兔外周血间充质干细胞的分离培养及诱导分化

目的研究间充质干细胞(MSCs)在创伤修复中的作用并为MSCs作为组织工程种子细胞奠定实验基础。方法抽取创伤后兔外周血,用密度梯度离心法分离纯化单个核细胞;α-MEM培养基培养,并测定细胞生长曲线;应用成骨和成软骨诱导剂定向诱导,检测分化能力。结果原代培养的MSCs呈圆形、梭形、多角形,传代纯化后呈均一的长梭形。其生长曲线均呈典型的"S"形。外周血MSCs成骨诱导后7d碱性磷酸酶染色阳性;21d出现钙沉积,茜素红染色呈阳性。成软骨诱导2周后Ⅱ胶原免疫细胞化学染色阳性。结论皮肤损伤刺激后可从外周血中获取MSCs,体外分离培养的MSCs具备向成骨及成软骨细胞分化特性;可用于组织工程种子细胞的研究。

两种方法保存人体透明软骨行异种移植的实验研究

目的 探讨不同方法保存的人体透明软骨 ,异种移植后软骨存活的动态变化及在整形外科应用的可行性。 方法 选择 4 8只新西兰种成年白兔 ,随机分为两组 ,每组 2 4只 ,分别接受 - 198℃液氮冷冻和 75 %酒精灭活法保存的人体透明软骨移植 ,观察一年。术后每 3个月比较两组血清IgG、IgM、IgA、C3、C4 、PFB(补体B因子 )含量 ,每月随机抽取两组各两只兔子取移植软骨块观察其外形、色泽 ,测重量。比较光学显微镜和透射电镜下的组织学变化。 结果 两实验组各时间点IgG、IgM、IgA、C3、C4 、PFB含量与术前相比无显著性差异 ,P >0 0 5。深低温保存法软骨移植后 1- 2个月内重量略有增加 ,3个月重量开始减少 ,至 1年达最低点。光学显微镜下观察 ,2个月可见新生不成熟软骨细胞。 3个月时软骨开始出现退行性变 ,至 6个月时明显加重。酒精灭活移植软骨重量无明显变化 ,仅在 6个月时开始出现轻度退行性变。透射电镜下观察的变化规律基本与光学显微镜下的观察结果相一致。结论酒精灭活法保存的人体透明软骨用于异种移植后 ,外型变化小 ,提示其临床应用可行性优于液氮冷冻保存法。

少女巨乳并发纤维腺瘤1例

目的总结分析少年女性巨乳症并发纤维腺瘤的治疗经验。方法回顾分析13岁少女巨乳一例,术前完善化验及乳房超声、核磁共振等检查,术中行水平双蒂巨乳整形术,术中病理为纤维腺瘤,去除瘤组织,乳头蒂折叠后固定在解剖位置,随访3年。结果整形术后外形尚可,随访发现纤维腺瘤反复发作3次。结论发展迅速的少年巨乳有并发肿瘤的可能,应该按照肿瘤原则彻底手术。

环保型缓蚀剂在化工机械设备腐蚀防护中的应用

研究了一种基于丁香籽水提取物的环保型绿色缓蚀剂,分析了其在1 mol·L^(-1)HCl溶液中对低碳钢表面的缓蚀作用。通过电化学以及表面形态学实验,考察了丁香籽水提取物的缓蚀性。使用交流阻抗法和极化法探测了该缓蚀剂电化学特性。通过扫描电子显微镜(SEM)和接触角测试,表征了未接触缓蚀剂和接触缓蚀剂金属试样的表面形貌。交流阻抗分析揭示了使用800 mg·L^(-1)丁香籽提取物,在金属浸泡2.5 h后,具有显著的缓蚀度(93%),归因于缓蚀剂在低碳钢表面的吸附。根据极化试验结果,腐蚀抑制发生在阴阳极反应。SEM结果表明,800 mg·L^(-1)丁香籽提取物引入腐蚀介质可以有效保持钢表面的光滑。通过拟合Langmuir吸附等温线,验证了单层吸附模型。因此,丁香籽提取物分子与钢表面反应,在钢表面覆盖一层单分子层,从而达到良好的缓蚀效果。

