PTEN、Akt与CREB基因在偏头痛大鼠三叉神经节的表达

目的检测第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chro-mosome ten,PTEN)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine-threonine kinase,Akt)与cAMP反应元件结合蛋白(cAMP responseelement-binding protein,CREB)基因在偏头痛模型大鼠三叉神经节的表达情况,探讨其在偏头痛发病机制中的相互关系及作用。方法通过硝酸甘油(glyceryl trinitrate,GTN)法建立大鼠偏头痛模型,分别在GTN注射后1、4、12和24h,取三叉神经节通过RT-PCR和免疫组化法对PTEN、Akt和CREB基因在mRNA和蛋白水平进行检测。结果 PTEN的基因与蛋白表达开始呈下降趋势,至GTN12h时分别为(0.42±0.07)(0.19±0.02),较对照组(1.00±0.07)(0.36±0.02)有显著降低(P<0.05),但到24h时基因与蛋白表达量分别为(3.09±0.21)(0.45±0.05),又明显回升(P<0.05);Akt与PTEN呈相反变化趋势,基因与蛋白表达在GTN4h(1.38±0.07)(0.23±0.03)和12h(1.42±0.03)(0.25±0.02)时显著增加(P<0.05),24h(0.88±0.15)(0.15±0.06)表达又降至正常水平(P>0.05);而GTN各组的CREB的基因与蛋白表达均较对照组(1.00±0.07)(0.43±0.03)有显著降低(P<0.05),24h(0.42±0.14)(0.27±0.05)表达量降到最低(P<0.05)。PTEN与Akt、CREB的基因表达呈显著负相关,r分别为-0.671,-0.484(P<0.05),蛋白表达也呈显著负相关,r分别为-0.563,-0.430(P<0.05),而Akt与CREB的基因及蛋白表达相关性不显著,r分别为0.272,-0.041(P>0.05)。结论偏头痛大鼠三叉神经节中PTEN、Akt及CREB在GTN不同时间点表达发生改变,且PTEN调控了Akt与CREB的表达,可能通过影响神经突触可塑性,参与偏头痛的发生发展过程。

烟草ovate同源基因的全长cDNA克隆与序列分析

根据番茄中控制果实形状的主效数量性状基因ovate的序列,用生物信息学方法从茄科植物烟草中获得直系同源ovate基因(NTovate)的特异片段,经鉴定,此基因在烟草中至少有2个拷贝。在此基础上用cDNA末端快速扩增(RACE)方法,获得其中1个拷贝的1059bpNTovate全长cDNA序列。序列分析表明,NTovate cDNA序列编码352个氨基酸,其蛋白序列与番茄ovate蛋白序列和拟南芥ovate蛋白家族AtOFP7蛋白分别为70%和36%的序列一致率,而与此家族中其他蛋白以及水稻ovate蛋白仅在保守的ovate结构域有较低的同源性。此基因已在GenBank中登录(EU043369)。

PTEN下调表达对反复发作性偏头痛大鼠模型行为学的影响

目的:探讨下调第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)对反复发作性偏头痛大鼠模型行为学的影响。方法:SD大鼠分4组,对照组(Normal组,n=8),假手术组(Sham+Ad-RFP组,n=8),模型组(IS组,n=15),干预组(IS+Ad R-si PTEN组,n=15)。炎性汤(inflammation soup,IS)刺激大鼠硬脑膜,建立反复发作性偏头痛大鼠模型,干预组在建立模型前1周三叉神经核(trigeminal nucleus caudalis,TNC)注射Ad R-si PTEN干预,通过畏光、痛阈等方法对大鼠行为学评价。结果:滴注IS后大鼠出现抓耳挠头,过度理毛等症状;9次IS后大鼠的痛阈阈值下降到<2.0 g;12次IS后大鼠表现为恐光,但是下调PTEN能有效逆转上述行为学改变(P<0.05)。结论:下调PTEN基因能有效逆转反复发作性偏头痛大鼠模型的行为学改变,对反复发作性偏头痛具有保护作用。

