晶体膜蛋白2(MP19)的信号肽在蛋白成熟过程中未被切除

目的:探讨MP19的N端是否具有信号肽的功能,引导MP19到细胞膜,证实此信号肽在蛋白质的成熟过程中未被切除。方法:用MP19 cDNA做模板,通过PCR以获得距MP19 N端不同长度的核苷酸序列:1～25 bp、1～36 bp及1～64 bp。完整的cDNA及PCR所获得的不同片段的核苷酸分别克隆到四环素调控的哺乳类表达载体pcDNA4/TO,获得克隆MP19/EGFP、MP19—25/EGFP、MP19—36/EGFP及MP19-64/EGFP,确保插入的片段在EGFP的5’端。

1型糖尿病患者血浆microRNA-126变化与内皮功能的相关性

目的探讨1型糖尿病患者血浆microRNA-126表达水平的变化及其临床意义,并分析microRNA-126与内皮功能的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测47例1型糖尿病患者及50例健康对照组人群血浆microRNA-126的表达水平,酶联免疫吸附法检测人内皮型一氧化氮合酶(eNOS)含量,分析血浆microRNA-126表达水平与人内皮型一氧化氮合酶含量的相关性。结果与健康对照组相比,1型糖尿病组血浆microRNA-126表达水平明显下降(P<0.05),人内皮型一氧化氮合酶含量也明显下降(P<0.05)。相关分析显示血浆microRNA-126表达水平与人内皮型一氧化氮合酶含量呈明显正相关(P<0.05)。结论 1型糖尿病患者血浆microRNA-126水平呈低表达,而糖尿病患者常伴有内皮功能损伤,提示microRNA-126的下调可能与内皮损伤有关。microRNA-126可能通过介导内皮功能的损伤而参与1型糖尿病血管并发症的发生发展。

缬沙坦抑制非对称二甲基精氨酸诱导的内皮细胞LOX-1的表达

目的研究缬沙坦对非对称二甲基精氨酸(ADMA)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体1(LOX-1)mRNA和蛋白表达的影响,并探讨其机制。方法体外培养HUVEC,以不同浓度的缬沙坦和15μmol/L ADMA共同孵育24 h,DCFH-DA检测细胞内活性氧(ROS)生成量;RT-PCR测定NADPH氧化酶p22phox及LOX-1 mRNA的转录水平;酶联免疫吸附法检测细胞LOX-1蛋白的表达水平。结果与ADMA组相比,缬沙坦干预后细胞ROS水平显著下降(P<0.05),p22phox和LOX-1 mRNA转录水平及LOX-1蛋白的表达水平明显下调(P<0.05),并呈剂量依赖性。结论缬沙坦通过抑制p22phox的表达减少细胞内ROS水平,进而抑制ADMA诱导的内皮细胞LOX-1 mRNA转录和蛋白表达,这可能是其独立于降压作用的抗动脉粥样硬化作用的部分机制。

2个先天性肾上腺发育不良家系中DAX-1基因的新突变

目的:探讨2个X-连锁先天性肾上腺发育不良家系的临床特征,检测患者及其家属中是否存在DAX-1基因突变。方法:对2个家系中4例患者分别进行相关医学检查获取临床资料,并取得所有患者及其家系成员的外周血标本;提取全血基因组DNA,PCR扩增DAX-1基因的2个外显子,包括外显子和内含子边界,扩增产物经纯化后直接测序进行基因检测。测序结果在核苷酸序列数据库进行比较分析。结果:1个家系中的3例患者(均为青春期前发病)DAX-1基因第1外显子处均存在119-120insT半合子移码突变,家系中有2例女性为此突变的杂合子;另1个家系中的1例患者(青春期发病)DAX-1基因第1外显子处存在993delC半合子移码突变,家系中有3例女性为此突变的杂合子。结论:在2个中国先天性肾上腺发育不良家系中发现DAX-1新的移码突变119-120insT和993delC。

