基于肝脏蛋白质组学探讨加味丹栀逍遥散的抗抑郁作用及机制

[目的]探讨加味丹栀逍遥散对慢性不可预知性温和应激(CUMS)抑郁小鼠模型的干预作用及可能机制.[方法]C57BL/6N小鼠分为正常组、模型组、加味丹栀逍遥散组和氟西汀组.采用CUMS复制抑郁模型,模型成功后灌胃给药4周.末次给药后进行行为学测试,采用串联质谱标签法(TMT)蛋白质组学分析小鼠肝脏差异蛋白的表达谱,通过Kyoto encyclopedia of genes and genomes(KEGG)通路富集加味丹栀逍遥散抗抑郁的相关通路和蛋白;血液生化检测总胆固醇及总胆汁酸含量.[结果]与正常组相比,模型组小鼠糖水偏好率下降,自主活动次数减少,加味丹栀逍遥散给药后上调小鼠糖水偏好率及自主活动次数.蛋白组学结果显示模型组与加味丹栀逍遥散给药组之间肝脏差异表达蛋白20个,其中上调11个,下调9个.KEGG通路富集分析发现差异表达蛋白主要参与了胆固醇代谢、初级胆汁酸的合成等.生化检测发现,与正常组相比,模型组总胆固醇含量下降而胆汁酸含量升高,加味丹栀逍遥散给药能显著增加总胆固醇含量而减少总胆汁酸含量.[结论]加味丹栀逍遥散具有良好的抗抑郁效应,其机制可能与调节肝脏胆固醇异常代谢、降低血液总胆汁酸有关.

胆汁酸代谢在抑郁症中的研究进展

胆汁酸不仅在调节脂类代谢中发挥着关键的生理作用,而且也参与调节中枢神经系统。大量研究表明,胆汁酸代谢异常与抑郁症之间关系密切,但具体的机制尚不清楚。本文旨在总结胆汁酸代谢和抑郁症之间的关系,为抑郁症的研究及治疗提供新的视角。

不同中药化合物对吉非替尼肝毒性的保护作用研究

目的:筛选对吉非替尼肝毒性具有较好保护作用的药物。方法:54只SPF级雄性ICR小鼠随机分为正常组、吉非替尼组、谷胱甘肽组、川芎嗪组、水飞蓟素组、甘草酸组、黄芩苷组、芍药苷组和苦参碱组,每组6只。除正常组外,其余组小鼠均灌胃给予400mg·kg*'吉非替尼16天诱导肝损伤模型。各给药组小鼠每天于给予吉非替尼30 min后灌胃100 mg kg-1的相应药物,正常组和模型组小鼠灌胃等体积0.5%CMC-Na,给药体积为10 mL.kg-1。末次给药30 min后,眼眶后静脉丛取血并脱颈椎处死小鼠,称取肝脏质量并计算肝脏指数;HE染色观察肝脏病理变化;采用生化试剂盒检测血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)的水平。含药培养基培养AML12细胞30 min后,除正常组外,其余组加入20μmoL.L-'吉非替尼培养24 h诱导细胞损伤。CCK-8试剂盒检测细胞活力;生化试剂盒检测细胞上清液中ALT、AST和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的水平。结果:动物实验表明,与吉非替尼组相比,甘草酸、黄芩苷显著升高小鼠体质量(P<0.01),降低肝脏指数及ALT、AST水平(P<0.05);川芎嗪和水飞蓟素显著升高小鼠体质量(P<0.01),降低AST水平(P<0.05);芍药苷、苦参碱显著降低ALT和AST水平(P<0.01)。HE染色显示,吉非替尼组小鼠肝脏组织呈现大量炎症细胞浸润,肝索排列紊乱;谷胱甘肽、甘草酸、黄芩苷、芍药苷和苦参碱可显著减轻小鼠肝脏组织病理损伤。细胞实验表明,各药物均可不同程度减轻吉非替尼诱导的AML12细胞损伤,其中甘草酸、黄芩苷和芍药苷的保护作用较好,细胞存活率分别提高至96.4%、81.1%和78.2%。与吉非替尼组相比,甘草酸显著降低ALT、AST和LDH含量(P<0.05);水飞蓟素、黄芩苷和芍药苷显著降低ALT和LDH含量(P<0.05)。结论:甘草酸、黄芩苷和芍药苷对吉非替尼所致的肝毒性均具有较好的保护作用,其中甘草酸的作用最好。