下调PTEN基因对缺氧损伤后海马神经元NR2B受体调控机制研究

目的:探讨用RNAi干扰技术下调第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(Phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)对缺氧损伤引起的神经元NR2B受体表达调控机制。方法:建立海马神经元培养缺氧缺糖(Oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤模型,转染shRNAspten-GFP质粒,采用细胞比色分析(Colorimetric assay)法观察神经元膜表面NR2B含量,RT-PCR测定NR2B受体的mRNA的表达,采用Fura2-AM法测定胞内Ca2+浓度,AlamarBlue进行神经元活力分析。结果:shRNAspten-GFP能成功转染到神经元中;细胞比色法显示神经元膜表面有大量NR2B表达,与PshGFP对照组相比shRNAspten治疗组NR2B含量明显降低(P<0.05),RT-PCR测定结果与细胞比色法结果基本一致;OGD损伤组比正常组胞内Ca2+浓度显著升高(P<0.05),转染PTEN基因后胞内Ca2+浓度比PshGFP对照组明显降低(P<0.05);无关对照PshGFP组神经元活力较正常对照组和治疗组均有显著下降(P<0.05)。结论:下调PTEN基因可降低NR2B的表达,阻断Ca2+内流,增加细胞活力,从而保护神经元损伤。

下调PTEN基因对全脑缺血大鼠学习记忆能力和CREB表达的影响

目的:探讨下调第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)对全脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力及转录因子环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element-bind-ing protein,CREB)的表达调控作用。方法:采用海马局部注射pshRNApten基因质粒,建立SD大鼠全脑缺血再灌注模型,利用体感诱发电位(Somatosensory evoked potential,SEP)和穿梭箱分别检查大鼠功能和行为学变化,RT-PCR和免疫组化检测海马神经元CREB mRNA和蛋白的表达。结果:穿梭箱实验发现pshRNApten各治疗组主动回避反应(Active avoiding reaction,AAR)习得率较pshGFP组明显提高;SEP检查显示,pshRNApten组较pshGFP组波幅明显上升,峰潜伏时缩短;pshRNApten组海马神经元CREB基因的mRNA和蛋白表达量较对照组明显上升;以上结果差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:下调PTEN基因能增强全脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力,其机制可能与下调PTEN引起CREB表达量增加有关。

下调PTEN基因对偏头痛大鼠三叉神经节NMDAR1和一氧化氮的影响

目的:利用RNAi重组腺病毒下调第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(phosphata-se and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)的表达,探讨PTEN基因是否参与偏头痛的病理过程及其对三叉神经节内N-甲基-D-天冬氨酸受体1亚基(N-methyl-D-aspartate receptor1,NMDAR1,简写NR1)和一氧化氮(nitric oxide,NO)的影响。方法:SD大鼠分成4组:假手术组(Sham组,n=12);硝酸甘油模型组(NTG组,n=12);PTEN基因下调组(AdR-siPTEN组,n=12);Ad-RFP非特异siRNA处理空载体对照组(Ad-RFP组,n=12)。将重组腺病毒立体定向注射入大鼠三叉神经节内,一周后通过皮下注射NTG建立偏头痛大鼠模型,分别于NTG注射前及注射后15分钟、30分钟、1、2、4小时观察大鼠痛阈变化,同时检测各组大鼠三叉神经节NR1和NO的差异。结果 :AdR-siPTEN腺病毒可下调三叉神经节PTEN基因的表达。与Ad-RFP组相比,AdR-siPTEN组的偏头痛大鼠痛阈明显增高,并且三叉神经节内NR1表达及NO合成明显减少。结论 :PTEN基因参与调节偏头痛的病理过程,下调PTEN基因可减轻NTG诱导的偏头痛大鼠模型对机械性刺激的反应,其机制可能是下调PTEN引起NR1表达量减低,继而引起NO含量降低所致。

