高产AmpC酶阴沟肠杆菌的耐药性及同源性分析

目的掌握阴沟肠杆菌的耐药谱及分子流行病学特征。方法高产AmpC酶采用表型筛选法,耐药谱选用改良K-B法,基因分型采用随机扩增多态DNA(RAPD)法。结果50株阴沟肠杆菌中表现高产AmpC酶株有16株(32%)、单产ESBLs菌株有8株(16%)、同时产AmpC酶和ESBLs的菌株有8株(16%),未发现亚胺培南耐药株,产酶和不产酶菌株间的耐药率差异存在显著性,RAPD基因分型得的遗传聚类图,可分为4类。结论阴沟肠杆菌有很高的耐药性,阴沟肠杆菌感染的治疗应首选亚胺培南,RAPD技术对阴沟肠杆菌感染同源性分析是一个有效的方法。

201株假单胞菌的鉴定及药敏

２０１株假单胞菌的鉴定及药敏桂炳东，徐建民，贾坤如，熊莉芝（江西医学院第二附属医院检验科，江西南昌３３０００６）假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）是一群不发酵糖类的革兰阴性杆菌。本届细菌种类很多，用ｒＲＮＡ－ＤＮＡ分子杂交试验可将其分为５个同源群。...

大肠埃希杆菌和克雷伯菌属超广谱β-内酰胺酶测定及耐药性

目的进行大肠埃希杆菌和克雷伯菌属超广谱β－酰胺酶（ESBL）和耐药性测定，以指导临床用药。方法采用Vitek－CNS－NT卡测定，并以EtestESBL试条对照，ESBL阳性菌株进行11种抗生素药敏测定。结果发现15.5％大肠埃希杆菌、14．7％克雷伯菌属ESBL阳性，GNS－NT卡与EtestESBL试条结果一致，产ESBL细菌对庆大霉素、诺氟沙星、氨苄西林全部耐药、对其他抗生素耐药率也很高，对呋喃妥因耐药率最低（20.8％）。结论大肠埃希杆菌和克雷伯菌属ESBL阳性较高（15．2％），产ESBL细菌多重耐药十分严重。

多重耐药阴沟肠杆菌的耐药性及分子流行病学研究

目的掌握阴沟肠杆菌的耐药谱及分子流行病学特征。方法耐药谱选用改良K-B法,基因分型采用随机扩增多态DNA(RAPD)法。结果48株阴沟肠杆菌中ESBLs检出率为35.4%,未发现亚胺培南耐药株,产ESBLs和不产ESBLs菌株间的耐药率存在显著性差异。RAPD基因分型得的遗传聚类图,可分为四类,1、2、5、6号标本为同一聚类群。结论阴沟肠杆菌有很高的耐药性,阴沟肠杆菌感染的治疗应首选亚胺培南,其次为阿米卡星和环丙沙星。RAPD技术对阴沟肠杆菌感染同源性分析是一个有效的方法。

革兰阴性杆菌诱导型β-内酰胺酶测定及耐药性分析

对 174株革兰阴性杆菌进行诱导型 β-内酰胺酶的测定和耐药性分析 ,结果产诱导型 β-内酰胺酶细菌 6 5株(37.4% ) ,其中铜绿假单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、阴沟肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌检出率最高 ,分别为 6 0 .0 %、6 0 .0 %、5 3.8%、5 0 .0 %。产诱导型β-内酰胺酶细菌对第一代、第二代头孢菌素有较高耐药性 ,对第三代头孢菌素和氨基糖甙类、喹喏酮类耐药率较低 ,产酶株与非产酶株耐药率很接近。提示常规药敏试验未能真正反映细菌耐药情况 ,诱导型 β-内酰胺酶的检测可以补充常规药敏的不足。

超广谱β-内酰胺酶常用检测方法的评价

目的 对三种常用超广谱 β -内酰胺酶 (ESBLs)测定方法进行评价。 方法 采用纸片扩散法、双纸片增效试验、双纸片协同试验三种方法测定 30株ESBLs阳性和 5 0株ESBLs阴性的革兰氏阴性杆菌及临床分离的 6 5株革兰氏阴性杆菌产ESBLs情况。结果 纸片扩散法、双纸片增效试验、双纸片协同试验三种方法敏感性分别为 93.3%、86 .7%、93.3% ,特异性分别为 90 .0 %、10 0 .0 %、10 0 .0 % ,临床分离菌株ESBLs检出率为 15 .4%。结论 三种方法均可选用 ,但以纸片协同试验测定简便 ,敏感性、特异性均好 ,更适合各级医院常规应用。

随机扩增DNA多态性技术在肠球菌流行病学分型中的应用

目的 探讨运用随机扩增DNA多态性技术对肠球菌流行病学分型的方法。方法 采用随机扩增DNA多态性技术对分离的肠球菌进行基因水平的同源性分析。结果 显示明显可见10～20条数的DNA指纹图谱,经RAPD、PHYLIP和Treeview分析软件分析,分为3个聚类群。结论 随机扩增DNA多态性技术对肠球菌感染流行监测是一个有效的方法。

