血清4型禽腺病毒广西分离株GX2019-010全基因组测序与分析

为了解广西地区血清4型禽腺病毒(FAdV-4)的基因特征,本研究对实验室前期分离的一株FAdV-4(命名为GX2019-010)进行了全基因组测序,对所获核苷酸序列进行同源性比对和遗传进化分析,并进一步分析了主要结构蛋白Hexon、Penton和Fiber的氨基酸序列。结果显示,GX2019-010全长43719 bp,GC含量为54.9%,主要包括43个潜在蛋白质编码区域。核苷酸序列同源性比对发现,GX2019-010与致病株MX-SHP95的同源性为95.8%,与非致病株ON1和KR5同源性分别为95.0%和95.2%。遗传进化分析显示,GX2019-010与中国FAdV-4近几年的流行毒株在同一分支,而与国外FAdV-4毒株不在同一分支,说明FAdV-4存在遗传差异,主要的差异存在于基因组的右端,国内分离株均出现1966 bp的缺失,其中包括ORF19、ORF48和ORF27基因的缺失,说明中国流行的FAdV-4具有地域性。对主要结构蛋白Hexon、Penton和Fiber的氨基酸序列分析发现,3个主要结构蛋白均有氨基酸位点的突变,其中Fiber-2的突变位点最多。本研究丰富了广西地区FAdV-4的基因库,为今后心包积液-肝炎综合征(HHS)的防控及流行病学调查研究提供了参考依据。

一株血清4型禽腺病毒的分离鉴定及分析

为探究血清4型禽腺病毒(FAdV-4)的遗传变异情况,对广西某鸡场疑似该病的病料进行鸡胚接种、PCR扩增和hexon基因测序,分离鉴定出1株广西FAdV-4,并对其进行全基因组测序。该毒株基因组全长43722 bp,包括44个开放阅读框,与国内18株FAdV-4和国外4株FAdV-4代表毒株核苷酸同源性分别为99.8%~100%和94.8%~95.7%。Hexon和penton基因与FAdV-4核苷酸同源性为98.6%~100%,与国外毒株相比存在氨基酸的突变;fiber基因与FAdV-4核苷酸同源性为94.8%~100%,与国外毒株相比,除了存在氨基酸的突变,还有插入和缺失,fiber-2比fiber-1突变较多。研究结果为广西FAdV-4的遗传进化情况提供了参考资料。

血清4型禽腺病毒感染SPF鸡体内各组织中病毒的动态分布及排毒规律

为探究血清4型禽腺病毒(FAdV-4)感染SPF鸡后体内各组织中病毒的动态分布及排毒规律,将FAdV-4人工感染3周龄SPF鸡,在感染后不同时间点采集11种组织器官,RT-PCR检测病毒的动态分布,同时定期检测感染鸡的呼吸道和泄殖腔的排毒情况。结果显示,SPF鸡感染后1~21 d胸肌、肝脏、心脏、脾脏、肺脏、腺胃、胰腺、法氏囊、肾脏、胸腺和脑均能够连续检测到病毒,但不同组织器官中病毒载量存在差异,肝脏的病毒载量要高于其他组织器官,表明该病毒主要的靶器官是肝脏。感染后1~21 d呼吸道和泄殖腔能够连续检测到病毒,表明感染的SPF鸡可以通过呼吸道和泄殖腔排毒。感染后SPF鸡的组织器官病毒载量的变化规律和排毒规律具有一定的平行关系,都是先增后减,在感染后5~6 d达到最大值。本试验系统研究FAdV-4感染SPF鸡体内各组织病毒载量的分布以及排毒情况的动态变化规律,为今后深入研究FAdV-4对SPF鸡的致病性和致病机制奠定基础。

血清4型禽腺病毒广西分离株人工感染SPF鸡的病理学观察

为深入研究血清4型禽腺病毒广西分离株的致病机理,对4周龄的SPF鸡人工感染血清4型禽腺病毒(FAdV-4),建立病理模型,在感染后第1~21天随机剖杀试验组的SPF鸡,采集心脏、肝、脾、肺、肾、胸腺、法氏囊、胰腺、腺胃和脑,通过病理学方法研究FAdV-4感染SPF鸡后各个组织器官的动态病理变化规律。结果显示,以滴鼻点眼方式感染4周龄SPF鸡可以成功建立人工感染模型。感染后第4天开始出现临床症状,第5天开始出现死亡,第7天病鸡开始恢复,发病率为72%,死亡率为34%。剖检发现典型病变为心包积液,肝肿大、黄染。组织学检查发现肝细胞中存在大量核内包涵体,免疫器官出现广泛性的组织变性坏死、炎性细胞浸润。本研究为FAdV-4的防控和临床诊断提供了科学依据,为今后深入研究FAdV-4的致病机制奠定了基础。