兔外周血间充质干细胞的体外分离培养及诱导成骨

背景:研究证明外周血中存在间充质干细胞,但含量极少。目的:拟从兔外周血中提取间充质干细胞,并诱导其向成骨细胞分化。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-06/12在山东省立医院中心实验室完成。材料:新西兰大白兔6只,购自山东省农科院。α-MEM培养基、L-DMEM培养基为Hyclone公司产品。方法:每隔2d从兔背部不同部位切去3cm×3cm的全层皮肤(保留背部肌层),所切皮肤做原位移植后包扎,每只兔连续创伤4次。分别于创伤前及末次创伤1周后从股静脉取外周血,采用密度梯度离心法获取间充质干细胞,设立2组,分别加入含体积分数为10%胎牛血清的α-MEM培养基或L-DMEM培养基。细胞传至第2代以1×105/cm2密度接种于12孔板,加入含成骨诱导剂的H-DMEM培养液进行成骨诱导。主要观察指标:创伤前后细胞形态观察,成纤维样细胞集落形成率,成骨诱导效果。结果:创伤前所获得的细胞首次换液后,未见有梭形细胞贴壁;创伤后所获得的细胞接种24h即可见有短梭形及多角形细胞贴壁,五六天后出现细胞集落。与L-DMEM培养基组比较,α-MEM培养基组外周血成纤维样细胞集落形成率明显升高(P<0.05)。外周血间充质干细胞成骨诱导后,呈梭形、三角形或多角形,有突起,可见两三个核仁和细胞分裂相,增殖速度缓慢,诱导7d后碱性磷酸酶阳性率达80%以上,诱导21d后茜素红染色形成钙结节。结论:皮肤损伤刺激后可成功从兔外周血中获取间充质干细胞,且具备成骨分化特性,α-MEM培养基较L-DMEM培养基更适合外周血间充质干细胞的体外生长。

脱细胞基质软骨支架的制备

背景:脱细胞基质材料去除了天然材料中的细胞成分,保留了基质成分,有效降低了天然材料的免疫原性,同时能够保持材料的机械强度。目的:拟利用洗脱方法去除兔肋软骨中的细胞基质,制备天然生物支架材料。方法:取新西兰大白兔肋软骨,清除周围组织后随机分组处理,以未经处理的肋软骨作为正常对照组;48 h处理组以去污剂-酶化学消化48 h;96 h处理组以去污剂-酶化学消化96 h,3组均通过苏木精-伊红染色及电镜观察脱细胞效果。同时收集诱导第7天的兔骨髓间充质干细胞3×109 L-1,与同种异体肋软骨脱细胞基质体外复合培养,于第3,7天取复合物行电镜观察细胞在脱细胞基质表面的黏附生长情况。结果与结论:新鲜肋软骨标本每个软骨陷窝内均有排列紧密的二三个软骨细胞,去污剂-酶化学消化后软骨陷窝内的细胞逐渐脱失,至消化处理96 h后,软骨陷窝内的细胞完全脱失。共培养第3天时,脱细胞基质表面有大量骨髓间充质干细胞分布,细胞为多角形,有伪足伸出,锚定在基质表面,部分区域可见细胞在基质表面增殖分裂;第7天时,脱细胞基质表面大部分均为细胞覆盖,细胞呈扁平状,有多个足突充分伸展,细胞之间互相连接,分泌大量细胞外基质沉积在基质表面,呈冰霜样改变,表明制备的脱细胞基质具有良好的细胞相容性。

CHIMEHERB人工皮治疗烧伤临床总结

用青岛海洋大学生物材料研究所研制、海威生物材料有限公司生产的CHIMEHERB人工皮治疗烧伤50例.其中用于切、削痂创面10例,Ⅲ°创面20例,肉芽创面12例,供皮区创面3例.削痂创面一次覆盖面积最大23％,切痂创面13％.人工皮下可移植点状小皮片,亦可移植微粒皮,是一种较好的覆盖创面的生物材料.治疗浅Ⅱ°烧伤可使创面愈合时间提前2～4d(天);用于深Ⅱ°创面愈合时间为19～21d.人工皮治疗Ⅱ°创面,最大贴敷面积为60％.它对烧伤肉芽创面有促进周围上皮生长加速创面愈合的作用.

体外诱导兔骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究

目的探讨兔骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)在特定培养条件下向软骨细胞定向分化的情况。方法密度梯度离心法分离兔BMSCs,在体外培养扩增后用含有骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)-2的条件培养液诱导其在体外单层培养模式下向软骨细胞分化。采用甲苯胺蓝染色、Masson染色、免疫组织化学染色、阿利新蓝比色法测定糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)的含量检测BMSCs分化情况。统计学分析比较第24、、7代(P2、P4、P7)BMSCs诱导后增殖能力及向软骨细胞分化能力的变化。结果定向诱导后BMSCs表现出软骨细胞的特性。P2、P4间的细胞增殖能力和成软骨细胞分化能力比较差异无统计学意义(P>0.05);P7与P2、P4相比,细胞增殖能力和成软骨细胞分化能力均降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论BMP-2能诱导兔BMSCs在体外单层培养模式下向软骨细胞分化;细胞传代对BMSCs向软骨细胞分化有重要影响。

负压封闭引流技术治疗小儿大腿鞭炮爆炸伤一例

爆炸伤指由于爆炸形成的人体损伤，分化学悱爆炸和物邢性爆炸两类。最近笔者利用负压封闭引流手术（vaccumsealing drainage，VSD）成功治疗小儿筚使炮蝶炸伤患者1例，效果良好，现报道如下。

