反义Ku70在人肺癌细胞的表达及对放射线的敏感性研究

目的 :研究反义Ku70在人肺癌细胞的表达及对放射线的超敏效应。方法 :采用Western boltting法证明 ,Ku70 LCA中Ku70蛋白的表达情况 ,采用体外放射线敏感实验证明 ,反义Ku70在人肺癌细胞的表达及对放射线的超敏效应 ,其结果以细胞存活克隆率和剂量效应曲线表示。结果 :(1)对照组和导入正义Ku70基因的LCA组细胞可见Ku70蛋白表达印迹 ,导入反义Ku70基因LCA组细胞未见Ku70蛋白表达印迹。 (2 )导入反义Ku70基因的LCA组细胞对放射线的敏感性明显增强 (P <0 0 1) ,并呈剂量依赖性。结论 :反义Ku70封闭了肿瘤细胞的正义Ku70蛋白表达后 ,对放射线呈超敏效应 ,为提高肿瘤放疗的特异性和靶向基因治疗奠定了基础。

反义Ku80在人肺癌细胞的表达及对放射线的敏感性研究

目的 :研究反义Ku80在人肺癌细胞的表达及对放射线的超敏效应。方法 :采用Western blotting法证明 ,Ku80 LCA中Ku80蛋白的表达情况 ,采用体外放射线敏感实验证明 ,反义Ku80在人肺癌细胞的表达及对放射线的超敏效应 ,用细胞存活克隆率和剂量效应曲线表示。结果 :(1)对照组和导入正义Ku80的LCA细胞可见Ku80蛋白表达印迹 ,导入反义Ku80的LCA细胞未见Ku80蛋白表达印迹。 (2 )导入反义Ku80的LCA细胞对放射线的敏感性明显增强 (P <0 0 1) ,并呈剂量依赖性。结论 :反义Ku80封闭了肿瘤细胞的Ku80蛋白表达后 ,对放射线呈超敏效应 ,为提高肿瘤放疗的特异性和靶向基因治疗奠定了基础。

Ku70基因导入人肺癌细胞后的表达及意义

目的 :研究Ku70基因导入人肺癌细胞 (LCA)后的表达及意义。方法 :构建重组的正义和反义Ku70基因表达质粒载体分别导入LCA细胞。结果 :用Northern印迹杂交法证明Ku70正义、反义基因均可在LCA的mRNA中得到表达 ,用West ern blotting法去证明细胞中只有导入正义Ku70基因的蛋白表达 ,而导入反义Ku70基因的人肺癌细胞 ,无正义Ku70蛋白表达 ,结论 :正义Ku70基因的表达可以调节DNA的修复 ,反义Ku70基因的表达可以增强肿瘤细胞对放射线照射的敏感性。

Ku80分子克隆在人肺癌细胞的表达及生物学意义

目的：研究Ku80基因分子克隆在人肺癌细胞的表达及生物学意义。方法；用分子克隆的方法构建重组的正义、反义Ku80基因表达质粒，导入人肺癌细胞后，用Northem－blotting法和Western－blotting法证明Ku80正义、反义基因在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果：（l）正义或反义Ku80克隆阳性的LCA细胞在mRNA水平均有正义或反义Ku80的表达印迹。（2）仅在正义Ku80克隆阳性的LCA细胞有正义Ku80蛋白表达印迹；而反义Ku80克隆阳性的LCA细胞无Ku80蛋白表达印迹。结论：正义或反义Ku80基因的分子克隆可在人肺癌细胞的mRNA得到表达，正义Ku80克隆阳性的LCA细胞有正义Ku80蛋白表达，反义Ku80基因可封闭肿瘤细胞的正义Ku80蛋白的表达。此结论为将Ku基因作为肿瘤靶向基因治疗提供了实验依据。