人亨廷顿相互作用蛋白14在1型糖尿病发病中的作用

目的:探讨人亨廷顿相互作用蛋白(Huntingtin interacting protein 14,HIP14)在1型糖尿病患者血浆中表达水平的变化,并分析其与胰岛功能的关系。方法:采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测1型糖尿病组中47例1型糖尿病患者及对照组50例健康人血浆HIP14含量,分析HIP14表达水平与空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)及胰岛β细胞功能指数(HOMA-IS)的相关性。结果:1型糖尿病组与健康对照组相比,血浆HIP14表达水平明显下降(P<0.05)。相关分析显示血浆HIP14表达水平与FBG无明显相关性,而与FINS及HOMA-IS呈明显正相关(P<0.05)。结论:1型糖尿病患者血浆中HIP14含量明显下降,HIP14表达下调可能与胰岛素的分泌受损及糖尿病的发生有关。

误诊为醛固酮瘤的特发性醛固酮增多症1例

患者,男,37岁,因＂血压高5年,间断乏力4年,右侧肾上腺切除术后血压高未缓解9个月＂为主诉于2010年9月入院。5年前剧烈运动后出现头晕、呕吐、一过性黑矇,无头痛、面色苍白、乏力、呼吸困难及视物旋转,休息后缓解,血压140/90 mmHg,诊断为＂高血压病＂,间断口服卡托普利（50 mg/次,3次/d）,

1例重度Graves病合并自身免疫性血小板减少性紫癜治疗体会

Graves病是临床常见的一种自身免疫性甲状腺疾病,易伴发其他自身免疫性疾病,其中自身免疫性血小板减少性紫癜（ITP）是由于机体产生抗血小板自身抗体而导致血小板在网状内皮系统中损害的疾病,与Graves病伴发时,血小板可轻度降低,可随Graves病的好转而恢复正常,但少数Graves病患者可出现血小板严重缺乏，病情凶险。本文从1例重度Graves病合并ITP出发，总结了Graves病合并ITP时的治疗方法及结合患者具体情况的方案选择，强调了在此类疾病治疗中统筹兼顾的重要性以及糖皮质激索在治疗自身免疫性疾病中的重要地位。

类风湿因子阳性干扰血TSH测定而误诊为原发性甲减一例分析

对1例类风湿因子抗体(RF-IgG)阳性同时伴促甲状腺激素(TSH)升高,按原发性甲减治疗后临床上出现了甲亢症状但血TSH仍很高的患者,进行临床和实验分析,以零TSH血清等倍稀释,观察其变化曲线。用蛋白质G琼脂糖树脂去除血清中IgG,并以缓冲液对未过柱等量血清进行同倍稀释,以排除过柱过程中缓冲液对测定的影响,比较过柱前后TSH水平,发现TSH明显降低,证明RF-IgG可造成TSH假性增高,并证实蛋白质G琼脂糖树脂可去除血清中RFIgG,消除该干扰。

暴发性1型糖尿病:一种不可忽视的重症糖尿病

暴发性1型糖尿病以起病急骤、代谢紊乱严重、胰酶升高并缺乏糖尿病相关抗体为特征。本文回顾分析我院收治的3例暴发性1型糖尿病的临床资料并结合文献与经典1型糖尿病进行对比复习,以提高对该病的认识。3例患者平均病程5.3天,入院平均血糖27.8mmol/L,平均糖化血红蛋白(HbA1C)6.8%,平均空腹C肽0.043ng/ml,平均餐后2hC肽0.04ng/ml,平均胰岛素使用剂量0.50U/(kg·d)。随访6个月HbA1C平均值为7.5%,胰岛β细胞功能无改善。暴发性1型糖尿病较经典1型糖尿病有更严重的胰岛素缺乏、代谢紊乱,更强烈的免疫反应,预后较差。