缺氧所致海马神经元N-甲基-D-天冬氨酸2B受体和PTEN基因的表达

目的探讨OGD缺氧损伤后大鼠海马神经元NR2B受体和抑癌基因PTEN的表达量,以及NR2B与PTEN是否有生理性相互作用关系,为研究PTEN基因在脑缺血中的保护作用机制奠定基础。方法建立海马神经元体外OGD损伤模型,采用细胞比色分析(colorimetric assay)法和Western blotting检测神经元NR2B含量,RT-PCR和Western blotting测定PTEN基因的mRNA和蛋白表达水平,免疫沉淀和Western blotting研究NR2B与PTEN的相互作用。结果细胞比色分析和Western blotting结果显示神经元有大量NR2B表达,OGD损伤72h后NR2B含量表达量明显减少(P<0.05);Western blotting和RT-PCR结果显示OGD损伤后PTEN表达量略有下降但尚无统计学意义(P>0.05),免疫沉淀显示PTEN与NR2B在物理上连接形成复合物。结论海马神经元膜表面NR2B含量丰富,PTEN基因在海马神经元里有表达,OGD缺氧损伤再灌注引起NR2B受体和PTEN基因表达量下降,PTEN与NR2B有生理性相互作用。

代谢相关脂肪性肝病发生脂肪性肝炎的无创诊断模型构建及分析

目的通过临床一般资料、血清学指标及肝脏弹性成像无创检查手段,基于LASSO及Logistic回归建立代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)发生脂肪性肝炎的诊断模型,并评估该模型的诊断价值。方法纳入2018年1月—2021年12月于广东省中医院诊断为MAFLD且完善肝病理活检的患者为研究对象299例,根据肝病理NAS评分将其分为脂肪性肝炎组(n=170)例和无脂肪性肝炎组(n=129)。先后通过LASSO回归及多因素Logistic回归筛选MAFLD发生脂肪性肝炎的影响因素,并建立无创诊断模型,利用列线图形式可视化,采用加强Bootstrap法进行内部验证,绘制ROC曲线及Calibration曲线,并在MAFLD+NAFLD和MAFLD+cHBVi两个亚组人群中观察模型的诊断效能,并与其他诊断模型进行比较分析。计数资料组间比较采用χ^(2)检验;符合正态分布的计量资料组间比较采用成组t检验,不符合正态分布的计量资料组间比较采用Mann-Whitney U检验。采用多因素Logistic回归分析,筛选最佳诊断因素,构建列线图诊断模型,绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),计算ROC曲线下面积(AUC),并进一步采用加强Bootstrap法对模型进行内部验证,绘制Calibration曲线显示校准度。结果两组间BMI、ALT、AST、ADA、ALP、GGT、TBA、TCO_(2)、UA、HbA1c比较差异均有统计学意义(P值均<0.05);FibroScan方面,两组LSM及CAP比较提示差异具有统计学意义(P值均<0.001);病理学方面,两组的纤维化等级、脂肪变积分、小叶炎症积分、气球样变积分及NAS总分差异均有统计学意义(P值均<0.001)。亚组队列方面,MAFLD+NAFLD有、无脂肪性肝炎组分别为63、48例,MAFLD+cHBVi有、无脂肪性肝炎组分别为90、71例。通过LASSO回归及多因素Logistic回归筛选出LSM、CAP、BMI、AST是判断MAFLD患者是否发生脂肪性肝炎的最佳诊断因素,并以此构建LCBA模型。LCBA模型结果提示,总MAFLD、MAFLD+NAFLD和MAFLD+cHBVi人群的AUC分别为0.816、0.866、0.764(P值均<0.001),ROC曲线对比显示均优于acNASH、HSI、NFS模型。结论LCBA模型用于诊断MAFLD患者是否发生脂肪性肝炎的效能稳定,且优于acNASH、HSI、NFS,值得临床推广。

