112株.m-2、193 g.m-2,RA分别增加8 cm、11株.m-2、66 g.m-2;补水后30 d,不同水位芦苇的株高、株密度和地上生物量由高到低的顺序均为RH>CH>RA>CA;相关性分析表明,水中的总氮(TN)、总磷(TP)与芦苇株高、株密度和地上生物量未见显著相关。

圈养虎源大肠杆菌耐药性和整合子特性分析

对东北虎林园分离的具有耐药性的大肠杆菌进行了整合子-基因盒的研究,结果表明:61株分离菌中整合酶Ⅰ检出率为52.46%,整合酶Ⅱ和整合酶Ⅲ均没检出。分离株对阿莫西林/克拉维酸、氨曲南和安普霉素较敏感;对氨苄青霉素、四环素和复方新诺明高度耐药。序列分析表明,含有3种基因盒,分别是dfr A15、dfr A12和aad A2。

大肠杆菌胁迫下东北林蛙皮肤抗菌肽分泌特性研究

以东北林蛙（Rana dybowskii）为试验对象,采用大肠杆菌（Escherichia coli）作为环境胁迫因子,通过RP-HPLC分析、抑菌活性和蛋白浓度比较,观察其皮肤分泌物的特异性分泌,以期揭示两栖类动物抵御环境微生物时皮肤分泌抗菌肽的变化规律。研究发现,用E.coli胁迫1~18d后皮肤分泌物粗提物洗脱峰数量明显减少了61.54%~84.62%,对4个持续出现的8、9、11和14号洗脱峰的抑菌活性试验显示,8、9号峰对G-和G＋菌均表现较强的活性抑制,而11、14号峰仅对G＋菌有较强的抑菌活性。此外,E.coli胁迫后第7天组皮肤分泌物的洗脱峰数量、持续出现峰的峰面积值及蛋白浓度与对照组比均明显增加,第23天组均恢复至较高水平。研究结果表明：两栖类皮肤抗菌肽可能在参与机体先天免疫系统防御和启动后天免疫应答的关键环节中发挥重要的桥梁作用。

“互联网+”背景下“鱼类分类学”在线开放课程的建设与应用

为了适应"互联网+"背景下全新教学环境对课程教学资源和教学模式的挑战,提高学生的学习参与度,培养学生终身学习的能力,东北林业大学"鱼类分类学"课程组建设了"鱼类分类学"在线开放课程并应用于教学实践,探索了"互联网+"背景下在线开放课程建设与实践的教学改革方法。文章以"鱼类分类学"在线开放课程为例,从教学课件、题库、网络资源库和讨论区的建设及应用,考核方式、教学效果等方面进行了详细说明。结果表明:在线开放课程的建设及应用打破了学生学习的时空限制,确定了学生的主体地位,培养了学生终身学习的能力;师生的及时互动也为教师不断优化教学内容,有效引导学生的学习方向提供了依据和渠道。

2种常用农药对葛氏鲈塘鳢肝脏SOD活性的影响

[目的]探究有机氯和菊酯类农药对葛氏鲈塘鳢抗氧化酶活性的影响,为评价该2类常用农药对葛氏鲈塘鳢的急性毒性效应提供理论依据。[方法]研究了硫丹(1.25、2.50、3.75、5.00和6.25μg/L)和高效氯氟氰菊酯(0.50、1.00、1.50、2.00μg/L)96 h暴露对葛氏鲈塘鳢肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。[结果]随着硫丹浓度的增加,葛氏鲈塘鳢肝组织的SOD活性表现为先诱导后抑制。高效氯氟氰菊酯各处理组的SOD活性均高于对照组,其中1.50和2.00μg/L处理组的SOD活性显著高于对照组,呈现出明显的浓度效应关系。[结论]硫丹和高效氯氟氰菊酯均可影响葛氏鲈塘鳢肝组织的SOD活性,其变化可作为生物标志物用以评价其对葛氏鲈塘鳢的急性毒性效应。

电刺激后东北林蛙皮肤分泌物及其抗微生物肽组分的动态恢复

东北林蛙皮肤分泌物排空后,在不同时间点收集其皮肤分泌物,分析皮肤分泌物及其中抗菌肽谱的动态恢复规律。结果表明:电刺激排空后的第0～21天时间范围内东北林蛙皮肤分泌物总量的恢复呈递增趋势;高效液相色谱显示不同时间收集的皮肤分泌物的组分差异不显著(P>0.05,n=5),但各组分恢复的时间并不同步;用大肠杆菌和金黄色葡萄球菌对恢复较快的2个组分峰成分进行抑菌试验,发现2组分均有较强的抑菌活性。用ESI-MS/MS对2组份进行质谱鉴定,确定其氨基酸序列。东北林蛙皮肤分泌物中抗微生物肽的恢复表达优先于其他多肽,该免疫防御策略可为东北林蛙在复杂环境中的生存提供保证。

