HBV、HCV、HIV血筛多中心研究免疫学灰区的核酸检测分析与临床特征研究

目的分析化学发光灰区标本的临床特征及核酸检测对化学发光灰区标本结果判断的指导性意义。方法收集2021年7月—12月全国不同地区的5家综合医院入院患者术前/输血前血源性传播疾病样本检测结果,对化学发光灰区检测结果的标本进行核酸检测结果及临床特征分析。结果5723例样本中总计检出HBV免疫灰区样本28例(占比0.49%),HCV灰区样本20例(占比0.35%)。经核酸检测验证,28例HBV灰区样本中,15例HBV样本核酸检测为阳性(占比53.5%),其HBcAb也均为阳性;13例HBV样本核酸检测为阴性(占比46.5%),其中HBcAb阳性4例。HBV与HCV免疫检测灰区在临床各个科室均有发现,出现HBV灰区样本最多的前三科室为骨科、妇科、泌尿科,灰区样本核酸验证假阳性最多的临床科室为妇科与骨科。HCV灰区样本最多的前三科室为泌尿、肾内、外科,且均为假阳性。HBV灰区样本患者临床诊断结果有35.7%(10/28)为肿瘤类疾病,HCV灰区样本患者临床诊断结果有40%(8/20)为肿瘤类疾病。结论化学发光法容易造成假阳性结果,应注意复检验证,且设置灰区并非必要。灰区样本可见于多个临床科室,具有一定的临床分布特征。核酸检测可以提高检测灵敏度并且更大限度保证结果的准确性,能够验证免疫检测灰区。

国家卫生健康行业标准《儿科输血指南》总体编制说明和解读

儿童与成人在生理生化和免疫功能等方面具有较大差异,因此,儿童与成人的血液成分输注策略存在显著区别。为了指导儿童患者的临床输血实践,国家卫生健康委员会组织制定和发布了卫生健康行业标准《儿科输血指南》(WS/T 795-2022)。本文在介绍有助于《指南》理解的若干标准化概念的基础上,对《指南》的编制过程,“范围”“总则”和“需考虑的因素”的编写给出总体说明和解读,希望对《指南》理解和贯彻实施有所助益。

血栓弹力图与常规凝血检测评估早期复发性流产患者凝血功能及指导抗凝治疗的预后比较

目的探讨血栓弹力图(TEG)与常规凝血检测在评估复发性流产(RSA)患者孕早期凝血功能及指导抗凝治疗的临床价值,并探讨两种检测方法的相关性和一致性。方法选取2018年5月至2021年2月就诊于湘潭市中心医院生殖遗传中心和妇产科行抗凝治疗的孕早期RSA患者为研究对象,根据抗凝指导方法不同分为常规组(常规凝血功能检测指导组,64例)和TEG联合组(TEG联合常规凝血功能检测指导组,64例),比较两组患者的妊娠结局以及两种检测方法的相关性和一致性。结果TEG联合组患者妊娠成功率显著高于常规组(85.94%vs.64.06%,P<0.05),而早产率显著低于常规组(10.91%vs.29.27%,P<0.05)。相关性分析显示,TEG检测R值与常规检测PT、APTT正相关;K值与APTT正相关,与FIB负相关;Angle值与APTT负相关,与FIB正相关;MA值与FIB、PLT正相关,与APTT、TT负相关;CI值与APTT负相关,与FIB正相关;上述相关性的r值水平为0.250~0.442(P<0.05)。一致性分析仅显示TEG检测R值与PT以及MA值与PLT间存在一定一致性,Kappa值分别为0.116和0.285(P<0.05)。TEG诊断出血液高凝状态的阳性率显著高于常规凝血功能检测(70.31%vs.25.00%,P<0.001)。结论早孕RSA患者TEG与常规凝血功能检测结果存在低度相关性,但一致性较差;TEG诊断出血液高凝状态的阳性率较常规凝血功能检测更高,更适用于早孕RSA患者的血栓前状态筛查,且联合检测可进一步提高筛查阳性率;TEG联合常规凝血功能检测对优化抗凝治疗方案的指导作用更佳,可显著提高RSA患者的妊娠成功率并降低早产率。