睾酮对青春期大鼠病理性攻击行为及前额叶皮质PSD-95和GAP-43表达的影响

目的探讨去势后睾酮水平对青春期大鼠病理性攻击行为和前额叶皮质突触可塑性的影响。方法将30只出生后21d的雄性SD大鼠随机分为去势组、模型组和对照组。去势组和模型组大鼠采用国际通用应激方法建立病理性攻击模型,持续到青春期。采用居住-入侵实验检测青春期大鼠攻击行为,ELISA法检测睾酮水平,蛋白质印迹分析检测前额叶皮质突触后致密物质95(PSD-95)和生长相关蛋白43(GAP-43)表达水平。结果居住-入侵实验结果显示,去势组攻击潜伏期显著低于模型组和对照组(P<0.01,P<0.01),屈服后继续攻击次数高于模型组和对照组(P<0.01,P<0.01)。ELISA检测结果显示,去势组睾酮水平显著低于模型组和对照组(P<0.01,P<0.01),且睾酮水平与攻击各指标呈中-高度负相关(P<0.01)。蛋白质印迹结果显示,去势组前额叶皮质PSD-95和GAP-43表达水平均低于模型组和对照组(P<0.01,P<0.01)。结论低水平血清睾酮对青春期大鼠前额叶皮质结构可塑性有损伤,可能与其病理性攻击行为相关。

小型猪肝脏细胞色素P450基因CYP3A29克隆与序列分析

设计引物通过RT-PCR扩增巴马香猪和贵州小型猪香猪药物代谢关键P450基因CYP3A29基因的全长编码区,纯化并克隆入pMD 18-T载体,通过序列测定和比对分析其序列变异情况。17头小型猪共发现CYP3A29基因的5个单核苷酸变异位点,均表现为同义替换,对编码的氨基酸序列无影响;猪CYP3A29的单核苷酸变异和品系相关,在不同品系中可表现出品系特有的单核苷酸变异;贵州小型香猪G3 a2902发现1个可变剪接,缺失89 bp并产生移码,改变编码蛋白。本研究克隆的巴马香猪和贵州小型香猪CYP3A29基因及其序列变异情况,可为其作为药物代谢模型的应用提供技术资料。

不同产地沉香的药效学比较研究

目的 比较研究不同产地沉香的药理作用,为沉香品质评价及开发应用提供实验依据。方法 小鼠随机分为空白对照组、阳性对照组、沉香1号组、沉香2号组、沉香3号组;采用热板法、乙酸扭体法、甲醛致痛法建立小鼠疼痛模型,观察3种沉香对疼痛反应的影响;采用乙醇灌胃法、吲哚美辛皮下注射法建立小鼠胃溃疡模型,观察沉香对胃溃疡的干预作用;采用胃排空法和小肠推进法观察沉香对小鼠胃肠运动的影响。结果 与空白对照组相比,各沉香组对小鼠热刺激的痛阈值有少量延长,但差异无统计意义;各沉香组均能明显抑制小鼠扭体次数(P<0.01,P<0.05),明显降低甲醛致痛小鼠的疼痛分值,其中3号沉香组抑制效果最为明显;各沉香组均能抑制乙醇诱导的胃溃疡和吲哚美辛诱导的胃溃疡发生(P<0.01,P<0.05),其中1号沉香和3号沉香作用更为明显;各沉香组能不同程度降低小鼠胃残留率和提高小肠推进率,尤以1号沉香和3号沉香作用更显著。结论 不同产地的沉香均具有镇痛、抗溃疡和促胃肠运动作用,但药效强度有所差异。

