重组改构人TNF-α联合顺铂对人胶质瘤U251细胞的生长抑制作用

目的:观察重组改构人肿瘤坏死因子α(rmhTNF-α)联合顺铂(CDDP)对人胶质瘤细胞生长的抑制作用。方法:人胶质瘤U-251细胞分为对照组(不加药);T组:加入rmhTNF-α(20μg/L);C组:加入CDDP(2mg/L);T+C组:加入rmhTNF-α(20μg/L)及CDDP(2mg/L)。MTT法检测细胞生长抑制率,用流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期变化情况,用免疫组织化学方法检测细胞PCNA、Bcl-2、P170蛋白的表达情况。结果:T组、C组细胞生长抑制率、细胞凋亡率均高于对照组(P<0.05),T+C组细胞生长抑制率、细胞凋亡率均高于其他各组(P<0.05)。T组PCNA-LI、Bcl-2蛋白表达低于对照组(P<0.05),T+C组PCNA-LI、Bcl-2蛋白表达均明显低于其他各组(P<0.05),对照组、T组及T+C组P170蛋白表达低于C组(P<0.05)。结论:rmhTNF-α能抑制人胶质瘤细胞生长,其机制与诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖活性有关,且rmhTNF-α与CDDP联用有协同增效作用。

腰穿置管持续引流在治疗后颅窝术后并发症中的应用

目的:探讨腰穿置管持续引流在治疗后颅窝术后并发症中的应用。方法:对24例后颅窝术后出现发热、头痛、皮下积液、脑脊液漏的患者采用腰穿置管持续引流,观察疗效。结果:21例患者发热症状均得到不同程度控制,15例头痛患者症状缓解,7例后枕皮下积液及3例脑脊液漏均痊愈。无1例出现严重并发症。结论:腰穿置管持续引流对于后颅窝术后并发症有较好的疗效,值得临床推广应用。

腰穿脑脊液持续引流治疗颅脑术后颅内感染

目的探讨颅脑术后颅内感染的治疗方法,以提高疗效。方法回顾性总结分析我院近期颅脑术后颅内感染的28例患者,均在全身应用抗生素的基础上采用腰穿脑脊液持续引流进行治疗。结果28例颅内感染病人中发生神经根刺激症状6例,引流管不通畅2例,低颅内压1例,颅内感染加重1例,均很快得到控制并成功治愈,无一例因感染死亡。结论腰穿脑脊液持续引流显著降低了脑脊液内细菌浓度,并降低颅压,还可以动态观察脑脊液外观,随时取脑脊液进行检查,指导临床治疗,促进脑脊液漏愈合,预防脑积水形成,是治疗颅内感染的一种安全、简便易行、迅速有效的方法。

经额角穿刺行脑室腹腔分流术的疗效观察

目的探讨脑室腹腔分流术的较好分流方法。方法本组自2003年1月至2006年6月共收治脑积水患者91例，分别经额角和三角区穿刺行脑室腹腔分流术，两组年龄、术前脑室大小、颅内压力等因素经检验具有均衡性，一次手术成功率、术后并发症发生率、住院天数对比有可比性。结果额角穿刺行脑室腹腔分流术的一次手术成功率85．4％，术后并发症发生率20．1％，优于三角区穿刺行脑室腹腔分流术的一次手术成功率65．1％，术后并发症发生率41．8％。结论额角穿刺行脑室腹腔分流术减少了分流管梗阻及颅内出血的发生率，手术操作安全简单，明显优于三角区穿刺脑室腹腔分流术。额角穿刺行脑室腹腔分流术应作为脑积水手术的首选。