临床727例次单采血小板输注效果分析

为分析临床单采血小板输注效果及其影响因素,回顾性分析湘雅第三医院2010年9月至2011年5月进行单采血小板输注的254名患者的727例次输注资料,计算血小板计数增高指数(CCI)和血小板回收率(PPR)评价血小板输注效果,统计输注有效率,根据患者病症、输血次数、血型和脾肿大与否分组进行统计学比较。结果表明,727例次输注单采血小板有效456例次,占62.72%,以急性失血性贫血和慢性系统性疾病患者输注效果较为明显,尤其是慢性肾疾病(有效率为94.12%);脾脏肿大影响血小板输注效果(有效率仅为40.35%);血小板输注次数与输注效果呈负相关。结论:脾脏肿大和血小板输注次数是影响输注效果的因素。

肝损伤患者外周血单个核细胞中白细胞介素8mRNA的表达

目的 探讨肝损伤患者外周血单个核细胞 (PBMCs)中白细胞介素 8(IL 8)mRNA的表达水平及其意义。方法 采用半定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测 36例慢性肝病患者、17例急性重型肝炎患者、11例原发性肝癌患者和 18名正常对照者PBMCs中IL 8mRNA的表达水平。结果 在肝损伤患者中 ,IL 8mR NA的表达较正常人明显增高 ,且与胆红素浓度、内毒素血症和病情轻重相关。结论 IL 8可能促进肝脏的炎性损害 ,导致严重的肝细胞损伤 ,检测IL 8mRNA的表达水平 ,对了解肝损伤患者的肝损害程度、早期诊断和预后具有重要的意义。

关于目前术前/输血前患者感染性疾病筛查的思考与探索

1研究背景输血是抢救生命、治疗疾病的重要医疗手段,及时安全的输血每年可以挽救成千上万的生命。但输血是把双刃剑,也会给患者带来输血安全隐患。WHO数据显示全球范围内,约有2.4亿人慢性感染乙型肝炎病毒(HBV),有1.3亿至1.5亿人慢性感染丙型肝炎病毒[1],到2019年底,约有3800万艾滋病毒(HIV)感染者[2]。血源性传播是HBV、HCV、HIV的重要传播途径之一。

肝损伤患者外周血单个核细胞中白介素5 mRNA的表达及其临床意义

目的探讨肝损伤患者外周血单个核细胞(PBMCs)中IL-5 mRNA的表达水平及其意义。方法采用RT-PCR法检测64例肝损伤(36例慢性肝病、17例急性重型肝炎、11例原发性肝癌)患者和18例健康对照者(对照组)PBMCs中IL-5 mRNA的表达水平,并分析IL-5 mRNA表达与血清胆红素、内毒素血症及患者预后的关系。结果慢性肝病、急性重型肝炎、原发性肝癌患者PBMCs中IL-5 mRNA的表达水平〔分别为(0.1611±0.1035)、(0.2838±0.0537)和(0.3313±0.1348)均显著高于对照组(0.0223±0.0047),差异有统计学意义(P<0.01);而急性重型肝炎和原发性肝癌患者IL-5 mRNA表达水平亦显著高于慢性肝病患者,差异有统计学意义(P<0.01)。64例肝损伤患者中,血清高胆红素(≥342μmol/L)水平者PBMCs中IL-5 mRNA表达水平显著高于低胆红素(<342μmol/L)水平者,内毒素(+)者IL-5 mRNA表达水平显著高于内毒素(-)者,死亡者IL-5 mRNA表达水平显著高于存活者,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论检测PBMCs中IL-5 mRNA的表达水平,对于了解肝损伤患者的肝损害程度、早期诊断和预后具有重要的意义。

