体外颗粒细胞培养中抗苗勒管激素与卵泡刺激素受体mRNA表达的相关性

目的体外培养小鼠原代颗粒细胞培养液中,加入不同浓度的抗苗勒管激素(AMH),比较各组间小鼠颗粒细胞上卵泡刺激素受体(FSHR)mRNA的表达情况,探讨体外培养颗粒细胞中AMH与FSHR mRNA表达的关系。方法选取4～5周的昆明雌性小鼠,腹腔注射孕马血清促性腺激素,48～54 h后颈椎脱臼法处死小鼠,取双侧卵巢,采用机械分离法释放颗粒细胞,胰蛋白酶消化细胞,低速离心分离细胞,用含15%胎牛血清的DMEM/F12培养基置于37℃、5%CO2培养箱中培养。显微镜观察细胞形态,流式细胞术分离细胞,并用免疫荧光法对所培养的颗粒细胞进行鉴定。同时在体外培养的小鼠原代颗粒细胞培养液中加入不同浓度(5、10、20、30、40ng/mL)的AMH,测定每组培养基中AMH的终浓度,并用荧光定量PCR技术检测每组颗粒细胞中FSHR mRNA的表达。结果分离培养的颗粒细胞纯度大于80%;随AMH浓度加大,小鼠颗粒细胞中FSHR mRNA的表达逐渐降低,当AMH浓度为5和10 ng/mL时,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),且5 ng/mL浓度组颗粒细胞上FSHR mRNA的表达量最高。结论用机械分离加胰酶消化加低速离心能得到纯度较高活性很好的颗粒细胞,用FSHR鉴定颗粒细胞是一种简便易行的方法,AMH浓度与颗粒细胞上FSHR mRNA表达呈一定负相关,表明AMH有可能通过抑制FSHR表达降低FSH敏感性,从而参与卵巢早衰的病理生理过程。

卵巢早衰小鼠中抗苗勒管激素与卵泡刺激素受体相关性的研究

目的探讨卵巢早衰(POF)小鼠中抗苗勒管激素(AMH)与卵泡刺激素受体(FSHR)的关系。方法以小鼠透明带3(ZP3)的第330～342个氨基酸序列所合成的透明带多肽为免疫原,免疫SPF级Balb/c雌性小鼠,皮下多点注射建立POF模型。放射免疫法测定模型组及对照组小鼠外周血FSH、雌二醇(E_2)的水平,酶联免疫法测定外周血AMH、抗透明带抗体(AzpAb)的水平,HE染色观察卵巢组织的变化,并用免疫组化方法分析卵巢颗粒细胞中FSHR的表达。结果 POF小鼠较正常小鼠外周血的FSH升高,E_2值降低,AMH值降低,AzpAb值升高。POF小鼠卵巢的HE染色病理切片见卵泡闭锁,正常发育的卵泡甚少。免疫组化分析,FSHR仅在颗粒细胞上表达,且POF小鼠卵巢上FSHR的表达明显少于正常组。结论 FSHR仅在颗粒细胞上表达,POF小鼠中各级卵泡的FSHR表达均降低,POF小鼠伴低浓度AMH,且FSHR的表达随AMH降低亦降低。

PCOS大鼠卵巢AMH表达与IR的相关性研究

目的:探讨多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠卵巢局部和单卵泡中抗苗勒管素(Anti-Mullerian hormone,AMH)表达和胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)之间的相关性。方法:孕激素联合促绒毛膜性腺激素(Human chorionic gonadotropin,HCG)法制作PCOS大鼠模型,根据胰岛素抵抗稳态模型(Homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)值筛选实验对象。将其分为:PCOS无IR组,PCOS合并IR组和对照组。采用免疫组织化学法对不同组大鼠的卵巢组织局部和单卵泡进行胰岛素受体(Insulin receptor,Ir)和AMH表达强度计算阳性单位行半定量分析。结果:对照组、PCOS无IR和PCOS合并IR组三组相比,血清空腹胰岛素(Fasting insulin,Fins)均有显著性差异(P<0.05);三组间卵巢局部AMH表达呈递增型阶梯样分布(P<0.05);而Ir表达无统计学差异(P>0.05);卵巢局部AMH和Ir表达的相关性分析显示二者无明显相关性(r=0.000,P>0.05);在单卵泡的表达中,三组的AMH及Ir表达强度均无统计学差异(P>0.05);相关性分析显示AMH与Ir表达强度无明显相关性(r=0.011,P>0.05)。结论:PCOS卵巢局部AMH的高表达与高胰岛素血症的发生具有相关性,二者的相互作用可能与PCOS的高雄激素特征有关。