小型猪CYP3A88基因克隆与其他动物的序列比较

目的克隆我国资源小型猪品系巴马香猪肝脏中的CYP3A88基因,并进行生物信息学分析。方法应用RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)技术对其全长进行扩增,测序,利用Internet和GenBank数据库对其序列进行生物信息学分析。结果首次克隆并鉴定了我国资源小型猪品系巴马香猪肝脏中CYP3A88(GenBank登录号:EF625347)的编码区,获得大小为1965bp的全长cDNA,编码区长为1512bp,编码503个氨基酸;比较核苷酸序列,与小型猪CYP3A39相似性高达94%,而与人等其它动物的CYP3A相似性则在86%以下;推导和分析氨基酸序列表明,与小型猪CYP3A其它成员(CYP3A39、CYP3A29、CYP3A22)进行对比,其相似性分别为92%,89%,80%,而将小型猪与人的CYP3A分别比对,小型猪CYP3A88与人CYP3A4相似性最高,为77%;对其二级结构预测,它可能含12个α螺旋,4个β折叠;经NCBI上的CDD程序分析可知,其39～491氨基酸区域为P4503A亚家族保守结构区域;经聚类分析,小型猪和狗的CYP3A与人有较近的进化关系;通过同源建模法对其在线建模,人CYP3A4晶体结构作为其模建模型,得到了其经典的三维结构。结论在猪CYP3A家族四个基因中,CYP3A88在序列和高级结构上均与人CYP3A4的最为相似。

良附丸治疗胃寒型功能性消化不良的药效学研究

目的探讨良附丸治疗胃寒型功能性消化不良(FD)的药效学及作用机制。方法采用小鼠胃肠排空实验考察良附丸对胃肠运动的影响;采用小鼠醋酸扭体法、甲醛致痛法考察良附丸的镇痛作用。SPF级大鼠72只,随机分为正常对照组,模型对照组,良附丸小、中、大剂量组,莫沙必利组,除正常对照组其余均构建胃寒型FD大鼠模型,造模结束后,各组给予相应药物治疗7 d。记录大鼠的一般情况,进行糖水偏好实验、旷场实验和胃肠运动实验;采用酶联免疫吸附测定实验(ELISA)检测5-羟色胺(5-HT)、胃动素(MTL)、血管活性肠肽(VIP)、P物质(SP)的含量,透射电镜观察胃窦、结肠组织中嗜铬细胞,免疫组化(IHC)法观察胃窦及空肠组织中5-HT的表达。结果与正常对照组比较,良附丸组小鼠疼痛显著缓解,胃排空率及小肠推进率升高;在胃寒型FD大鼠中,与模型对照组比较,良附丸组的一般情况明显好转,进食量、饮水量呈明显上升趋势,糖水偏好百分率和旷场实验得分均显著增高,MTL和SP的含量均显著上升,VIP显著下降,胃肠组织中的嗜铬细胞增多,5-HT阳性表达显著增加。结论良附丸对FD具有潜在的治疗作用,其作用机制可能与调控脑肠肽尤其是5-HT水平有关。

下调PTEN基因对偏头痛大鼠三叉神经节CREB的调节作用

本研究利用RNAi重组腺病毒(AdR-siPTEN)下调偏头痛大鼠三叉神经节的PTEN(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten)基因,探讨其对偏头痛大鼠行为学的影响,以及经Akt(serine-threonine kinase)信号途径对CREB(cAMP responseelement-binding protein)的调控情况。实验采用健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组(Sham)、硝酸甘油模型组(GTN)、Ad-RFP非特异siRNA处理空载体对照组(Vehicle+GTN)、AdR-siPTEN下调组(AdR-siPTEN+GTN)。用AdR-siPTEN重组腺病毒对大鼠进行预处理,然后通过硝酸甘油(glyceryl trinitrate,GTN)法建立大鼠偏头痛模型,进行大鼠挠头和爬笼次数的检测,并用RT-PCR和Western-blot法进行相关基因的mRNA和蛋白检测。结果表明,当PTEN基因表达下调时,有效缓解了偏头痛导致的挠头和爬笼行为,并激活Akt信号途径,增加其下游作用因子CREB的表达,进而可能经"PTEN/Akt/CREB"信号通路影响神经突触可塑性,参与了偏头痛的发病机制。

