雷帕霉素对糖尿病大鼠肾脏病变和VEGF及其受体表达的影响

目的研究雷帕霉素对糖尿病大鼠早期肾脏病变的影响,探讨血管内皮生长因子(VEGF)在糖尿病肾病发病中的作用。方法SD大鼠经链脲佐菌素(STZ,65mg/kg)一次性腹腔注射建立糖尿病模型。建模成功后分为雷帕霉素治疗组(建模后12周开始用雷帕霉素治疗4周,n=9)、血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)受体拮抗剂L-158809治疗组(阳性对照组,建模后12周开始用L-158809治疗4周,n=5)和糖尿病肾病组(建模12周后用等量蒸馏水灌胃4周,n=9),以未建模SD大鼠作为正常对照组(n=9)。采集各组大鼠血、尿样本和肾脏组织标本,观察和分析各组大鼠肾小球结构和功能的改变;Western blotting和免疫组织化学法检测肾脏组织VEGF及其受体VEGFR2的表达。结果与正常对照组比较,糖尿病肾病组大鼠24h尿白蛋白增加、内生肌酐清除率升高、肾小球体积增大、肾小球基膜增厚,两组间比较差异均有统计学意义(P<0.01)。与糖尿病肾病组比较,雷帕霉素治疗组和阳性对照组大鼠24h尿白蛋白较少,且肾小球体积增大和基膜增厚均不明显。大鼠肾脏组织VEGF和VEGFR2表达,糖尿病肾病组明显高于正常对照组(P<0.01),雷帕霉素治疗组和阳性对照组显著低于糖尿病肾病组(P<0.01)。结论雷帕霉素具有减少糖尿病肾病大鼠蛋白尿和缓解肾小球肥大和基膜增厚的作用。抑制肾脏组织VEGF和VEGFR2蛋白表达可能是雷帕霉素延缓糖尿病肾病发病的可能机制之一。

雷帕霉素对PAN肾病小鼠肾脏病变和VEGF及受体表达的影响

目的探讨雷帕霉素对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)肾病模型小鼠肾脏病变和肾小球VEGF及受体(VEGFR)表达的影响。方法 24只BALB/c小鼠随机分为PAN组(单次尾静脉注射PAN造模,n=8)、雷帕霉素干预组(单次尾静脉注射PAN造模+雷帕霉素干预,n=8)和对照组(单次尾静脉注射PBS,n=8)。各组动物留取24 h尿液,BCA蛋白定量试剂盒测定24 h尿蛋白排泄量。于造模后第10天处死动物取肾脏制备肾组织标本,透射电子显微镜观察各组肾小球足突结构改变;分别采用Real-timePCR、Western blotting和免疫组织化学方法检测各组肾组织VEGF、VEGFR1、VEGFR2 mRNA以及VEGF、VEGFR2蛋白表达。结果 24 h尿蛋白排泄量为PAN组>雷帕霉素干预组>对照组,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。电子显微镜观察发现PAN组肾小球上皮细胞足突广泛融合。各组肾组织VEGF、VEGFR1、VEGFR2 mRNA及蛋白表达为PAN组>雷帕霉素干预组>对照组(P<0.05),且各组VEGF、VEGFR1、VEGFR2 mRNA及VEGF蛋白表达与24 h尿蛋白排泄量呈正相关(P<0.05)。结论雷帕霉素能减轻PAN肾病小鼠蛋白尿的程度,作用机制可能与下调肾小球VEGF及其受体基因表达有关。

尿sCD_(146)与慢性肾脏病的关系及其临床意义的探讨

目的:探讨尿sCD146水平在慢性肾脏病(CKD)中的意义及其与肾功能相关指标的关系。方法:入选105例CKD患者,CKD1期28例,CKD2期27例,CKD3期16例,CKD4期14例,CKD5期20例,(非透析患者)。设健康对照组20例。采用ELISA法检测尿sCD146水平。分析尿sCD146在CKD各期中的变化及其与肾功能相关指标的关系。结果:CKD1～5期患者尿sCD146水平均较对照组升高。各组CKD患者尿sCD146水平[CKD1(139.53±7.69)ng/ml,CKD2(156.02±15.37)ng/ml,CKD3(174.87±2.55)ng/ml,CKD4(190.66±8.01)ng/ml,CKD5(211.76±22.99)ng/ml],均显著高于对照组(128.09±4.05)ng/ml。尿sCD146水平随着CKD1～5期进展升高,P<0.05。CKD3～5期患者超敏C-反应蛋白(hs-CRP)较对照组升高、且随着CKD的进展进行性升高(P<0.05)。相关分析显示尿sCD146与血sCD146、Scr、BUN、β2-MG、CysC、hs-CRP水平呈正相关(r分别为:0.697,0.699,0.871,0.755,0.524、0.414),与eGFR、Hb、Alb呈负相关(r分别为:-0.787,-0.601,-0.298)。结论:尿sCD146与肾功能水平密切相关,可能反映早期肾功能的损伤及严重程度,并与CKD患者机体的炎症状态相关。外周血、尿液中有sCD146的异常表达,可能参与了肾脏损伤的免疫机制,能否作为检测CKD患者早期肾功能损伤新的敏感性标志物,仍需要更多样本的临床研究证实。