血小板源性生长因子-BB在鼻咽癌患者中的表达及临床意义

目的探讨鼻咽癌患者血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)的表达水平及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测45例鼻咽癌患者和20例正常对照者外周血血清中PDGF-BB的水平,用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测受试者外周血单个核细胞(PBMCs)中PDGF-B mRNA的表达水平。结果鼻咽癌患者和正常对照组血清PDGF-BB水平分别为(401±74)、(28±8)ng/L,外周血单个核细胞PDGF-BmRNA的表达水平分别为(0.835±0.078)、(0.228±0.038)相对灰度值,差异均有统计学的意义(P<0.05)。结论PDGF-BB在鼻咽癌的发生发展中可能起着重要作用,检测血清PDGF-BB及PBMCs中PDGF-BmRNA表达水平可能对鼻咽癌诊断具有一定临床指导意义。

血小板源性生长因子-BB在肺癌患者中的表达及意义

目的探讨肺癌患者血清及外周血单个核细胞中血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)的表达水平及其意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测30名肺癌患者和20名正常对照者外周血血清中PDGF-BB的水平,用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测受试者外周血单个核细胞(PBMCs)中PDGF-B链mRNA的表达水平。结果肺癌患者和正常对照者血清PDGF-BB水平分别为(389.64±36.42)、(28.36±8.35)pg/ml,外周血单个核细胞PDGF-B链mRNA的表达水平分别为(0.9287±0.0942)、(0.2275±0.0384)灰度比值,比较差异有统计学的意义(P<0.01)。结论检测血清PDGF-BB及PBMCs中PDGF-B链mRNA表达水平可能对肺癌诊断具有一定临床指导意义。

白细胞介素12 mRNA在肝损伤患者外周血单个核细胞中的表达

目的探讨肝损伤患者外周血单个核细胞(PBMCs)中IL-12 mRNA的表达水平及其意义。方法采用RT-PCR法检测36例慢性肝病患者(21例乙型肝炎、15例丙型肝炎)、17例急性重型肝炎患者、11例原发性肝癌患者和18例正常对照者中IL-12P40 mRNA的表达水平。结果在肝损伤患者中,IL-12的表达较正常人显著增高(P<0.001),其中急性重型肝炎患者的表达水平显著高于慢性肝病组(P<0.001),而原发性肝癌患者IL-12 mRNA表达又高于急性重型肝炎(P=0.002),且与血清胆红素浓度和内毒素血症相关。结论IL-12可能促进肝脏的炎性损害,导致严重的肝细胞损伤。检测IL-12 mRNA表达水平对于了解肝损伤患者的肝损害程度、早期诊断和预后具有重要意义。

重症肝炎患者血浆置换治疗的临床疗效观察

目的评价血浆置换(PE)治疗重型肝炎的疗效及安全性。方法回顾性分析69名重型肝炎患者的临床资料,按其治疗方式的不同分为治疗(PE)组:39名,在内科综合治疗基础上行血浆置换;对照组:30名,单纯内科综合治疗。于治疗前、后24 h检测PE组患者的凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(T-BILI)、直接胆红素(D-BILI)和总胆汁酸(TBA)等生化指标的变化;同时观察2组患者的临床症状及体征的改变,评价整体疗效,并在统计分析患者病情分期、并发症与血浆置换治疗重型肝炎疗效的关系后,做出临床评判。结果 1)PE组治疗前后凝血功能和肝功能生化指标分别为:PT(s)24.5±9.19 vs17.8±6.71、TT(s)16.6±3.87 vs 17.9±11.82、ALT(U/L)281.2±271.16 vs 69.4±91.97、AST(U/L)285.8±247.91vs 64.8±43.94、T-BILI(μmol/L)407.0±178.99 vs 238.2±143.76、D-BILI(μmol/L)316.1±131.09 vs 167.4±110.85、TBA(μmol/L)141.7±83.56 vs 140.6±86.26;2)总体有效率(%),PE与对照组为56.41 vs 30.00,其中早、中、晚期的重型肝炎有效率分别为81.25 vs 41.67、53.85 vs 40.00、20.00 vs 12.50(P<0.05);3)并发自发性腹膜炎的患者治疗后的有效率(%),PE与对照组分别为70.00 vs 40.00。结论 PE是治疗重型肝炎的1种安全、有效方法;对于早期重症肝炎患者疗效优于中晚期重症肝炎患者,对合并自发性腹膜炎患者的疗效优于单纯内科综合疗法。