动物医学门类课程实验教学改革初探——以组织胚胎学课程为例

组织胚胎学课程作为动物医学专业的基础课程,实验课程对于理论课程的辅助作用非常重要,研究主要区别于传统的实验教学模式,从教师、学生、教学手段、考核方式等方面入手进行实验课程的改革。通过改革后,可以提高学生学习兴趣、参与度,同时对于组织胚胎学的组织结构能够有更加深入的了解。

基于野生动物医学特色的兽医微生物学课程建设探索

基于传统动物医学专业人才培养体系中《兽医微生物学》课程缺乏传达人兽共患疾病与野生动物保护关系的理念,野生动物医学特色的兽医微生物学课程建设在国内处于相对空白状态,本研究从课程建设思路、师资队伍建设、课程教学内容和体系建设、教学方法和手段、实践教学体系等方面入手,围绕野生动物医学特色进行创新改革研究,建设有野生动物医学特色的《兽医微生物学》教学体系。

东北林蛙GSK3β基因荧光定量PCR引物筛选体系的建立

为探究低温条件下东北林蛙(Rana dybowskii)肝脏中GSK3β基因表达量变化,需利用荧光定量PCR(Fluorescence quantitative real-time PCR)对GSK3β基因表达量进行检测,而在此过程中PCR引物的筛选直接影响到检测结果数据的准确性与真实性。本实验以东北林蛙为实验对象,基于本研究组前期获得的东北林蛙转录组数据库,并参考其他物种GSK3β基因,利用Beacon Designer 7软件设计了6对引物,采用逆转录PCR和实时荧光定量PCR技术,筛选出1对GSK3β基因荧光定量PCR引物(F-TCCTACATCTGCTCTCGGTA,R-ACATCTATGCTGGAGGTATAATCA),其扩增效率为E=99.3%、R^2=0.998,可用于东北林蛙GSK3β基因实时表达量的研究。

东北林蛙重组抗菌肽dybowskin-1ST部分理化特性和生物学活性研究

目的：对具有广谱抑菌活性的东北林蛙（Rana dybowskii）重组抗菌肽dybowskin-1ST进行热稳定性、酸碱稳定性、局部过敏反应（Arthus反应）及溶血活性分析,为进一步摸清重组肽的理化特性及其应用提供科学依据。方法：将重组抗菌肽dybowskin-1ST分别置于不同环境温度（25~100℃）及不同酸碱环境（pH2~pH12）中处理4 h,观察其对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）及大肠杆菌（Escherichia coli）的抑菌环直径,确定其稳定性;用不同浓度梯度的重组dybowskin-1ST进行溶血试验和局部过敏反应（Arthus反应）。结果：1.重组dybowskin-1ST在25~100℃温度及pH2~pH12环境下均有抑菌活性,其中,最适环境温度为25℃;重组dybowskin-1ST在pH3~pH7范围对Staphylococcus aureus抑菌活性较强（抑菌环直径为12.77~13.17 mm）,在pH3~pH8范围对Escherichia coli抑菌性较强（抑菌环直径为12.63~13.37 mm）。2.溶血试验结果显示,重组dybowskin-1ST对家兔红细胞的溶血率在0.14%~4.4%;小鼠Arthus氏试验观察其腹部皮下重组dybowskin-1ST注射部位红肿不明显,无出血、坏死等炎性反应。结论：实验结果显示重组dybowskin-1 ST具有较好稳定性、低溶血性及低致敏性,为其应用提供科学依据。

利用脉搏波参数间接测定大鼠动脉血压的一种方法

通过提取动脉脉搏波特征参数,建立了间接测定大鼠动脉血压的多元回归方程。结果表明:脉搏波周期、K值、脉搏波波图面积等参数与动脉收缩压有较好的相关性,与颈动脉有创血压测定法数值比较,有较小差异(P>0. 05),表明所筛选的脉搏波特征参数能准确地反映动脉的每搏收缩压值,但与舒张压相关性较差。该方法简便、准确、稳定性好,便于长期动态观察。

兴趣教学法在鱼类分类学课程中的应用

对学习的兴趣不足是导致学生缺少学习动力和创新思维的主要原因。为了提高学生学习的主动性和参与性,鱼类分类学课程中应用兴趣教学法,从兴趣的培养、提高、激励、转化和升华五个阶段提升课堂活力,提高教学效果。每一阶段都会根据学生的专业特点设计教学环节和实践活动,以兴趣为主线,将学生从被动接受变为主动研究,以创新、开放的视角深入了解专业现状和前景,从而提高学生的创新能力、实践能力,以及团队协作能力,最终为本专业培养出合格的优秀人才。