大肠杆菌野生株K_(99)菌毛蛋白结构基因的克隆与序列分析

根据产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)K99菌毛蛋白的全基因序列设计产肠毒素大肠杆菌主要菌毛K99的一对引物。PCR扩增K99菌毛蛋白的全基因序列大小为546bp。将PCR扩增的目的片断克隆于pMD18-T载体、pET-32a载体中,分别转化大肠杆菌,经酶切鉴定、PCR鉴定及DNA序列分析,筛选出阳性克隆。经过序列比对,所克隆的外源基因与报道的K99菌毛蛋白结构基因序列同源性达99.3%。成功克隆分离到的产肠毒素大肠杆菌菌毛的K99基因,为当地产肠毒素性大肠杆菌病疫苗的选择及基因疫苗的研制提供了坚实的理论基础,为产肠毒素性大肠杆菌病检测、预防及基因工程疫苗的研制开辟新的途径。

奶牛曼氏杆菌与大肠杆菌混合感染病原分离鉴定

大肠埃希菌（E．coli）是一切温血动物肠道后段常在菌，部分菌株具有致病性或者条件致病性，引起肠道疾病或者肠道外感染。溶血性曼氏杆菌（Mannheimia haemolytica）原为巴氏杆菌属中的溶血性巴氏杆菌（Pasteurella haemolytica），共有17个血清型，目前其中的11个划归溶血性曼氏杆菌，是反刍动物牛、绵羊的肺炎和新生羔羊急性败血症的病原菌。

黑龙江大庆地区禽流感流行病学调查

为了了解禽流感病毒在黑龙江大庆地区禽类中的流行情况,我们在大庆地区五区四县采集了1180份样品,采用常规鸡胚尿囊腔接种方法分离病毒,利用微量血凝试验(HA)及RT-PCR鉴定。结果在大庆地区所采集的样品,未检测出有血凝活性;而在绥化地区采集样品中检测出3株禽流感病毒。虽然大庆地区未检测出禽流感病毒,但在周边的绥化地区检测出禽流感病毒,大庆市有被禽流感传染的威胁,提示应加强对禽流感的预防。

产肠毒素大肠杆菌k88ac基因原核融合表达载体的构建

利用PCR技术扩增出菌毛K88ac基因片段,并将其插入到原核表达载体pET32a(+)的多克隆位点上。测序结果表明:与Genbank中序列比对同源性达到99%以上,成功构建了原核表达载体。为进一步的研究工作,奠定了基础。