PDCD5蛋白对地塞米松诱导的多发性骨髓瘤细胞凋亡的影响及机制初探

目的:观测程序化细胞死亡分子5(programmed cell death 5,PDCD5)表达蛋白对地塞米松诱导人多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞(KM3)凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:将不同浓度的重组人程序化细胞死亡分子5(human recombinant PDCD5,rhPDCD5)蛋白单独或/和地塞米松(dexamethasone,DXM)同时加入处于对数生长期的KM3细胞,共同培养一段时间,收集细胞后行以下检测:(1)Annexin V-FITC&PI双染法应用流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测KM3细胞凋亡率;(2)蛋白免疫印迹方法检测KM3细胞中caspase-3活性;(3)免疫细胞化学法检测KM3细胞survivin蛋白表达。结果:KM3细胞凋亡率,在rhPDCD5和DXM联用组较单用组明显增加,且浓度较高PDCD5蛋白组作用更明显。KM3细胞caspase-3蛋白活性,在rhPDCD5和DXM联用组较单用组明显上调,高浓度PDCD5蛋白组(20 mg/L)的caspase-3活化较低浓度(10 mg/L)组明显。KM3细胞survivin蛋白表达,在rhPDCD5和DXM联用组较单用组表达明显下调,并且浓度较高的PDCD5蛋白组survivin表达下调更明显。结论:PDCD5蛋白可直接作用于多发性骨髓瘤细胞使细胞凋亡,并对地塞米松诱导的KM3细胞凋亡有明显的促进作用。PDCD5蛋白可能通过激活caspase-3和下调survivin蛋白表达发挥其促进多发性骨髓瘤细胞凋亡的作用。

大量输血时血浆与红细胞的比例探讨

本研究通过回顾性分析大量输血对患者凝血功能的影响,探讨新鲜冰冻血浆与红细胞的合适比例。2011年1月-2013年1月,因各种原因需要大量输血的患者151例,按照凝血功能正常与否,分为凝血功能正常组(138例)和凝血功能异常组(13例),以新鲜冰冻血浆与红细胞之比为1∶1作为分界,每组均分为高血浆(2∶1)、中血浆(1∶1)、低血浆(<1∶1)3个比例组。输血前和大量输血后24 h检测凝血功能。结果表明,大量输血24 h后,凝血功能正常组的低血浆组凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)明显延长,纤维蛋白原(FIB)含量明显降低(均P<0.05);高﹑中血浆组凝血功能无明显变化(P>0.05);凝血功能异常组的中血浆和低血浆组在大量输血后凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间,纤维蛋白原仍在异常水平(P>0.05),高比例组的凝血功能明显改善(P<0.05)。结论:大量输血时,血浆与红细胞比例应根据患者凝血功能进行调整,凝血功能异常的患者建议新鲜冰冻血浆与红细胞的比例为2∶1,以改善患者的凝血功能,减少不良事件的发生;凝血功能正常的患者建议冰冻血浆与红细胞的比例为1∶1,减少稀释性凝血功能障碍和高血容量的发生。

