短小芽孢杆菌DST27发酵培养基及发酵条件的优化

[目的]通过优化生防菌株短小芽孢杆菌DST27发酵培养基及发酵培养条件,为后期该菌株的开发和应用提供基础。[方法]通过单因素筛选、Plackett-Burman试验和响应面分析法,以菌体生长量和对尖孢镰刀菌的抑菌活性为指标,优化DST27发酵培养基及发酵培养条件。[结果]最佳发酵培养基为1.35%葡萄糖、1%酵母粉和0.5%CaCl2;最佳发酵条件为装液量20%、接种量5.40%、初始pH 7.28、温度28℃和转速180 r/min,在此培养条件下DST27的OD600为2.256,抑菌率为78.65%,与模型预测值81.42%相近,较优化前提高了22.06%。[结论]该试验优化了DST27发酵培养基及发酵条件,为今后该菌剂生产工艺及开展防治提供理论依据。

朝鲜淫羊藿内生菌分离鉴定与次级代谢产物研究

目的:对朝鲜淫羊藿内生菌进行分离鉴定,建立朝鲜淫羊藿内生菌代谢产物中总黄酮含量测定方法及5种黄酮苷种类的方法。方法:根据朝鲜淫羊藿内生菌的菌落形态进行初步鉴定,进一步采用ITS测序进行分子生物学鉴定。采用紫外分光光度法测定朝鲜淫羊藿内生菌代谢产物中总黄酮的含量,LC-MS法测定内生菌代谢产物种类。结果:鉴定出6株内生真菌,分别为间座壳属Diaporthe cotoneastri、木霉属Trichoderma atroviride、炭疽菌属Colletotrichum capsici、炭疽菌属Colletotrichum jasminigenum、Ilyonectria属Ilyonectria cyclaminicola和Diaporthe(间座壳属,疑似新种);6株内生菌代谢产物均能产生黄酮类成分,含量范围0.09~0.22mg/mL;EkF08次级代谢产物中化合物种类为淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、宝藿苷Ⅰ。结论:本研究建立的朝鲜淫羊藿内生菌代谢产物分析方法稳定、重复性好、可靠性高,为解决朝鲜淫羊藿资源匮乏问题、新资源“生物药材”开发等提供了科学依据和基础。

基于色度学原理的朝鲜淫羊藿不同部位量-质评价研究

目的阐明影响市售朝鲜淫羊藿药材质量因素,量化其表观色度值,评价其内在品质,建立量-质评价体系。方法采用差仪量化药材色度值,一测多评方法对朝鲜淫羊藿叶、茎、叶茎混合样品进行内在品质评价,并应用SPSS21.0统计分析法对量-质关系分析。结果朝鲜淫羊藿叶中黄酮类成分较高,符合《中国药典》规定,茎中较少。在A光下,L*、a*值与四种主要成分均有显著的负相关性。在D65光源下,L*值与四种成分均有极显著的负相关性;a*值与四种成分均有显著的正相关性;b*值与朝藿定A、朝藿定B和淫羊藿苷有正相关性,与朝藿定C无相关性。结论朝鲜淫羊藿药材的表观色度(量)与内在成分(质)存在显著的相关性,生产实践中可通过药材表观色度值初步判定其品质,为阐明药材色泽与内在品质的机制、提升质量标准、建立快速评价品质方法提供了科学依据。同时,在朝鲜淫羊藿采收,加工关键技术环节中应严格遵循《中国药典》规定,规范生产加工,以保证药材质量。