MecI基因缺失在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中的检测情况

金黄色葡萄球菌（staphylococcus aureus）是人类一种重要的病原菌,可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎,甚至败血症、脓毒症等全身感染. 但随着耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的不断出现,金黄色葡萄球菌引起感染的治疗成为临床一个重大的难题. MRSA主要的耐药机制是因为获得了外源性的耐药基因MecA.MecA基因的表达受多种因素的影响,其中MecI基因为负性调节因子,其产物可以抑制MecA基因的表达. 在临床分离的MRSA中往往会出现MecI基因的缺失、碱基的置换、插入、丢失等突变,使MecI基因不能正常表达,从而解除了对MecA基因表达的抑制作用[1],表现为对甲氧西林的耐药.本文通过分析MRSA中MecI基因检测情况, 初步探讨山西地区MRSA主要流行的耐药分子机制.

土地戈登菌引起腹膜透析相关性腹膜炎1例

土地戈登菌（Gordonia terrae）是一种革兰阳性杆菌,生长缓慢,弱抗酸染色阳性。最初从土壤中分离,在临床上引起感染较少见,但对于免疫力低下者有致病风险[1-3]。本研究报道1例腹膜透析相关性腹膜炎患者,腹透液经培养、鉴定,病原菌最终确定为土地戈登菌。1病历摘要患者,男,52岁。2013年2月诊断为尿毒症,采取血液透析及腹膜透析治疗。患有慢性阻塞性肺病、高血压3级、

炎症性肠病动物模型的研究进展

炎症性肠病(IBD)包括溃疡性结肠炎和克罗恩病,发病较多,临床迄今尚无彻底治愈方法,患病率国内外均呈上升趋势。动物模型对研究IBD机制,筛选药物有重要意义。本文结合IBD发病的微生态学改变和免疫紊乱特征,对国内IBD造模方法进行综述,为最终建立符合人类IBD发病机理和临床表现的新型动物模型打基础。

深海不完整声道下反转点会聚区研究

近期南海远程声传播实验数据的处理分析表明在深海不完整声道中声道轴以下存在一种会聚区,该会聚区相比于海面附近的上反转点会聚区在远距离处具有更高的会聚增益.本文利用射线简正波理论确定了水中反转型焦散线和海面反射型焦散线位置,对比发现实验中观测到的深海大深度会聚区位置与水中反转型焦散线位置一致,证明该会聚区是由大量简正波同相叠加形成的下反转点会聚区,其在深海声道轴以下的一定深度范围内都具有会聚效应,研究了该会聚区的形成条件以及声源深度变化对会聚区焦散结构的影响,对比了远距离处上下反转点会聚区的传播损失以及会聚区宽度,分析表明第七个下反转点会聚区的会聚增益仍不小于10 dB,研究了声速垂直结构变化对下反转点会聚区的影响,理论分析结果与实验数据吻合较好.

2017-2020年某院临床分离耐碳青霉烯阴沟肠杆菌检测及分析

目的通过研究本院近3年耐碳青霉烯阴沟肠杆菌,探讨其临床分布及相关耐药基因分布情况。方法收集2017年1月至2020年9月山西白求恩医院分离的33株耐碳青霉烯阴沟肠杆菌为研究对象,利用全自动快速生物质谱检测系统(美国Bruker,MicroflexLT/SH)进行细菌鉴定,VITEK2-Compact全自动微生物分析系统进行细菌药敏试验。采用改良碳青霉烯灭活试验进行耐药表型筛选。采用PCR方法检测碳青霉烯酶基因(bla_(IMP)、bla_(KPC)、bla_(NDM)、bla_(VIM)和bla_(OXA-48))。对所有菌株进行MLST分型和同源性分析。质粒接合转移实验研究耐药质粒的传播。结果22株阴沟肠杆菌对厄他培南、亚胺培南、美罗培南均耐药,11株仅对厄他培南耐药。其中16株阴沟肠杆菌产_(NDM)-1,4株产_(NDM)-5,2株产IPM-1,1株菌同时产_(NDM)-1和_(KPC)-2。11株仅对厄他培南耐药阴沟肠杆菌中有两株检出bla_(NDM)-1、两株检出bla_(KPC)-2基因。MLST分型主要流行株为ST418型。质粒接合转移实验有14株转移成功。结论本院耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌从2017年逐年增加,2020年出现暴发流行。携带的碳青霉烯酶基因以bla_(NDM)为主,ST418型菌株占多数。耐药基因可通过质粒水平传播,所以加强临床耐药菌株筛检及控制对临床抗感染治疗作用关键。