UPLC-Q-TOF-MS^(E)技术结合UNIFI筛查平台分析加味逍遥丸化学成分

目的运用高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱法(UPLC-Q-TOF-MS^(E))对加味逍遥丸的化学成分进行分析与鉴定,为复方质量控制及药效物质基础研究提供理论依据。方法采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm,Waters),以0.1%甲酸水-乙腈为流动相,梯度洗脱,进样量5μL,流速0.3 mL·min^(-1),柱温40℃。采用电喷雾离子源,在正、负2种模式下进行复方质谱检测与分析,并且使用UNIFI平台对MS^(E)模式下采集的质谱数据,结合化合物准分子离子、质谱裂解途径及标准品进行结构确认。结果通过分析目标化合物的分子离子峰和二级质谱特征碎片离子,并且结合标准品裂解规律以及相关文献资料,共鉴定了其中78个化学成分,包括3个倍半萜类成分、4个苯丙素类成分、13个单萜类成分、7个酚类成分、5个环烯醚萜类成分、10个黄酮类成分、23个三萜类成分及13个其他类成分。结论运用UPLC-Q-TOF-MS^(E)技术可快速分析鉴定复方加味逍遥丸的主要化合物类型,可为复方质量控制及药效物质基础研究提供理论依据。

基于中医药文化和健康旅游视角提出张仲景文化品牌建设对策

当今,中医药文化和健康旅游走向融合,有着内在的必然依据,它们孕育出的中医药健康旅游新业态给中医药文化发展和旅游业的创新注入了新的活力。作为中医药产业文化代表的张仲景文化,应抓住机遇,借助健康旅游实现张仲景品牌建设的新突破。主要建设策略有:积极推出以张仲景等中华名医事迹为题材的图书或影视剧;将中药材种植基地开辟为特色旅游观光园;创立中医药文化研究及传播基地,建设学、疗、游为一体的中医药疗养旅游基地;利用信息技术和文化媒体平台将张仲景中医药学绍介到千家万户。

芒柄花黄素改善脂多糖诱导的小鼠抑郁样行为和神经炎症的作用研究

目的:观察芒柄花黃素(formononetin,FMN)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠抑郁样行为和神经炎症的影响。方法:雄性ICR小鼠随机分为正常组、LPS组、帕罗西江组(20 mg·kg^(-1))、FMN低剂量组(20 mg·kg^(-1)),FMN高剂量组(40 mg·kg^(-1)),每组8只,灌胃给药14天后采用糖水偏好实验(sucrose preference test,SPT)、悬尾实验(tail suspension test,TST)和旷场实验(open field test,OFT)观察小鼠抑郁样行为;采用晦联免疫吸附测定实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和实时荧光定量聚合晦链式反应实验(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)测定小鼠海马组织中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的蛋白和mRNA表达水平;采用免疫荧光染色观察小鼠海马组织中小胶质细胞钙结合蛋白-1(ionized calcium binding adapter molecule1,Iba-1)的表达水平以评价小胶质细胞活化水平。结果:与正常组相比,LPS组小鼠糖水偏好率、中心区域活动时间、中心区域活动距离、进入中心区域的次数显著下降(P<0.01),TST不动时间显著延长(P<0.05),海马组织IL-6、IL-1β和TNF-α蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0.01),海马组织CA1、CA3和DG区域Iba-1荧光强度显著增加(P<0.01)。与LPS组相比,FMN组小鼠糖水偏好率、中心区域活动时间、中心区域活动距离和进入中心区域的次数均显著升高(P<0.05或P<0.01),TST不动时间显著缩短(P<0.01),海马组织IL-6、IL-1β和TNF-α蛋白及mRNA表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01),海马组织CA1、CA3和DG区域Iba-1荧光强度显著降低(P<0.01)。结论:FMN可能通过抑制LPS诱导的小胶质细胞活化,减轻海马神经炎症,改善小鼠的抑郁样行为。

导入式教学法在药理教学中的应用

在药理学教学过程中通过采用复习回顾、设置疑问、直观导入、病例分析及事件导入等导入式教学方法,提高学生学习药理的兴趣,加深对理论知识的理解,培养学生分析处理问题的能力,增强教学效果。