血液病患者医院感染与白细胞数关系的研究

目的 为了探讨恶性血液病患者医院感染与外周血白细胞数的关系及其感染病原学特点 ,为临床防治提供依据。方法 对我院 1996～ 2 0 0 0年共收治的 5 2 6例恶性血液病住院患者进行回顾性调查分析。结果 5 2 6例恶性血液病患者 ,有 2 74例发生医院感染 ,感染率为 5 2 .0 9% ;白细胞数 <4 .0× 10 9/L组感染率 6 3.0 2 %、<1.0×10 9/L组感染率 95 .2 8%、≥ 4 .0× 10 9/L组感染率 16 .2 6 % ,与前两组比较 P<0 .0 0 1;白细胞数≤ 1.0× 10 9/L感染死亡率 4 6 .5 3%、>1.0× 10 9/L 感染死亡率 8.0 9% ,两组间比较 P<0 .0 0 1;感染的病原菌主要是铜绿假单胞菌、大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌 ,其次为真菌。结论 白细胞减少是恶性血液病患者医院感染的主要危险因素 ,对白细胞数 <1.0× 10 9/L 的患者应加强护理 ,对病原菌应根据敏感药物合理使用抗生素 ,慎用广谱抗生素 ,以防真菌感染。

耐亚胺培南的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的耐药性分析

目的探讨耐亚胺培南的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药特性。方法常规方法进行菌株分离,经革兰染色、氧化酶试验等初筛,再经VITEK-32型全自动微生物分析仪进行菌株鉴定和药敏试验,部分药敏采用KB法。结果2005年6月至2006年12月分别检测到42株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌和30株耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌,标本来源主要为痰液,占75.0%(54/72),其次为伤口分泌物8.3%(6/72)。耐亚胺培南的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌病区分布前4位的是呼吸内科(45.8%)、神经内科(23.6%)、血液内科(18.1%)和神经外科(9.7%)。耐亚胺培南铜绿假单胞菌对常用17种抗菌药物耐药率>50%的有11种,其中耐药率>90%的也有7种,分别为氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑林、头孢替坦、头孢曲松、复方磺胺甲唑和呋喃妥因,耐药率较低的有妥布霉素(11.9%)、阿米卡星(13.3%)和庆大霉素(21.7%)。耐亚胺培南鲍曼不动杆菌对常用的17种抗菌药物耐药率最低的为头孢哌酮/舒巴坦(16.7%),对其余16种抗菌药物的耐药率均>80%。结论耐亚胺培南的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的多重耐药性严重,临床可根据药敏试验选用抗菌药物,在本文条件下耐亚胺培南鲍曼不动杆菌建议选用头孢哌酮/舒巴坦;耐亚胺培南的铜绿假单胞菌建议选用妥布霉素、阿米卡星和庆大霉素。

临床分离的肠球菌株耐药性变迁分析

目的 了解我院近 5年来肠球菌在临床标本中的分布特点及其耐药性变迁 ,更好地指导临床合理使用抗生素。方法 常规方法进行菌株分离 ,应用VITEK 32型全自动微生物分析仪进行菌株鉴定、药敏试验及庆大霉素和链霉素增效筛选试验 ,部分药敏采用纸片扩散法。结果 近 5年从各种临床标本中共分离到肠球菌 2 5 5株 ,其中痰液 4 2 6 %、尿液 34 2 %、脓液 11 2 %、胆汁 4 9%、其他标本 7 1% ;万古霉素和替考拉宁 5年中对肠球菌均保持最强的抗菌活性 ;氨苄西林、青霉素、呋喃妥因对肠球菌也保持较强抗菌活性 ,5年中耐药率均 <2 0 % ,耐药率上升最快的是环丙沙星和四环素 ,5年中分别上升了 4 3%和 33% ,高剂量庆大霉素和高剂量链霉素耐药率虽有上升 ,但近两年趋于稳定。结论 肠球菌在临床各标本中的检出率有逐年上升的趋势 ,氨苄西林、青霉素和呋喃妥因对肠球菌有较稳定的抗菌活性 ,万古霉素和替考拉宁对肠球菌有最强的抗菌活性 ,但临床已检出耐万古霉素肠球菌 ,值得重视。

鲍氏不动杆菌的耐药性及同源性研究

目的调查当地省级医院临床分离的鲍氏不动杆菌耐药性及产AmpC酶情况,并对AmpC酶阳性的多重耐药菌株进行同源性研究。方法药敏试验采用纸片琼脂扩散法,采用AmpC酶表型筛选法结合PCR法检测AmpC酶,利用RAPD分型技术对AmpC阳性的多重耐药鲍氏不动杆菌进行基因分型。结果106株鲍氏不动杆菌对亚胺培南耐药率最低11.1%,对青霉素类、头孢菌素类和单环β-内酰胺类抗生素耐药率均较高,特别是氨曲南和哌拉西林;对氨基糖苷类和氟喹诺酮类抗生素也有一定的耐药性;共检测出25株AmpC酶阳性菌株,产AmpC酶阳性率占总菌株数的23.58%;通过聚类分析发现5、6、10、12、13、14、20、23号菌株分为同一聚类群;8、17、18号菌株分为同一聚类群。结论鲍氏不动杆菌对各类抗生素均有不同程度的耐药性;AmpC酶表型筛选试验检测AmpC酶结果可靠,操作简便、快速,易于在临床实验室中推广使用;RAPD分型技术对鲍氏不动杆菌进行基因分型对于确定鲍氏不动杆菌菌株间的同源性,监控感染的传播有重要意义。