山西省阳泉地区产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌基因分布与耐药性的研究

目的了解山西省阳泉地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药性及基因型分布特点。方法采用BD Phoenix 100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,聚合酶链反应检测β-内酰胺类耐药相关基因,包括TEM、SHV、CTX-M-1群、CTX-M-9群、OXA-1和MOXF-Amp C酶。结果 54株产ESBLs大肠埃希菌呈现多重耐药,在23种抗生素中,对亚胺培南、美洛培南、阿米卡星、哌拉西林-他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率分别为3.7%、3.7%、9.26%、12.96%和14.81%,其余18种抗生素的耐药率为22.2%~100.0%。54株产ESBLs大肠埃希菌携带的β-内酰胺酶基因TEM、CTX-M-1群、CTX-M-9群和OXA-1的检出率分别为100.0%、37.0%、98.1%和14.9%,仅有1株检出产SHV型ESBLs;检出MOXF-Amp C酶基因15株,阳性率为27.8%。菌株同时产2种以上基因达98.1%。结论阳泉地区产ESBLs大肠埃希菌多重耐药严重,携带的β-内酰胺酶基因以TEM+CTX-M-9为主,且大多菌株同时产两种以上基因。

山西大医院金黄色葡萄球菌SCCmec型别分析

目的:分析耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药特点。方法:采用Vitek-2 compact和Micro2flex TM MALDITOF MS对实验菌株进行鉴定和药物敏感试验;采用纸片法和最低抑菌浓度(MIC)法对实验菌株进行MRSA初筛和确证试验;采用基因扩增法对MRSA进行mec A基因扩增及SCCmec基因分型。结果:65株初筛阳性的MRSA菌株,经PCR基因扩增后全部携带mec A基因。5种型别SCCmec分型结果:SCCmecⅠ(产物大小613bp)无阳性;SCCmecⅡ(产物大小398bp)阳性菌株7株:标本号分别为20、27、29、31、33、52、53;SCCmecⅢ(产物大小280bp)阳性菌株16株:标本号分别为1、2、7、8、10、12、19、23、26、30、32、34、38、41、47、54;SCCmec IVa(产物大小776bp)阳性菌株1株:标本号为20。SCCmecⅣb型(产物大小493bp)、SCCmecⅣc(产物大小200bp)、SCCmecⅣd(产物大小881bp)和SCCmec V(产物大小325bp)扩增后均无阳性菌株。结论:65株MRSA均表现为多重耐药,其中对青霉素、苯唑西林和头孢西丁全部耐药;对万古霉素和利奈唑胺全部敏感。65株MRSA全部携带mec A基因。SCCmec基因型以SCCmecⅢ型为主,其次是SCCmecⅡ型和SCCmecⅣa型。

山西省2015—2022年某医院血流感染耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌检测及分析

目的 通过研究山西白求恩医院2015年1月—2022年1月血流感染患者血培养分离耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌,总结其流行病学和分子生物学特点。方法 收集山西白求恩医院2015年1月—2022年1月血流感染患者血培养分离肺炎克雷伯菌为研究对象,进行细菌鉴定,药敏试验、改良碳青霉烯灭活试验筛选耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌。对所有菌株进行二代测序并分析,其中2株拉丝实验阳性耐碳青霉烯高毒力肺炎克雷伯菌进行全基因组测序。结果 山西白求恩医院2015年1月—2022年1月血流感染患者血培养分离肺炎克雷伯菌共431株,耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌共33株,其中耐碳青霉烯高毒力肺炎克雷伯菌11株,其中拉丝实验阳性2株。所有菌株对厄他培南、亚胺培南均耐药,仅1株对美罗培南中介。33株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌中26株产KPC-2、4株产NDM-1;有3株双酶型耐碳青霉烯高毒力肺炎克雷伯菌(KPC-2/NDM-9、KPC-2/OXA-1、NDM-1/OXA-1);4株未检测到碳青霉烯耐药基因。二代测序后进化分析结果显示33株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌主要序列类型(sequence types, ST)型别为ST11、ST147、ST412,主要血清型为KL64、KL47、KL25。质粒接合转移实验有18株转移成功。2株拉丝实验阳性菌株经全基因组测序发现携带毒力质粒和耐药质粒。结论 本院血流感染患者检出耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌从2015年逐年增加,2021年出现暴发流行。携带的碳青霉烯酶基因以KPC-2为主,ST11/KL64型菌株占多数。进一步加强临床耐药菌株筛检及控制对临床抗感染治疗作用关键。