科研思维能力的培养融入药理学实验教学中的探析

药理学实验教学是中医药院校实验教学中不可或缺的重要部分之一。教学是科研的基础,科研可以提高教学。因此,药理学实验教学中除了要掌握基础理论知识和动手实验能力外,还应培养学生严谨的科研态度,科学的思维方法,分析问题及解决问题的综合能力,为将来从事临床实践和科研工作奠定基础。因此,本文将探讨如何将科研思维的培养融入药理学实验教学中。

镇静催眠药的说课设计

目的:采用"说课设计"这种教学活动使学生充分掌握教学内容,提高教学质量。方法:采用说课的方式对镇静催眠药的教材分析、教学目的、教学难点重点、教学过程进行教学设计。结果:通过镇静催眠药的说课设计,可使学生掌握本章教学难点和重点,增强课堂教学效果。结论:说课设计可使教师在教学过程中因材施教,体现学生是学习的主体,是一种新型药理学教学活动。

药理学教学改革与实践

药理学是研究药物与机体之间相互作用以及作用规律的一门学科,是医学院校的必修课,在医学专业学生知识结构体系中占据核心环节。药理学学习的好坏直接影响医生的临床用药,关系着患者的生命健康。随着时代的变迁,传统的药理学教学模式已不能满足现阶段学习的需求,迫切需要改革。笔者就自身体会浅谈药理学的改革与实践。

浅谈护理专业的药理学教学现状

药理学是护理专业的一门必修课,笔者针对目前中医药院校护理学专业学习药理学存在的一些问题进行了分析,并提出相应的解决对策。

药理学教学中的耐受性和耐药性

药理学是中医药院校各专业学生普遍反映难度较大的一门必修课。针对药理学中较难的"耐受性"和"耐药性"两个概念,进行简要分析,以揭示如何掌握药理学的学习方法。

抗帕金森病药物的讲解

总结抗帕金森病药物中的一些教学经验,结合一些新颖的教学方法,针对如何讲好抗帕金森病药物的内容进行了探讨。

对中医药院校药理学教学的几点体会

药理学是一门基础必修课，内容繁琐，学生不易掌握。笔者结合自身教学经验，总结几点体会，并对怎样提高药理学教学效果进行了探讨。

夏枯草水提物抗抑郁作用研究

目的探讨夏枯草水提物的抗抑郁作用及可能机制。方法小鼠分为正常组,模型组,盐酸氟西汀(阳性对照药,0.02 g·kg^(-1))组,夏枯草水提物低、中、高剂量(2,4,8 g·kg^(-1))组,给药组连续8 d灌胃给药。末次给药1 h后,采用小鼠悬尾、强迫游泳以及自主活动试验对小鼠进行行为学观察,并采用ELISA法测定小鼠海马组织5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、脑源性神经营养因子(BDNF)、环氧合酶-2(COX-2)、前列腺素E_2(PGE_2)、白细胞介素-1β(IL^(-1)β)和白细胞介素-6(IL-6)的含量。结果各给药组与正常组比较,对小鼠自主活动无明显影响,差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,夏枯草水提物中、高剂量组能显著缩短小鼠悬尾和强迫游泳不动时间(P<0.001),增加小鼠海马组织中5-HT、NE、DA的含量(P<0.05,P<0.01),降低小鼠海马组织中COX-2、PGE_2、IL^(-1)β、IL-6的含量(P<0.01,P<0.001)。结论夏枯草水提物可能通过提高海马组织中单胺类神经递质的含量、降低炎症因子的含量来产生抗抑郁作用。

野菊花水提物抗抑郁作用的研究

目的观察野菊花水提物抗抑郁作用及可能机制。方法将小鼠分为正常组,模型组,氟西汀组(阳性对照药,0.02 g·kg-1),野菊花水提物低、中、高剂量(2、4、8 g·kg-1)组,连续8 d灌胃给药,每日1次。末次给药1 h后,采用强迫游泳、悬尾以及自主活动试验对小鼠进行行为学观察,并采用ELISA法测定小鼠海马组织5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、脑源性神经营养因子(BDNF)、环氧合酶-2(COX-2)、前列腺素E2(PGE2)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的含量。结果与正常组比较,各给药组对小鼠自主活动无明显影响,差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,野菊花水提物中、高剂量组能显著缩短小鼠悬尾和强迫游泳不动时间(P <0.001),增加小鼠海马组织中5-HT、NE、BDNF的含量(P <0.05),降低小鼠海马组织中COX-2、PGE2、IL-1β的含量(P <0.01,P <0.001)。结论野菊花水提物可能通过提高海马组织中单胺类神经递质和神经营养因子的含量、降低炎症因子的含量来产生抗抑郁作用。