不同阶段糖尿病肾病患者的甲状腺功能比较

目的分析不同阶段糖尿病肾病(DKD)患者的甲状腺功能。方法选取2017年1月至2018年9月郑州大学第一附属医院收治的217例2型DKD患者,按照DKD的Mogensen分期标准,分为Ⅲ期组(123例)、Ⅳ期组(60例)、Ⅴ期组(34例)。选取同时期于该科住院的112例单纯糖尿病患者作为对照组。收集临床资料,分析DKD患者甲状腺功能的相关情况。结果Ⅳ期组和Ⅴ期组患者FT3水平低于对照组和Ⅲ期组,差异有统计学意义(P <0. 05)。Ⅳ期组和Ⅴ期组FT3比较、对照组和Ⅲ期组FT3比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。4组患者FT4、TSH比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。Ⅳ期组和Ⅴ期组患者病程较对照组和Ⅲ期组长,Ⅲ期组患者病程较对照组长,差异有统计学意义(P <0. 05)。Ⅳ期组和Ⅴ期组病程比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。Ⅴ期组24 h尿微量白蛋白水平高于Ⅳ期组、Ⅲ期、对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。Ⅳ期组和Ⅲ期组患者24 h尿微量白蛋白水平高于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。Ⅳ期组和Ⅲ期组24 h尿微量白蛋白水平比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。Ⅴ期组肌酐高于Ⅳ期组、Ⅲ期组和对照组,Ⅳ期组肌酐高于Ⅲ期组和对照组,差异有统计学意义(P <0. 05)。Ⅲ期组和对照组肌酐比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。Ⅳ期组和Ⅴ期组患者肾小球滤过率较对照组和Ⅲ期组高,差异有统计学意义(P <0. 05)。Ⅳ期组和Ⅴ期组肾小球滤过率比较、对照组和Ⅲ期组肾小球滤过率比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。FT3与肾小球滤过率呈正相关(r=0. 460,P <0. 05),与糖尿病病程、24 h尿微量白蛋白、肌酐呈负相关(r=-0. 359、-0. 365、-0. 260,P <0. 05)。FT4与糖尿病病程呈正相关(r=0. 120,P <0. 05)。TSH与肾小球滤过率呈负相关(r=-0. 126,P <0. 05)。结论随着DKD患者病情的进展,FT3逐渐下降,且在DKD晚期显著下降,甲状腺功能可作为监测DKD进展的指标。

循环miRNA-126在2型糖尿病患者中的表达变化及其相关性研究

目的探讨不同阶段T2DM患者循环miRNA-126水平变化及与内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及相关代谢指标的关系。方法采用RT-PCR检测血浆miRNA-126表达水平,ELISA测定eNOS水平,分析miRNA-126与eNOS及相关代谢指标的关系。结果 (1)与健康对照(NGT)组比较,miRNA-126在T2DM前期(Pre-T2DM)组、单纯T2DM(T2DM)组及T2DM合并大血管病变(T2DM+CVD)组中均下降(P<0.05)。(2)miRNA-126与LDL-C、DBP及eNOS呈正相关(r=0.224、0.164、0.661,P均<0.05),与FPG、HDL-C、HbA1c及年龄呈负相关(r=-0.293、-0.153、-0.258、-0.277,P均<0.05)。(3)多元逐步回归分析显示,FPG(β=-0.159,P<0.01)、年龄(β=-0.030,P<0.01)、LDL-C(β=0.208,P=0.037)、eNOS(β=0.353,P<0.01)是循环miRNA-126的影响因素。结论循环miRNA-126在不同阶段T2DM患者中均呈低表达,FPG、年龄、LDL-C及eNOS是影响miRNA-126的相关因素,推测miRNA-126可能受糖脂代谢的调控,其下调可能与血管内皮功能障碍有关。