多药耐药鲍氏不动杆菌耐药性与β-内酰胺酶相关基因的研究

目的研究多药耐药鲍氏不动杆菌（MDRAB）的耐药性及其β-内酰胺酶相关基因,分析其对β-内酰胺类抗菌药物的耐药机制,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法收集山西大医院2013年9月-2014年3月临床感染性疾病患者的标本,应用VITEK-2鉴定所分离的菌株,并进行药物敏感性分析试验;采用K-B纸片扩散法检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,同时筛选产AmpC酶菌;应用PCR及序列分析的方法分析β-内酰胺酶基因。结果鉴定获取55株鲍氏不动杆菌,其中41株为MDRAB,其对β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂（氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦）的耐药率为87.8%~90.2%,对其余β-内酰胺类、氨基糖苷类和氟喹诺酮类抗菌药物的耐药率在85.4%~100.0%;41株MDRAB中27株检出ESBLs检出率为65.9%,30株筛查出AmpC酶检出率为73.2%;产ESBLs菌株中检出TEM基因25株,检出率为92.6%,产AmpC酶菌株中检出ampC基因8株,检出率为26.7%。结论山西大医院分离到的鲍氏不动杆菌具有多药耐药性,对β-内酰胺类药物的耐药性与TEM和ampC基因关系密切。

分离胶真空采血管离心法直接鉴定血培养阳性标本的研究

目的：探讨利用分离胶真空采血管离心法和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）直接鉴定血培养阳性标本的可能性。方法收集2015年7～12月非重复血培养阳性标本共计216例，将阳性血培养瓶中肉汤用分离胶真空采血管离心富集细菌，反复洗涤2次后高速离心沉淀细菌，采用MALDI-TOF MS 对沉淀的细菌进行鉴定，同时按照传统方法将阳性标本传种、涂片，待次日对菌落进行鉴定。对比分离胶真空采血管离心后直接鉴定与经培养菌落的鉴定结果。结果216例血培养阳性标本均为单一菌种血流感染，经涂片革兰染色其中革兰阳性菌89例、革兰阴性菌119例、真菌8例，经分离胶真空采血管离心后直接鉴定到种190例，其中革兰阳性菌67例、革兰阴性菌111例、厌氧菌4例、真菌8例，与传统培养方法相比符合率为87．9％，其中革兰阳性菌符合率78．8％，革兰阴性菌符合率93．2％，厌氧菌符合率100．0％，真菌符合率100．0％。结论利用分离胶真空采血管的方法可以在短时间内（＜30 min）分离富集细菌，进一步经 MALDI-TOF MS 鉴定使得血培养阳性标本的鉴定时间大大缩短，有利于临床血流感染的快速诊断、治疗。