慢性鼻窦炎患者金黄色葡萄球菌耐药性分析

目的了解慢性鼻窦炎患者分离的金黄色葡萄球菌耐药情况。方法收集慢性鼻窦炎患者标本,进行金黄色葡萄球菌培养及分离纯化,表征患者病灶部位及菌株,K-B法分析其耐药性,PCR检测耐药基因。结果金黄色葡萄球菌是引发慢性鼻窦炎患者发生感染的原因及主要病原菌。药敏试验显示金黄色葡萄球菌对阿米卡星、苯唑西林、四环素、红霉素、万古霉素、环丙沙星、替考拉宁、克林霉素、利福平、庆大霉素的耐药率、中介率及敏感率分别为14.94%、39.08%、37.93%、59.20%、0.00%、31.03%、0.00%、47.70%、17.82%、45.98%,10.92%、0.00%、5.17%、1.72%、0.00%、2.87%、0.00%、9.20%、0.00%、6.90%和74.14%、60.92%、56.90%、39.08%、100.00%、66.09%、100.00%、43.10%、82.18%、47.13%。PCR扩增ermA、ermC、qacA、ermB、aac(6')/aph(2')、mecA基因大小分别为421、572、629、359、220和162bp,且其基因检出率分别为21.26%、10.92%、16.09%、35.06%、29.89%、43.10%。结论金黄色葡萄球菌是引发慢性鼻窦炎患者感染的主要病原菌,药敏试验显示其对万古霉素和替考拉宁敏感。

高良姜不同部位胃肠解痉及镇痛作用的比较研究

目的比较高良姜水煎液及不同部位(黄酮、二芳基庚烷、挥发油)的胃肠解痉及镇痛作用,为探讨高良姜调理脾胃的药效物质基础提供依据。方法采用小肠炭末推进法观察高良姜不同部位对正常小鼠小肠运动的影响;以冰番泻叶致小鼠脾胃虚寒泄泻模型考察其抗寒证腹泻作用;采用扭体法及甲醛致痛法考察其镇痛作用;采用兔体外回肠试验观察其对正常肠肌收缩和氯化乙酰胆碱(Ach)、氯化钡(BaCl2)所致体外肠肌收缩及对Ach诱导兔回肠平滑肌内钙释放和外钙收缩的解痉作用。结果高良姜水煎液、黄酮部位、二芳基庚烷部位能明显降低脾胃虚寒小鼠的腹泻指数(P<0.01,P<0.05);仅黄酮部位高剂量对正常小鼠小肠推进运动有明显抑制(P<0.05);高良姜水煎液、黄酮部位、二芳基庚烷部位能不同程度减少小鼠的扭体次数,缩短甲醛致痛后小鼠舔后足时间(P<0.01,P<0.05),其中二芳基庚烷部位作用最强;高良姜水煎液、黄酮部位、二芳基庚烷部位能明显抑制正常情况下体外肠收缩(P<0.01,P<0.05);高良姜3个提取物的低、中、高浓度组对Ach、BaCl2所引起的体外肠收缩均有明显抑制作用(P<0.01,P<0.05),抑制率与药物终浓度呈一定量效关系;对Ach诱导兔回肠平滑肌内钙释放和外钙收缩均有明显抑制作用(P<0.01,P<0.05)。结论高良姜黄酮部位和二芳基庚烷部位为其解痉止痛治疗脾胃寒证相关疾病的主要有效部位,其中胃肠解痉作用以黄酮类较强,镇痛作用则以二芳基庚烷部位更强。

