建立一种离子交换色谱法测定牛初乳中乳铁蛋白质量浓度的方法。采用cm-sepharose fast flow预装柱5mL,配置质量浓度为10、20、30、40、50、60、70、80μg·mL^(-1)的标准乳铁蛋白溶进行液色谱分离,pH值为7.0,浓度为0.02mol·L^(...建立一种离子交换色谱法测定牛初乳中乳铁蛋白质量浓度的方法。采用cm-sepharose fast flow预装柱5mL,配置质量浓度为10、20、30、40、50、60、70、80μg·mL^(-1)的标准乳铁蛋白溶进行液色谱分离,pH值为7.0,浓度为0.02mol·L^(-1)的磷酸盐溶液为起始缓冲液,进样量为1mL,流速1mL·min-1,浓度为1 mol·L^(-1) NaCl溶液洗脱,检测波长475 nm。回归方程:Y=1.277 4x+16.727 0,R^(2)=0.999,线性范围为10~80μg·mL^(-1),平均加标回收率为96.56%。此方法在分离牛初乳中的乳铁蛋白同时,又可以测定乳铁蛋白的含量,方便,快捷,结果准确可靠,重现性好。展开更多
以新鲜牛初乳为原料,对阳离子交换色谱法分离牛初乳中乳铁蛋白的工艺条件进行优化。本试验采用阳离子交换色谱CM-Sepharose fast flow分离牛初乳中的乳铁蛋白,研究了起始缓冲液pH、洗脱速度、洗脱液浓度以及上样速度对乳铁蛋白得率的影...以新鲜牛初乳为原料,对阳离子交换色谱法分离牛初乳中乳铁蛋白的工艺条件进行优化。本试验采用阳离子交换色谱CM-Sepharose fast flow分离牛初乳中的乳铁蛋白,研究了起始缓冲液pH、洗脱速度、洗脱液浓度以及上样速度对乳铁蛋白得率的影响,并通过四因素三水平的响应面分析法优化了阳离子交换色谱法的分离工艺。结果表明,乳铁蛋白最佳分离条件为起始缓冲液pH 7.03,洗脱速度1.01 mL·min^(-1),洗脱液浓度1.01 mol·mL^(-1),上样速度0.82 mL·min^(-1)。在上述条件下,乳铁蛋白的得率为84.43%,与模型高度拟合。此方法操作简单,方便快捷,准确可靠,重现性好。展开更多