不同状态下血栓弹力图与凝血功能、血小板数关系的探讨

目的:探讨机体在不同凝血状态下(低凝﹑高凝和正常凝血)血栓弹力图实验(thromboelastography,TEG)与凝血4项﹑血小板数值之间的相关性和一致性,评价2种方法在低凝﹑高凝和正常凝血状态下对于临床应用的参考价值。方法:回顾性分析中南大学湘雅三医院2015年1月至2017年12月409例进行TEG、凝血4项和血常规检测的病人临床资料,将TEG的主要参数凝血因子激活时间(R)、血块形成速率参数(K)、弹力图最大切角(Angle)和弹力图最大振幅(MA)与凝血常规检测中的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fib)、凝血酶时间(TT)以及血小板计数进行不同凝血情况下的Pearson相关性分析,并进行Kappa一致性分析和配对卡方检验,同时对2种方法指导的临床用血情况进行比较。结果:R值与PT呈正相关,在低凝﹑高凝和正常凝血状态下相关系数分别为r=0. 376﹑r=0. 316和r=0. 276(P <0. 05); Kruskal-Wallis检验两两比较,相关系数两两比较无差别(P> 0. 05);一致性分别为0. 208﹑0. 227和0. 131。R值和APTT呈正相关,在低凝﹑高凝和正常凝血状态下相关系数分别为r=0. 418﹑r=0. 258和r=0. 458(P <0. 05); Kruskal-Wallis检验两两比较,低凝和正常凝血相关系数无差别(P> 0. 05),其他两两比较有差别(P <0. 05);一致性分别为0. 338﹑0. 291和0. 161,一致性总体有差异(P <0. 05)。K值与Fib呈负相关,在低凝﹑高凝和正常凝血状态下分别为r=-0. 611﹑r=-0. 411和r=-0. 311(P <0. 05); Kruskal-Wallis检验两两比较均有差别(P <0. 05);一致性分别为0. 432﹑0. 481和0. 323,一致性总体有差异(P <0. 05)。K值与Plt呈负相关,在3种凝血状态下相关系数分析为r=-0. 278﹑r=-0. 238和r=-0. 278; Kruskal-Wallis检验两两比较均无差别(P> 0. 05);一致性分别为0. 401﹑0. 312和0. 279,一致性总体有差异(P <0. 05)。Angle角与Fib显正相关,相关系数在低凝﹑高凝和正常凝血状态下分别为r=0. 638﹑r=0. 538和r=0. 438(P <0. 05),Kruskal-Wallis检验两两比较均有差别(P <0. 05);一致性分别为0. 323﹑0. 357和0. 288,一致性总体有差异(P <0. 05)。MA与Fib呈正相关,在低凝﹑高凝和正常凝血状态下分别为r=0. 351﹑r=0. 381和r=0. 211 (P <0. 05),Kruskal-Wallis检验两两比较,低凝和高凝血相关系数无差别(P> 0. 05),其他两两比较有差别(P <0. 05);一致性分别为0. 510﹑0. 467和0. 427,一致性总体有差异(P <0. 05)。MA与Plt数呈正相关,在低凝﹑高凝和正常凝血状态下相关系数分别为r=0. 478﹑r=0. 515和r=0. 378; Kruskal-Wallis检验两两比较均有差别(P <0. 05);一致性分别为0. 581﹑0. 461和0. 350,一致性总体有差异(P <0. 05)。结论:TEG与凝血试验及Plt检测结果相关;在不同情况下,常规凝血4项﹑Plt数与TEG的相关性和一致性有差别。因此建议在临床实际工作中对可能存在病理状态的高凝和低凝的患者进行TEG检测,这样能动态观测体内凝血情况,指导临床合理用药和输血,降低病人栓塞和输血风险。

CD38单克隆抗体对输血相容性检测干扰及其应对方案的专家共识

随着肿瘤免疫靶点的不断发现及抗体研发技术的持续变革,抗体药物在临床上的应用越来越广泛。但有些靶点不仅在肿瘤细胞上表达,而且在红细胞上也有表达,故临床上针对相应靶点抗体的应用可能会对输血相容性检测产生干扰,导致配血困难或输血延迟。本共识总结了目前克服CD38单克隆抗体(简称CD38单抗)干扰输血相容性检测的方法,并经过对不同方法的优缺点分析后,推荐在中国患者人群中使用凝聚胺和巯基还原剂[二硫苏糖醇(Dithiothreitol,DTT)或2-巯基乙醇(2-mercaptoethanol,2-Me)]处理红细胞,作为解决CD38单抗干扰输血相容性检测的方法,以消除CD38单抗带来的输血问题,为临床医师和输血科技术人员提供相应输血前工作流程的解决方案。