倍频Nd:YAG激光治疗酒渣鼻疗效观察

目的 :研究激光治疗酒渣鼻的临床疗效。方法 :采用倍频 Nd:YAG( VPW5 3 2 nm)激光治疗酒渣鼻。 结果 :此方法治疗酒渣鼻治愈率 80 %。 结论 :倍频 Nd:YAG( VPW5 3 2 nm)激光是治疗酒渣鼻的有效方法之一。

兔肋软骨脱细胞基质的制备

背景:研究表明新西兰兔软骨组织可作为组织工程支架材料,其中关节软骨及耳软骨的脱细胞基质的研究较多,但采用肋软骨作为组织工程软骨支架的研究较少。目的:制备新西兰兔肋软骨脱细胞基质,探讨天然软骨支架作为组织工程支架的可行性。方法:用联合去垢剂-酶法获得软骨支架,根据脱细胞过程中TritonX-100第2次处理时间0,24,48,96h分为4组。脱细胞完毕后各组支架固定行扫描电镜采集图像观察计算支架孔隙率、孔径长度,并对支架进行苏木精-伊红染色、甲苯胺蓝及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,并将脱细胞支架植入异体新西兰兔皮下观察其相容性。结果与结论:兔肋软骨脱细胞基质呈乳白色,大小均一,染色示支架结构完整,仍保存大量酸性黏多糖及Ⅱ型胶原成分,扫描电镜观察经一定时间的脱细胞处理后可得到结构完整,孔隙均匀的天然软骨支架,其孔隙率为(61.31±8.45)%;孔径长度为(32.80±5.15)μm,符合正态性分布,各组脱细胞支架植入异体新西兰兔皮下7d后生物相容性良好,周围软组织无明显充血、化脓等炎症排斥反应出现。结果显示,兔肋软骨脱细胞支架具有良好的基质组成,有较完整、均匀的孔隙结构及孔径分布,可作为组织工程支架材料。

薄脂肪全厚皮片移植的临床应用

自1983年以来,我们应用带薄脂肪层的全厚皮片进行皮肤移植,收到满意的效果。现报告如下。一、临床资料共施行带薄脂肪层全厚皮片移植20例,男9例,女11例,年龄2～69岁。因灼伤后疤痕挛缩手术整复者13例,因血管痣等皮肤疾患整容修复手术者7例。

高氧液对特重烧伤休克期患者肾功能的保护作用

目的探讨高氧液对特重烧伤休克期肾功能的保护作用。方法30例大面积烧伤患者随机分成两组，A高氧液组（15人）和B对照组（15人），分别输入高氧液和平衡盐水液，观察两组休克期第1、2个24h的总尿量及平均尿量，检测其伤后24、48h的尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）。采用放射免疫分析法分别测定伤后24、48h血浆TNF—α和IL-6含量。结果与对照组比较。治疗组第1、2个24h尿量均明显增加；（P均〈0．01）。烧伤休克期A组各时相点血浆TNF—α、IL-6水平显著低于B组。（P〈0．01）。结论大面积烧伤病人早期复苏中静脉应用高氧液可明显减轻全身性炎症反应，对严重烧伤休克期患者的肾功能有保护作用。

新课程目标下提高少数民族初中数学教学质量的分析

在义务教育阶段,初中数学至关重要.众所周知,初中数学课本具有较强的抽象性和逻辑性,身处少数民族地区的学生,因汉语能力不突出,所以其对大多数知识都不是很理解.同时,少数民族地区大多处在边缘地带,经济水平不高,学生整体的基础不是很好,致使整体的教学较为滞后,亟待解决.为此,本文关于初中数学教学质量问题的研究具有重要意义.

天然气集输管道内腐蚀特点及防腐措施研究

天然气水合物阻塞及其腐蚀是油气输送管道中的两个主要问题。研究了可作为天然气水合物抑制剂和缓蚀剂的水溶性聚氨酯(JAZ)。使用蓝宝石摇摆池(RCS6)评估了JAZ的水合物抑制能力;采用失重法、开路电位和动电位极化法测试了其防腐活性。结果表明:丁基衍生物(乙基丁基和甲基丁基组合)在质量分数0.25%时显示出优于商业缓蚀剂聚(N-乙烯基己内酰胺)的防腐性,而部分替换PEG 400与1,2-丁二醇降低了防腐活性。重量法和电化学测量证实,JAZ可以显著抑制CO_(2)饱和的蒸馏水和油田产水中的低碳钢腐蚀。乙基丁基和甲基丁基衍生物(不含1,2-丁二醇)质量分数0.25%时几乎实现了完全的腐蚀抑制(96%和98%)。JAZ可以在CO_(2)饱和环境中抑制天然气水合物形成,同时防止低碳钢腐蚀。

超声相控阵角度偏转能力的仿真测试与分析

角度偏转及扇形扫描是超声相控阵区别于常规超声的重要特征,其相关技术广泛应用于实际检测中。在参考ASTM E 2491-08标准案例的基础上,分别运用CVIA仿真与实验的方法测试超声相控阵角度偏转能力,分析与总结影响超声相控阵角度偏转能力的因素,为超声相控阵实际检测中相关工艺参数的选择提供相应参考。