广泛耐药肺炎克雷伯菌耐药表型分析及耐药机制研究

目的研究广泛耐药肺炎克雷伯菌(XDRKP)耐药表型特点及相关耐药机制。方法收集山西白求恩医院2018年1月至2020年12月内分离的3201株肺炎克雷伯菌并根据已有药敏结果筛选116株广泛耐药肺炎克雷伯菌纳入研究。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)及梅里埃VITEK-compact 2进行菌株鉴定及药敏试验,药敏结果K-B法或微量肉汤稀释法复核。改良碳青霉烯酶灭活试验(mCIM)联合乙二胺四乙酸协同碳青霉烯酶灭活试验(eCIM)检测XDRKP碳青霉烯酶表型,并与碳青霉烯酶基因扩增结果比对。聚合酶链反应(PCR)扩增耐药基因:碳青霉烯酶基因(blaKPC、blaNDM、blaVIM、blaIMP、blaOXA);氨基糖苷耐药基因:16S rRNA甲基化酶基因(rmtA、rmtC、rmtD、rmtG、rmtH、armA、npmA、rmtB、rmtE、rmtF),氨基聚糖苷修饰酶基因变体[aac(6′)-Ib-cr];喹诺酮耐药基因:DNA解旋酶保护蛋白qnr家族基因(qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrS),外排泵蛋白基因(oqxAB、qepA),氨基聚糖苷修饰酶基因变体[aac(6′)-Ib-cr];替加环素耐药Tet蛋白基因[外排泵蛋白基因:tet(A)和tet(L)],核糖体保护蛋白基因[tet(M)],替加环素修饰酶基因[tet(X)]。对照分析各XDRKP耐药表型与相应耐药基因携带情况间的关系。结果共收集到XDRKP 116株。头孢菌素类及喹诺酮类抗菌药物耐药率100%(116/116),碳青霉烯类抗菌药物耐药率99.14%(115/116),氨基糖苷类抗菌药物庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星耐药率分别为95.69%(111/116)、94.83%(110/116)、88.79%(103/116),磺胺类抗菌药物耐药(44/116)与替加环素耐药(3/116)检出率较低。mCIM联合eCIM试验结果与碳青霉烯酶基因扩增结果一致率95.65%(110/115)。各耐药基因阳性率:blaKPC 90.52%(105/116),blaNDM 10.34%(12/116),rmtB 81.90%(95/116),armA 2.59%(3/116),oxqAB 65.52%(76/116),qnrB 6.03%(7/116)、qnrS 12.93%(15/116)、aac(6′)-Ib-cr 7.76%(9/116),tet(A)21.55%(25/116)。其余各耐药基因未检出。匹配分析发现,共有65株XDRKP耐药表型与耐药基因型不匹配,即抗菌药物耐药表型不能用携带相应耐药基因来解释。结论XDRKP中各类耐药基因的广泛分布和某些基因[如aac(6′)-Ib-cr、oqxAB]的多重耐药作用是广泛耐药产生的潜在原因。不同菌株针对同一类抗菌药物可能携带一种或多种耐药基因。此外,部分菌株耐药表型与耐药基因不匹配,提示耐药基因的表达调控及存在其他耐药机制也与XDR的产生有关。

糖尿病足患者感染孔兹创伤球菌一例

孔兹创伤球菌是一种兼性厌氧菌,最初被认为是人类皮肤、特别是下肢的正常菌。孔兹创伤球菌引起的人类感染较少见,只有少数病例报道。然而,随着糖尿病、肿瘤等慢性疾病及处于免疫力低下的患者增多,这种微生物已被认为是一种条件致病菌,甚至可以导致严重感染。本文报道1例由孔兹创伤球菌引起的严重糖尿病足感染,最终抗感染治疗成功的患者。

产NDM-1耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌筛查研究

目的对本院2013年1月-2014年12月临床分离耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌进行blaNDM-1基因筛查,初探本院blaNDM-1基因携带阳性菌存在现状。方法采用MALDI-TOF质谱检测系统对所有菌株进行鉴定,用VITEK-2全自动微生物分析仪检测菌株的MIC值,筛选其中耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌,用改良Hodge试验进行表型确认,同时对试验菌株的blaNDM-1基因应用PCR方法进行筛检,其中阳性株外送进行PCR产物基因测序,测序结果进行BLAST比对。结果 14株耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌分别是8株肺炎克雷伯菌,6株大肠埃希菌。14株菌中有5株对替加环素敏感,9株对替加环素中介。仅从1株来自患者腹水标本中分离的肺炎克雷伯菌中检出blaNDM-1基因,基因序列同源性为99%。结论本次从肠杆菌科肺炎克雷伯菌中检出blaNDM-1基因,应为山西省首次报道,警示院感等相关部门应重视并加强对blaNDM-1基因携带菌的监测与筛查。

耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌21株实验室检测与分析

碳青霉烯类抗生素广泛应用于治疗多重耐药细菌引起的严重感染,如革兰氏阴性细菌,尤其是产生高水平AmpC酶或ESBLs的菌株.过去的十几年间,耐碳青霉烯的非发酵菌较为普遍,而耐碳青霉烯的肠杆菌科相对少见.但最近几年,耐碳青霉烯的肠杆菌科细菌正在增加.耐碳青霉烯肠杆菌科细菌的耐药机制最常见的是产生能够水解碳青霉烯类抗生素的碳青霉烯酶.本研究通过筛选本院临床分离的耐碳青霉烯肠杆菌科细菌,进行表型检测方法的研究、产酶基因型的分析及产酶菌株的多序列位点分析.通过研究分析掌握本院的碳青霉烯耐药情况并比较临床实验室检测碳青霉烯酶的方法.

2015年临床分离菌株分布及耐药性分析

目的了解本院临床分离菌株的分布及耐药性。方法采用抗菌药物MIC和纸片扩散法药敏试验。参照CLSI2014年版标准判读药敏结果,用WHONET 5.6软件进行总结分析。结果 2014年11月-2015年11月共收集非重复临床分离菌株4 998株,革兰阴性菌3 378株,占67.6%;革兰阳性菌1 620株,占32.4%。居前5位的细菌依次为大肠埃希菌(22.3%)、肺炎克雷伯菌(13.2%)、鲍曼不动杆菌(9.5%)、铜绿假单胞菌(7.2%)、金黄色葡萄球菌(7.1%)。肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为<3%、<20%、<50%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检出率为12.4%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌占81.1%,未检出耐万古霉素和耐利奈唑胺的菌株。检出耐万古霉素粪肠球菌1株,屎肠球菌3株。结论山西大医院临床分离菌株以革兰阴性杆菌为主,与全国耐药监测数据相符,耐药情况不容忽视。

缺血修饰白蛋白、核因子κB及神经元特异性烯醇化酶水平与高血压脑出血预后的关系

目的探讨血清缺血修饰白蛋白(IMA)、核因子κB(NF-κB)及神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平与高血压脑出血(HICH)患者预后的关系。方法选取2018年1月至2020年1月山西白求恩医院神经内科收治的120例HICH患者为HICH组,男65例,女55例,年龄(66.93±7.31)岁,年龄范围为42~81岁。根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将HICH组患者分为预后良好组与预后不良组,NIHSS评分4~13分为预后良好组(n=89),NIHSS评分14~18分为预后不良组(n=31)。另选取同期健康体检者120名为健康组,男68名,女52名,年龄(66.96±7.11)岁,年龄范围为38~83岁。分析两组纳入者的IMA、NF-κB及NSE水平,HICH组患者的IMA、NF-κB及NSE水平,不良预后与IMA、NF-κB及NSE水平的相关性,HICH组患者联合诊断效能分析。结果HICH组患者的IMA[(88.23±2.33)U/ml]、NF-κB[(1.11±0.12)ng/L]及NSE水平[(26.31±2.44)μg/L]显著高于健康组[(67.27±2.22)U/ml、(0.55±0.04)ng/L、(9.29±2.22)μg/L],差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良组患者的IMA[(97.99±2.42)U/ml]、NF-κB[(1.26±0.14)ng/L]及NSE水平[(29.44±2.87)μg/L]显著高于预后良好组患者[(82.15±2.13)U/ml、(0.87±0.12)ng/L、(22.21±2.57)μg/L],差异有统计学意义(P<0.05)。通过相关性分析,HICH患者的不良预后与患者的IMA、NF-κB及NSE水平呈正相关,联合检测的诊断灵敏度(89.29%)显著高于每项单独检测(56.36%、54.55%、52.00%),通过受试者工作特征曲线分析,对于HICH患者,IMA、NF-κB及NSE的临界值分别为96.33 U/ml,1.23 ng/L,29.32μg/L。结论血清IMA、NF-κB及NSE水平与HICH患者预后呈正相关,可作为HICH患者不良预后的重要依据。