一例精氨酸加压素受体2基因突变的先天性肾性尿崩症患者的临床及家系研究

报道1例精氨酸加压素受体2（arginine vasopressin receptor2，AVPRi2）基因突变导致的先天性肾性尿崩症。提取患者及家属的基因组DNA，PCR扩增AVPR2的全部外显子，扩增产物经纯化后行双向测序，测序结果与基因库中序列进行比对，找出突变位点，利用同源结构模型探讨突变点对AVPR2结构的影响。发现AVPR2基因第6036位核苷酸碱基T突变为G，导致基因产物的168位氨基酸由亮氨酸突变为精氨酸，该突变点尚未报道。患者母亲和姐姐基因为杂合子，父亲为正常基因型。

3种药物治疗Graves眼病疗效比较

目的比较糖皮质激素、环磷酰胺、奥曲肽治疗Graves眼病的临床效果。方法 Graves眼病患者110例,随机分为糖皮质激素治疗组45例、环磷酰胺治疗组35例、奥曲肽治疗组30例。糖皮质激素治疗组给予甲泼尼龙注射液250 mg/d静脉滴注,连续2周后改为口服强的松片(起始剂量30 mg/d,逐渐减量)连续10周。环磷酰胺治疗组给予环磷酰胺注射液0.2 g/次,静脉滴注,隔日1次;2周后改为0.4 g/次,每2周1次,连续10周。奥曲肽治疗组给予奥曲肽注射液肌内注射0.1 mg/次,1次/d;2周后调整为0.1 mg/次,每周3次,连续10周。比较3组治疗前、治疗12周后眼球突出度、平视睑裂高度及视力变化,比较治疗有效率并记录不良反应发生情况。结果糖皮质激素治疗组、环磷酰胺治疗组、奥曲肽治疗组治疗前与治疗12周后眼球突出度变化值[(1.289±0.783)、(1.301±0.825)、(1.299±0.629)mm]、视力变化值(0.089±0.012、0.092±0.016、0.088±0.021)、平视睑裂高度变化值[(0.738±0.379)、(0.784±0.299)、(0.759±0.472)mm]比较差异无统计学意义(P>0.05);环磷酰胺治疗组、糖皮质激素治疗组有效率(88.9%、88.6%)均高于奥曲肽治疗组(66.7%)(P<0.05),环磷酰胺治疗组与糖皮质激素治疗组比较差异无统计学意义(P>0.05);环磷酰胺治疗组、糖皮质激素治疗组甲状腺受体刺激性抗体阳性患者有效率(100.0%、95.5%)高于奥曲肽治疗组(61.1%)(P<0.05),环磷酰胺治疗组与糖皮质激素治疗组比较差异无统计学意义(P>0.05);糖皮质激素治疗组治疗过程中出现药物库欣综合征3例,胃部不适4例,股骨头坏死1例,停药后均有不同程度缓解,环磷酰胺治疗组、奥曲肽治疗组无明显不良反应发生。结论糖皮质激素、环磷酰胺治疗Graves眼病疗效较奥曲肽好,但糖皮质激素治疗过程中易发生不良反应,环磷酰胺是治疗Graves眼病的理想药物。

1例自身免疫性多内分泌腺病综合征Ⅰ型患者的临床及家系AIRE基因突变分析

收集1例自身免疫性多内分泌腺病综合征Ⅰ型患者的临床资料,应用PCR-DNA直接双向测序法对患者及其父母自身免疫调节因子(AIRE)基因的14个外显子进行突变筛查,同时选取50名无血缘关系的正常对照人群进行检测。并用生物学信息方法进行结构和功能预测。基因的序列分析结果显示患儿携带AIRE基因第5外显子的杂合突变,即c.622G>T(p.G208W)。经检索人类基因突变数据库和最新文献,此突变为新突变。50名无血缘关系的正常对照人群未检测到该突变。AIRE基因中的新发突变[c.622G>T(p.G208W)]可能在本例患者的发病机制中扮演着重要角色。