脑胶质瘤中SLC5A8和TMS1/ASC基因启动子区甲基化及mRNA表达的研究

目的研究肿瘤抑制基因SLC5A8和 TMS1/ASC 在胶质瘤中的启动子区甲基化和mRNA 表达情况,探讨其与临床情况之间的关系。方法通过甲基化聚合酶链反应(MSP)检测SLC5A8和 TMS1/ASC 基因在88例胶质瘤组织、10例正常脑组织及胶质瘤细胞株 U251和 SHG-44中的 DNA 甲基化情况;通过传统逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时定量 PCR 检测 SLC5A8和TMS1/ASC 的 mRNA 表达情况;检测去甲基化试剂5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-CdR)作用于细胞株后,对基因 DNA 甲基化和 mRNA 表达的影响。结果在88例胶质瘤中,SLC5A8启动子区的甲基化发生率为70.45%(62/88),其甲基化率随胶质瘤恶性程度的增加而增高;TMS1/ASC 启动子区的甲基化发生率为51/88(57.95%),其甲基化率随胶质瘤恶性程度的增加而降低。10例正常脑组织中均未检测到 SLC5A8和 TMS1/ASC 基因的甲基化。在各级别胶质瘤中 SLC5A8和 TMS1/ASC 的 mRNA 与正常脑组织相比均表达下凋,差异均有统计学意义(均 P<0.05)。在 U251和 SHG-44胶质瘤细胞株中均检测到 SLC5A8和 TMS1/ASC 基因的甲基化,去甲基化试剂5-Aza-CdR 均能重新激活 SLC5A8和TMS1/ASC 基因的表达。结论 SLC5A8和 TMS1/ASC 基因在胶质瘤中的启动子区甲基化导致其mRNA 表达下调,其甲基化的发生率及 mRNA 表达与胶质瘤的恶性程度密切相关。

Nestin及Musashi-1蛋白在人脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义

目的观察Nestin、Musashi-1蛋白在脑胶质瘤组织中的表达，探讨其与人脑胶质瘤发生及进展的关系。方法50例人腑胶质瘤标本，应用免疫组织化学染色法检测Nestin、Musashi-1蛋白的表达。结果50例胶质瘤标本中Nestin、Musashi-1蛋白的表达率分别为76％和68％，Nestin和Musashi-1蛋白存腩胶质瘤组织中的表达呈正相关。Nestin、Musashi-1蛋白在低恶性组和高恶性组脑胶质瘤阳性表达率分别为60．9％（14／23）、88．9％（24／27）；52．2％（12／23）、81．5％（22／27），以上两组间阳性率差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论Nestin、Musashi—1蛋白的表达增高可能与脑胶质瘤的发生、发展有关，其表达还可能与脑胶质瘤的预后有关。

肿瘤侵袭相关基因EMP3、PCDH-γ-A11在脑胶质瘤中的表达研究

目的探讨肿瘤侵袭相关基因EMP3和PCDH-γ-A11的mRNA在原发人脑胶质瘤组织中的表达情况,分析其表达变化与胶质瘤恶性程度的关系。方法分别应用传统的RT-PCR和SYBR Green实时定量PCR检测方法检测EMP3和PCDH-γ-A11基因mRNA在30例原发胶质瘤(WHO分级:Ⅱ级10例,Ⅲ级10例,Ⅳ级10例)和10例正常脑组织中的表达情况。统计学分析两个基因在胶质瘤和正常脑组织间的表达差异,并进一步结合临床资料分析不同分级、不同性别和不同年龄组间的表达差异。结果在各级别胶质瘤中EMP3和PCDH-γ-A11的mRNA与正常脑组织相比均表达下调,并具有显著意义(P<0.01);EMP3在Ⅱ级和Ⅳ级及Ⅲ级和Ⅳ级胶质瘤间的表达也存在统计学差异(P<0.05);PCDH-γ-A11在Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ级胶质瘤相互之间的表达无统计学差异(P>0.05)。结论各级别胶质瘤中EMP3和PCDH-γ-A11的mRNA表达均显著低于正常脑组织,并随胶质瘤恶性程度的增加表达量逐渐降低。EMP3基因的表达下调与胶质瘤的恶性程度密切相关。

下调Nestin基因表达抑制胶质瘤细胞增殖活性的研究

目的利用小干扰RNA（siRNA）技术沉默Nestin基因，观察其逆转胶质瘤细胞恶性表型的效果。方法设计靶向Nestin基因的siRNA片段，利用脂质体转染人U251胶质瘤细胞株，逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫组织化学法检测Nestin基因和蛋白的表达，噻唑蓝（MTF）比色法检测细胞增殖，Transwell实验检测细胞的迁移能力，软琼脂实验检测细胞的恶性增殖能力。结果转染siRNA基因片段的U251胶质瘤细胞株基因表达水平（U251细胞为0．83±0．16、U251／vect细胞为0．81±0．23、U251／S3为0．20±0．11）和蛋白表达水平（U251细胞为157．73±4．12、U251／vect细胞为153．34±5．27、U251／S3为112．20±3．16）显著下降（P〈0．05），MTT实验显示siRNA干扰后U251胶质瘤细胞株体外增殖速度减慢、细胞侵袭能力及软琼脂集落形成能力均显著降低（P〈0．01）。结论Nestin基因表达下调可抑制胶质瘤细胞株U251的侵袭及增殖能力。