生长分化因子-9在高雄激素多囊卵巢综合征大鼠模型中的表达

目的:探讨生长分化因子-9(GDF-9)及其mRNA在高雄激素多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型中的表达。方法:43只雌性SD大鼠随机分组,实验组大鼠皮下注射脱氢表雄酮建立PCOS动物模型;采用放射免疫法测定血清性激素水平,结合大鼠模型卵巢组织HE染色的病理结构改变进行模型验证;采用免疫组织化学法检测大鼠卵巢组织GDF-9表达及定位,蛋白印迹法进一步观察GDF-9表达变化;逆转录PCR法检测GDF-9mRNA表达。结果:血清性激素水平及HE染色病理结果均提示模型建立成功。免疫组织化学结果显示实验组卵泡中GDF-9表达增强,卵巢间质GDF-9表达下降,实验组和对照组间卵泡和间质灰度值差异均有统计学意义(P<0.05)。蛋白印迹检测及PCR结果提示实验组GDF-9蛋白表达下降,而GDF-9mRNA表达与对照组比较无差异。结论:GDF-9表达及分布改变可能是PCOS发生发展的重要原因。

多囊卵巢综合征大鼠卵巢smad3的表达及其组织病变的观察

目的定量分析卵巢血管密度,探讨多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢smad3的表达与体积增大、微血管密度增加等病理改变的相关性。方法皮下注射脱氢表雄酮法建立PCOS大鼠病理模型,动情间期取卵巢组织后称重;免疫组织化学法检测smad3在卵巢组织中表达,anti-CD34标记卵巢微血管,并进行定量分析;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢smad3的表达;逆转录聚合酶连反应(RT-PCR)法检测smad3 mRNA在卵巢组织中的表达。结果免疫组织化学检测显示:与对照组比较,实验组卵泡smad3表达减弱,卵巢间质表达增强(P<0.05),在各级卵泡及间质均有表达。实验组卵巢体积增大,卵巢间质微血管的密度增加(P<0.05);Western blot检测结果提示在实验组smad3表达上调;RT-PCR结果显示实验组卵巢组织中smad3 mRNA表达与对照组无显著性差异(P>0.05)。结论 PCOS卵巢间质平均血管密度增加,smad3的表达变化可能与PCOS特殊卵巢病理改变有关。

葛根素治疗心力衰竭的临床疗效观察

目的:探讨葛根素注射液治疗心力衰竭的疗效。方法:对照组心力衰竭患者42例,用常规强心利尿,扩张血管及血管紧张素转换酶抑制剂等抗心衰药物治疗。治疗组43例,在常规治疗的基础上加用葛根素注射液250m l。结果:对照组显效12例,有效20例,无效10例,总有效率76.19%。治疗组显效24例,有效16例,无效3例,总有效率93.02%。结论:治疗组疗效明显高于对照组,葛根素注射液是治疗心衰安全有效的药物。

思想品德课因融于生活而精彩——陶行知教育理论在初中思想品德课教学中的运用

我国著名的教育家陶行知提出了"生活教育"理论。通过学习,笔者认识到思想品德课应以中学生的生活经验为基础,教学要联系生活实际。在文中,笔者就在教学实践中如何使思想品德课渗透生活理念、焕发生命活力这一问题提出了自己的设想和做法。

胎盘间叶发育不良伴活产临床病理分析

目的探讨胎盘间叶发育不良(placental mesenchymal dysplasia,PMD)的发病机制、临床及病理特点。方法回顾性分析三例PMD患者临床及病理资料。结果其患者年龄分别为36岁、31岁及33岁;其孕期分别为孕39周、37周及38周,均行剖宫产,各产一活女婴。其中两婴儿为低体重儿。胎盘送病理检查,镜下均可见病变部分绒毛干呈囊状扩张,干绒毛见血管明显增粗,血管壁增厚,绒毛间质疏松、黏液样改变,部分绒毛水肿变性改变,无滋养叶细胞增生,终末绒毛结构正常。病理诊断PMD。结论胎盘间叶发育不良病变范围大小可能是影响胎儿体重的重要因素。PMD的发病机制及生物学基础不明确,需待进一步研究,详细的组织学对于确诊及鉴别诊断是必不可少的。