地塞米松影响肝细胞糖代谢机制及吡格列酮干预作用的研究

目的研究地塞米松(DEX)在细胞水平对肝脏糖代谢和胰岛素的生物效应的影响,并观察吡格列酮(PGZ)在该过程中的干预作用。方法体外培养HepG2细胞,加入DEX作用不同的时间,GOD-POD法测上清葡萄糖浓度来确定影响细胞葡萄糖消耗量(GC)最明显的DEX作用时间,并观察PGZ在该条件下对细胞GC、糖原合成、糖异生及糖酵解过程的干预作用。结果 1μmol/L DEX作用36h时细胞GC下降最明显,作用48h时出现IR。PGZ组细胞糖原合成、糖异生指标较DEX组差异均有统计学意义(P均<0.05),糖酵解指标差异无统计学意义(P>0.05),但在胰岛素存在时,PGZ和胰岛素在促进葡萄糖合成和酵解、抑制糖异生等糖代谢的各个环节均发挥协同作用(P<0.05)。结论 DEX作用于肝细胞使其葡萄糖摄取能力及IS下降。PGZ通过糖代谢的多种途径发挥干预作用,其中主要通过糖原合成和糖异生,为临床上类固醇性糖尿病的治疗提供了分子基础。

Gitelman综合征34例临床分析

目的总结Gitelman综合征(GS)的临床特点,以提高对GS的认识。方法对2008年至2018年在郑州大学第一附属医院就诊的34例GS患者的临床资料进行回顾性分析。结果所有患者均存在低血钾、低尿钙,76.5%(26/34)的患者存在低血镁,23.5%(8/34)的患者血镁正常;88.2%(30/34)的患者血压正常,11.8%(4/34)的患者存在血压增高。10例患者甲状旁腺功能低下,血镁与甲状旁腺激素(PTH)之间呈显著正相关(P<0.05)。11例患者存在高血糖,9例患者存在甲状腺异常。7例患者行基因检测,新发现4种突变。结论低镁可能是部分患者出现甲状旁腺功能减退的原因。即使有高血压或者血镁正常,也不能排除GS的可能。

17β-羟类固醇脱氢酶3型缺陷症一例

分析1例17β-羟类固醇脱氢酶3型缺陷症患者的临床资料及HSD17B3基因序列变化。患儿2岁11个月,抚养性别女性,因"双侧腹股沟包块"就诊,幼女外阴,阴蒂肥大,睾酮与雄烯二酮比值经绒毛膜促性腺激素(hCG)兴奋后逐渐降低,染色体核型46 XY,彩色超声检查未探及子宫、卵巢。父母及弟弟表型正常。HSD17B3基因测序显示患者携带2号外显子c.201A>G(p.Glu67Asp)及9号外显子c.625T>C(p.Ser209Pro)的复合杂合突变,父亲携带9号外显子c.625T>C杂合突变,母亲携带2号外显子c.201A>G杂合突变,弟弟无突变。

不同糖耐量人群血浆分泌型卷曲相关蛋白4水平与糖脂代谢、胰岛功能的相关研究

目的探讨不同糖耐量人群血浆分泌型卷曲相关蛋白4（secreted frizzled-related protein4，SFRP4）水平与糖脂代谢和胰岛功能的关系。方法采用EusA法测定60例糖尿病前期患者（pre-diabetes组）、80例初发2型糖尿病患者（T2DM组）及80例健康对照者（NC组）血浆SFRP4水平，用单因素方差分析法比较上述各组SFRP4水平，分析血浆SFRP4水平与相关代谢指标的关系，采用多元逐步回归法找出影响SFRP4水平的主要因素。结果T2DM组血浆SFRP4水平均高于pre-diabetes组和NC组，且pre-diabetes组高于NC组（P均〈0．05）；相关性研究显示SFRP4与糖化血红蛋白呈正相关（P〈0．01），而与空腹胰岛素（Fins）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）呈负相关（P〈0．05）；多元逐步回归分析显示HOMA-IR是影响血浆SFRP4水平的独立因素（β=一2．019，P〈0．05）。结论循环SFRP4在糖尿病前期、初发2型糖尿病患者中呈高表达，对预测12DM的发生有重要意义。