NLRP3炎症小体泛素化调控的研究进展

由于能被多种类型的病原体或危险信号所激活,NLRP3(NOD-like receptor family pyrin domain-containing protein 3)炎症小体在多种疾病过程中都发挥了关键作用.作为炎症反应的核心,NLRP3炎症小体可能为各种炎症性疾病的治疗提供新的靶点.泛素化作为一种多功能翻译后修饰,在NLRP3介导的炎症免疫反应中起着关键的调节作用.通过对NLRP3炎症小体的组成、结构及功能,泛素化过程,泛素化与去泛素化对NLRP3炎症小体的正、负性调控的详细阐述,对NLRP3泛素化靶向治疗的前景与现状深入分析,为炎症性疾病的治疗提供新思路.

紫及纳米乳的药效学研究

目的:观察紫及纳米乳(ABN)的抗炎、镇痛、止血及促进伤口愈合作用。方法:以云南白药为阳性对照,将动物随机分为空白组(水或生理盐水)、YB组(云南白药溶液,小鼠给药剂量为0.065 g/kg,家兔给药剂量为0.023 3 g/kg)和ABN组(小鼠给药剂量为0.065 g/kg,家兔给药剂量为0.023 3 g/kg)。小鼠实验均为每组10只;家兔实验共9只,每只按伤口进行分组。采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验和蛋清致小鼠足趾肿胀实验考察ABN的抗炎作用;采用热板致小鼠足趾疼痛实验和醋酸致小鼠扭体反应实验考察ABN的镇痛作用;采用小鼠断尾止血实验考察ABN的止血作用;采用家兔促进皮肤伤口愈合实验考察ABN的促进伤口愈合作用。结果:与空白组比较,ABN能够显著减轻二甲苯致小鼠耳廓肿胀、蛋清致小鼠足趾肿胀(P<0.05);能够显著延长热板致小鼠足趾疼痛的痛阈值,减少醋酸致小鼠扭体反应次数(P<0.05);能够显著缩短小鼠断尾出血时间(P<0.05);能够加快家兔皮肤伤口愈合。上述作用大多与云南白药相当,甚至在抗炎和促进伤口愈合方面更优。结论:ABN具有良好的抗炎、镇痛、止血及促进伤口愈合作用。

重组猪α干扰素工程菌的诱导表达及产物纯化

为获得大量猪α干扰素的重组蛋白,研究了其发酵条件,并对目的蛋白进行分离纯化。考察了不同IPTG诱导浓度(0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.5mmol/L)、不同诱导温度(17、27、32、37℃)、不同诱导时间(0、2、3、4、5、6、7、8h)对目的蛋白表达的影响;同时对包涵体进行提取、溶解变性进行研究,最后采用Ni柱亲和层析纯化目的蛋白。采用SDS-PAGE电泳及Image Pro Plus6.0软件分析电泳结果,结果显示,IPTG诱导浓度为1.0mmol/L、诱导温度为27℃、诱导时间为6h时,目的蛋白表达量最多;超声波破碎细菌的最优时长循环为10s/10s;8mol/L尿素溶解包涵体过夜可得到大量可溶性目的蛋白含量,Ni柱亲和层析后可去除大量杂蛋白,获得较纯的目的蛋白。可见本试验通过优化重组猪α干扰素诱导表达条件及纯化方法,获得了高表达、高纯度的重组猪α干扰素蛋白,为今后研究其生物活性奠定了初步基础。

我院药房实习带教存在的问题与对策

目的:探讨医院药房实习带教出现的问题与解决方案。方法:分析医院药房实习带教中存在的问题,提出相应的对策。结果:药房实习存在的问题主要为带教药师专业理论匮乏、缺乏带教经验和责任心,实习学生实习目的不明确、工作不认真。解决方法,培养合格的带教药师,提高管理水平,建立良好师生的关系。结论:有必要提高带教药师专业水平,完善实习带教管理制度。