多重耐药鲍曼不动杆菌对替加环素等15种抗菌药物的耐药性分析

目的分析多重耐药鲍曼不动杆菌对替加环素等15种抗菌药物的耐药性。方法常规培养和分离菌株,经Vitek-32全自动微生物分析仪及配套GNI+和GNS药敏卡进行菌株鉴定和药敏试验,替加环素、头孢哌酮/舒巴坦的药敏试验采用K-B法。结果 100株多重耐药鲍曼不动杆菌对替加环素的敏感率为95.0%,其中70株耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌对替加环素的敏感率为97.1%(68/70);对其余14种抗菌药物100%耐药的有5种;除对头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低(20.0%)外,对其余药物耐药率都在70%以上。结论替加环素对多重耐药的鲍曼不动杆菌有较强的敏感性。

肺炎克雷伯菌临床分离株产广谱和超广谱β-内酰胺酶的基因型研究

目的了解产ESBLs肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性及其基因型分布特征,指导临床进行抗感染治疗,更好地控制耐药菌株的播散。方法对38株经双纸片试验确认为ESBLs表型阳性的肺炎克雷伯菌采用纸片扩散法进行药物敏感性试验;采用PCR法对ESBLs阳性株进行TEM型、SHV型、CTX-M型、VEB型和PER型ESBL基因检测,对PCR阳性产物进行测序确定基因型别;同时采用PCR法检测整合酶基因,对PCR产物进行测序确定整合酶类别。结果38株产ESBLs的肺炎克雷伯菌对青霉素类和头孢菌素类耐药性十分严重,对庆大霉素和复方磺胺甲唑的耐药率也均>90%,未检测到耐亚胺培南和美罗培南的菌株。38株ESBLs阳性菌株检测到3种ESBLs型,分别为TEM型、SHV型和CTX-M型,VEB型和PER型没有被检出。CTX-M型、TEM型和SHV型阳性率分别为92.1%(35/38)、84.2%(32/38)、76.3%(29/38)。整合酶基因阳性率为94.7%(36/38)。经测序,所有TEM型均为TEM-1广谱β内酰酶。29株SHV型阳性的PCR产物经测序证实,SHV-12有19株,SHV-11有4株,SHV-2有3株,SHV-28有2株及SHV-1有1株。35株CTX-M型中,CTX-M-14有22株,CTX-M-15有13株。同时检测到3种基因的有22株(57.9%),同时检测到2种基因的有14株(36.8%)。整合酶基因PCR产物经测序为Ⅰ类整合子。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性及多重耐药性严重,Ⅰ类整合子是其多重耐药和耐药性传播的主要原因;CTX-M-14及SHV-12为肺炎克雷伯菌产ESBLs的主要基因型。

儿童与成人金黄色葡萄球菌分离株携带PVL基因状况比较

目的了解从儿童或成人中分离获得的金黄色葡萄球菌(金葡菌)菌株携带Panton-Valentine杀白细胞素(PVL)基因的差异。方法分别对66株从儿童中及76株成人中分离获得的金葡菌菌株采用多重PCR,检测金葡菌16SrRNA基因、PVL基因和甲氧西林耐药决定分子A(mecA)基因;并同时检测耐甲氧西林金葡菌(MRSA)的葡萄球菌盒式染色体mec(SCCmec)基因型及亚型。结果在66株从儿童分离的金葡菌株中,共检出7株mecA基因阳性,MRSA 7/66(占10.6%);而在76株从成人分离的菌株中,共检出39株mecA基因阳性,MRSA 39/76(占51.3%),成人菌株MRSA发生率显著高于儿童(χ2=26.73,P<0.01)。从儿童或成人中分离的金葡菌菌株PVL基因携带率分别为31/66(占47.0%)和6/76(占7.9%);从儿童或成人中分离的甲氧西林敏感金葡菌(MSSA)的PVL基因携带率分别为29/59(占49.2%)和2/37(占5.4%),儿童与成人的差异均有统计学意义(P<均0.01);从儿童中分离的2株携带PVL基因的MRSA菌株都属于SCCmecⅣ型,从成人中分离的4株携带PVL基因的MRSA菌株中,SCCmecⅠ型、Ⅱ型各1株,SCCmecⅢ型2株。结论从儿童中分离的金葡菌株携带PVL基因阳性率较成人高,携带PVL基因以MSSA菌株为主。