不同蛋白酶海参酶解液的制备及其体外免疫调节活性

以海参体壁为原料,采用5种商业用酶(中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶)对其进行酶解,测定酶解液的水解度和分子量分布,并重点分析分子量小于3 kDa超滤组分的氨基酸组成、结构特性及其对巨噬细胞的免疫调节活性。结果表明:中性蛋白酶对海参体壁的水解能力最高,反应300 min水解度达17.18%;中性蛋白酶酶解液中小于3 k Da超滤组分(SCH-N-I)占96.33%,必需氨基酸高达89.52 mg/g,高于其余4种蛋白酶酶解液。紫外光谱和荧光光谱结果显示,中性蛋白酶酶解液超滤组分SCH-N-I较其它酶解液超滤组分具有较高的表面疏水性、紫外吸光度和内源荧光强度,且最大紫外吸收波长和最大荧光峰向高波长方向偏移,表明其可能具有更高的免疫生物活性。RAW264.7巨噬细胞免疫活性实验结果显示,当SCH-N-I浓度为200μg/mL时,巨噬细胞表现出良好的存活率[(121.79±4.98)%]及较高的吞噬力(0.1077±0.0010)和NO释放量[(15.39±0.33)μmol/L];SCH-N-I的免疫活性高于其他4种蛋白酶酶解液超滤组分。

响应面法优化秋刀鱼酶解制备抗氧化活性肽的工艺

采用酶解法从秋刀鱼肌肉中提取抗氧化活性肽,以水解度(DH)、TCA-可溶性肽含量、DPPH自由基清除率、Fe^(3+)还原力、·OH清除率以及O_(2)^(-)·清除率为指标,从六种商业用酶中(中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰蛋白酶)筛选出最适蛋白酶。以料液比、酶添加量、酶解时间、温度、pH五个因素进行单因素实验,选取影响酶解显著的三个因素进行响应面优化。并对最优条件下的酶解液进行分子量分布的测定和游离氨基酸含量的测定。结果显示:最适蛋白酶为中性蛋白酶。三因素对酶解液抗氧化活性的影响大小为料液比>酶添加量>酶解时间,秋刀鱼抗氧化活性肽的最佳制备工艺为料液比为1:2.67(质量体积比,g/mL)、酶添加量为0.60%、酶解时间为4.04 h、温度为50℃、pH7.0,在此条件下制得的酶解液DPPH自由基清除率为92.33%,Fe^(3+)还原力为0.711(20 mg/mL),与预测值无显著性差异(P>0.05)。可见,采用响应面法优化酶解工艺制备的秋刀鱼抗氧化活性肽具有较高的抗氧化活性。最佳酶解工艺条件下制得的酶解液中,分子量<3000 Da的组分占97.87%。共检测出16种游离氨基酸,其中必需氨基酸占总氨基酸含量的39.79%,抗氧化活性氨基酸占总氨基酸含量的37.01%。本文为秋刀鱼的高值化利用和多肽类功能性食品的开发提供了一定的参考。

碱法破壁-酶法提取葡萄酒废酵母细胞壁多糖的工艺研究

以工业发酵产生的葡萄酒废酵母泥为材料,过筛法除去葡萄果皮、果籽等杂质后,以细胞破壁液蛋白质含量、多糖提取率为评价指标,通过单因素试验和正交试验对碱法破壁-酶法提取细胞壁多糖工艺进行优化,以期提高多糖提取率。结果表明,最佳工艺条件为细胞破壁碱(KOH)处理温度为60℃,碱(KOH)质量浓度为70 g/L,处理时间为1.5 h,80 kHz超声辅助;酶法提取多糖最佳工艺为酶作用温度50℃,酶解时间1.5 h,中性蛋白酶添加量0.3%,初始p H值7.0。在此优化条件下,葡萄酒废酵母多糖提取率为21.08%。

废酵母药用成分的开发利用

酿酒产生的废酵母具有很高的附加价值，如用来生产食品添加剂、饲料、保健品、原料药等，在食品、化工、饲料、制药等行业有广泛地应用。本文对废酵母在医药行业的应用进行综述，为酵母的综合开发利用提供思路。