基于网络药理学及实验验证探讨良附丸治疗功能性消化不良的作用机制

采用网络药理学方法及分子对接技术探析良附丸治疗功能性消化不良(functional dyspepsia, FD)潜在的作用机制,并通过动物实验研究良附丸对FD大鼠的干预作用及机制。利用TCMSP数据库(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform)获取和筛选良附丸的活性成分,利用SwissTargetPrediction数据库预测药物的作用靶点,通过GeneCards数据库检索FD相关靶点;药物与疾病靶点相交集后,导入STRING数据库检索蛋白互作关系,筛选关键靶点,利用DAVID数据库进行GO(Gene Oncology)生物过程分析和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)通路富集分析,最后借助AutoDock Tools软件进行分子对接,预测良附丸有效成分与关键靶点的结合度。网络药理学筛选出良附丸的活性成分19个及与FD相关的靶点591个,其中交集靶点253个;GO和KEGG富集分析发现良附丸主要与药物反应、转录的负调控、细胞凋亡的正调控、细胞表面受体信号通路等生物过程有关,富集在HIF-1信号通路、5-羟色胺能突触、TNF信号通路、cAMP信号通路、钙信号通路、TRP通道的炎症介质调节等。分子对接结果显示良附丸关键有效成分与靶点MAPK1、AKT1、TRPV1、HTR1A、HTR2A均有一定的结合活性。动物实验构建FD大鼠模型,造模成功后给予良附丸治疗7 d,检测结果显示,良附丸组能显著缓解FD大鼠的症状,且明显升高5-HT的表达水平,下调TRPV1的表达。通过网络药理学、分子对接分析和实验验证,证明良附丸对功能性消化不良的改善具有多成分、多靶点的特点,为进一步的良附丸治疗功能性消化不良机制研究及临床应用提供了依据。

胃寒型功能性消化不良大鼠模型的构建

目的:探讨胃寒型功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)模型的构建及方法学比较。方法:SD大鼠分成5组,除空白对照组,其余四组在夹尾和不规则饮食刺激基础上,分别予以不同温度的稀盐酸或生理盐水建立FD模型,连续干预2 w;检测大鼠的一般情况、体质量及饮水量、摄食量、行为学指标(糖水消耗百分率和旷场得分)、胃排空率和小肠推进率、胃肠组织病理形态、血清5-HT含量等,比较各模型的特点。结果:与正常对照组比较,凉HCl组和冰NaCl组的一般情况及体质量变化较明显(P<0.05或P<0.01);与正常对照组比较,凉HCl组和冰NaCl组大鼠的糖水消耗百分率和旷场得分均明显降低(P<0.05或P<0.01),胃排空率、小肠推进率和5-HT含量显著下降(P<0.01)。结论:四种造模方法均能模拟出FD模型症状,其中“夹尾刺激法+不规则饮食复合凉HCl”组、“夹尾刺激法+不规则饮食复合冰NaCl”组这两种模型总体比较稳定,前者比较适合制作肝郁脾虚(寒)证FD模型,后者更适合制作胃(实)寒型FD模型。

多枝雾水葛凝胶膏剂抗皮肤感染的药效学研究

目的:研究多枝雾水葛凝胶膏剂(Pouzolzia zeylanica var.microphylla gel,PZG)对皮肤感染性疾病的治疗作用。方法:建立金黄色葡萄球菌诱导的小鼠皮下脓肿模型和大鼠皮肤创伤性感染溃疡模型,通过检测体质量、皮肤脓肿体积或溃疡面积愈合率、皮肤细菌逆培养和局部皮肤病理形态、羟脯氨酸、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-10(interleukin-10,IL-10)含量等指标,考察PZG对感染性皮下脓肿和皮肤溃疡的治疗作用。结果:PZG能显著缩小皮下脓肿体积,提高皮肤溃疡面积愈合率,且有一定的量效关系;PZG可抑制皮肤感染部位的细菌生长,改善局部皮肤病理形态;PZG可降低溃疡部位TNF-α和IL-10水平,增加组织中羟脯氨酸的含量,促进溃疡愈合。结论:中药有效部位制剂PZG具有良好的抗皮肤感染作用,机制可能与其综合的抗菌、抗炎作用有密切关系。