广州、深圳市流动人口生殖健康服务利用现状分析

目的 了解广州市8个城区和深圳市6个城区流动人口生殖健康服务利用现状。方法 采用匿名问卷的方式对广州和深圳二市14个区的4365名15～45岁流动人口的生殖健康服务利用相关问题进行横断面调查。结果 获取有效问卷4332份。流动人口平均年龄28.81岁,以30岁以下人群居多;文化程度以初中文化为主(50.55%),总体上未婚流动人口文化程度高于已婚流动人口(P<0.05);二市外来人口的来源地主要以广东本省和湖南省为主;52.8%的流动人口得到计划生育机构提供的生殖健康知识服务;对免费提供避孕知识的场所已婚人群知晓率为67.4%,未婚人群为34.2%(P<0.05);对免费提供避孕药具服务场所已婚人群知晓率为65.2%,未婚人群为31.7%(P<0.05);对免费提供生殖健康检查场所已婚人群知晓率为68.0%,未婚人群为29.7%(P<0.05);女性流动人口中有60.3%得到过计划生育服务机构或计划生育部门组织的免费生殖健康检查,2.1%得到收费生殖健康检查,37.9%从未得到过检查;5.8%的人得到五项生殖健康检查服务,94.2%的人仅得到部分项目服务。结论 流动人口对生殖健康服务利用不高,提示各级机构要进一步加强对生殖健康知识宣传的覆盖面和服务项目的落实。

广州市天河区流动人口生殖健康现状调查

目的了解广州市天河区流动人口的生殖健康现状。方法采用匿名问卷的形式对广州市天河区1244例15～45岁流动人口的生殖健康知识、态度、行为以及主要生殖健康问题进行横断面调查。结果获取有效问卷1206份。受调查的流动人口平均年龄为29.82岁;文化程度主要是初中及以下(58.1%);职业以工人、商贸餐饮业和社会服务业为主(80.6%);流动人口对受孕知识知晓率不高,正确率仅占44.9%,已婚人群正确率远高于未婚人群(P<0.05);流动人口对艾滋病3种传播途径回答正确率为56.4%,非传播途径回答正确率为33.5%;已婚人群和未婚人群对计划生育服务政策知晓率分别为69.0%和42.6%(P<0.05);已婚人群进行生殖健康咨询的比例高于未婚人群(P<0.05);未婚女性和男性在避孕措施上主要选择使用避孕套(分别占75.2%和89.1%);绝大多数已婚女性(94.0%)和已婚男性(93.9%)采取的前三位避孕措施为宫内节育器、输卵管结扎、避孕套。结论流动妇女对生殖健康相关知识及政策了解不足,自我保健意识薄弱。积极采取有效措施提高流动已婚妇女的生殖健康认知水平是迫切需要解决的问题。

广州市流动人口生殖健康服务满意度调查

目的对广州市流动人口及计划生育服务人员进行生殖健康服务满意度调查与分析,为进一步提高流动人口生殖健康服务水平提供建议。方法采用完全随机的方法,在2006年对广州市八个城区的2565名流动人口进行问卷调查,获得有效问卷2473份;对计划生育服务机构人员进行专题调查。结果超过60%的流动人口对宣传教育服务、生殖健康检查服务、计生办环境、计划生育工作人员服务态度等方面的生殖健康服务评价都非常满意或满意。各区对流动人口和户籍人口生殖健康服务的人员和财政投入存在显著区别。基层计划生育工作人员对同事关系融洽度、工作条件、能力发挥和奖励机制等满意度高(P<0.05);而对提升机会、培训机会和流动人口配合度等三方面满意度较差(P<0.05)。结论加大对流动人口的投入,使其获得与户籍人口相等的待遇;增加计划生育服务人员的培训机会,从而提高其服务技术水平,有利于完善流动人口生殖健康服务体系。

广州、深圳市流动人口生殖健康服务利用影响因素分析

目的:了解广州市8个城区和深圳市6个城区流动人口生殖健康服务利用的影响因素,为制定促进流动人口生殖健康服务利用的干预措施提供依据。方法:采用完全随机和整群抽样相结合的方法对外来务工人员进行问卷调查,利用SPSS 12.0统计软件对数据进行描述性分析和对应分析。结果:获取有效问卷4 332份,深圳市1 859人,广州市2 473人。流动人口平均年龄为28.81岁,56%为30岁以下。暂住城市、人群类别、对生殖健康检查场所及计生政策的知晓度是流动人口获得生殖健康检查的主要影响因素;暂住城市、人群类别、务工时间、文化程度、受孕知识是流动人口获得避孕方法指导的主要影响因素;暂住城市、文化程度、对免费避孕药具场所的知晓度是流动人口获得免费避孕药具的影响因素;暂住城市、年龄、务工时间、文化程度及对计划生育服务政策的了解程度是流动人口查孕、查环的影响因素。结论:流动人口对生殖健康服务利用不高,各级计划生育服务机构需加强生殖健康知识宣传及提供全方位的服务,激发流动人口对自身生殖健康服务的需求。