新克隆的基因NOR_1对鼻咽癌细胞株HNE_1细胞生长的影响

NOR1是与鼻咽癌密切相关的抑瘤/易感基因候选者之一,将NOR1基因的全长cDNA片段亚克隆至pcDNA3.1(+)的表达载体中,通过脂质体介导转染入鼻咽癌细胞系HNE1,RT-PCR、RNA印迹方法筛选高效表达NOR1的细胞株,并借助细胞生长曲线、软琼脂生长集落形成大小试验、流式细胞仪对转染细胞的生物学行为进行检测.结果发现转染了NOR1基因的HNE1细胞生长速度明显减慢,在软琼脂中的集落形成较对照组明显减小.流式细胞仪分析表明,NOR1可以延缓细胞由G0/G1期进入S期.结果表明NOR1基因可能在抑制鼻咽癌的发生发展中起重要作用,为进一步研究NOR1的功能研究打下基础.

急性淋巴细胞白血病患儿血小板输注疗效及影响因素分析

目的探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿血小板输注的疗效及其影响因素。方法纳入2013年1月1日至2016年6月30日在中南大学湘雅三医院血液科及儿科就诊的全部初诊、初治,且在治疗过程中至少输注1次单采血小板的、<14岁的ALL患儿。单采血小板的输注采用ABO、Rh同型输注策略。每例每次输注血小板后同时满足24 h校正血小板增加指数(CCI)>4.5和24 h血小板回收率(PPR)>20%,且消化道、鼻和牙龈出血症状得到控制,判定为当次输注有效,否则为当次输注无效。有效例次归为有效组,无效例次归为无效组。对可能影响血小板输注疗效的因素(年龄、性别、发热、出血、脾大、感染、是否使用头孢菌素、血小板输注次数)行单因素和多因素分析。结果 44例ALL患儿进入本文分析,共输注单采血小板302例次,有效组197例次(65.2%),无效组105例次,每例患儿平均输注(6.1±5.6)次。302例次中;输注血小板前后的血小板计数(×10~9·L^(-1))分别为19.2±9.4和66.1±36.2,差异有统计学意义(t=11.19,P<0.01);输注1次(44例次)、~5次(93例次)、~10次(67例次)和>10次(98例次)的输注有效率分别为84.1%、76.3%、56.7%和52.0%。单因素分析显示,有效组和无效组比较,发热、出血、脾大、感染和血小板输注次数差异有统计学意义,P均<0.05。Logistic多因素回归分析显示,发热(OR=3.737,95%CI:1.213~11.513)和感染(OR=3.258;95%CI:1.019~10.419)是影响血小板输注疗效的主要危险因素。结论血小板输注可以改善ALL患儿的血小板计数及出血症状,发热和感染为影响ALL患儿血小板输注疗效的主要危险因素。

自身抗体干扰输血相容性检测处理对策

自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者由于存在自身抗体使输血前相容性检测复杂化,若不能正确鉴定这些患者的血型,明确是否存在具有临床意义的同种抗体/自身抗体并及时发出合适的成分血,可能导致输血延误甚至危及生命。正确掌握AIHA患者输血相容性检测处理对策,对于保障AIHA患者的输血及时性和输血安全性意义重大。本文根据国内外研究进展,从AIHA的血清学特点、自身抗体类型、血型鉴定方法、抗体筛查与抗体鉴定方法,以及此类患者的输血策略等方面做出总结,旨在为输血科工作人员排除AIHA患者自身抗体的干扰和输血提供指导。

NOR_1基因对HepG2细胞白介素-8水平的影响

目的探讨NOR1基因对HepG2细胞IL-8水平的影响。方法将NOR1基因通过脂质体转染入HepG2细胞后,抽提细胞总RNA,运用RT-PCR检测IL-8mRNA的水平,用ELISA检测细胞培养上清液IL-8的表达水平。结果细胞培养上清液IL-8蛋白水平,转染NOR1基因组明显高于空白组和对照组(P<0.01);而转染NOR1基因组与转染空质粒组IL-8mRNA的表达水平无显著差异(P>0.05);结论NOR1基因诱导HepG2细胞IL-8蛋白水平表达增高。