EASIX在弥漫大B细胞淋巴瘤中的预后价值评估:一项淮海淋巴瘤协作组的多中心回顾性研究

目的探讨内皮活化和应激指数(EASIX)对初诊弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者预后的价值。方法选取2008年8月—2022年3月在淮海淋巴瘤协作组中6家医疗中心诊断为DLBCL的580例患者,收集临床资料进行回顾性分析。基于MaxStat统计量确定EASIX的最佳截断值。使用Cox比例风险模型进行单因素和多因素分析,确定影响DLBCL患者生存结局的变量。使用Kaplan-Meier生存曲线进行预后分析。结果580例患者中男性294例(50.7%),中位年龄(60.32±13.36)岁,总体5年OS率为56.4%。基于MaxStat统计量计算出EASIX的最佳截断值为1.17。多因素分析显示EASIX、年龄、血红蛋白、中枢累及、Ann Arbor分期是DLBCL患者的独立危险因素(P<0.05)。亚组分析结果表明,EASIX可以对BCL-2-和BCL-2+组、BCL-6-和BCL-6+组、GCB和非GCB组、ECOG PS评分<2分和≥2分组、Ann ArborⅠ/Ⅱ期和Ⅲ/Ⅳ期、IPI评分LR/LIR和HIR/HR组以及NCCN-IPI评分LR/LIR和HIR/HR组的患者进行预后再分层。结论高EASIX(>1.17)与初诊DLBCL患者的不良预后有关,且EASIX能对不同亚组的患者进行准确的预后分层。

CD70在初诊弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及临床意义

目的 分析CD70在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达情况,并探讨其与临床预后的相关性。方法 选取2017年1月—2021年12月蚌埠医学院第一附属医院收治的初诊DLBCL患者116例,收集临床资料进行回顾性分析。检测肿瘤组织中CD70的表达情况,分析CD70表达在DLBCL患者中的临床意义。结果 116例DLBCL患者中CD70阳性表达率为80.17%,其表达与中期评估疗效、有无B症状、骨髓是否受累、Ann Arbor分期相关(P<0.05),而与性别、年龄、乳酸脱氢酶(LDH)、β2-微球蛋白(β2-MG)、B细胞淋巴瘤因子-2(BCL-2)、BCL-6、Ki-67、Hans分型、原发部位、国际预后指数(IPI)评分无显著相关性(P>0.05)。生存分析显示,CD70阳性组与CD70阴性组无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)比较,差异有统计学意义(P<0.05),CD70阳性组患者预后更差。单因素分析显示,中期评估疗效、LDH、β2-MG、Ki-67、Hans分型、Ann Arbor分期、IPI评分及CD70表达影响患者预后。多因素分析显示,中期评估疗效、Ki-67、Hans分型、CD70是患者PFS的独立预后因素,中期评估疗效、β2-MG、Ki-67、Hans分型和CD70是患者OS的独立预后因素。结论 CD70在DLBCL中呈高表达,且与不良预后密切相关。

血红蛋白水平在弥漫大B细胞淋巴瘤中的预后评估价值

目的探讨血红蛋白(HGB)水平对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者的预后判断价值。方法回顾性收集2013年3月—2022年7月淮海淋巴瘤协作组中6家医疗中心总计848例DLBCL患者的临床资料。基于最大选择秩统计量(Maxstat)确定血红蛋白的最佳截断值,根据截断值将患者分为2组;采用倾向性评分匹配(PSM)将2组患者进行1∶1最邻近匹配;使用Cox比例风险模型进行单因素和多因素分析;Kaplan-Meier用于绘制生存曲线,组间比较采用Log-rank检验。结果患者的中位年龄为61岁(15~91岁),男性患者占比50.8%,5年生存率为64.8%。血红蛋白的最佳截断值为110 g/L,据此截断值将患者分为2组(HGB<110 g/L组和HGB≥110 g/L组)。经PSM分析后,2组间除了白蛋白水平的差异有统计学意义(P<0.05),其余各变量差异均无统计学意义(P>0.05)。多因素分析表明,血红蛋白水平、年龄、中枢受累和B细胞淋巴瘤因子-2(BCL-2)表达是影响DLBCL患者预后的独立因素。此外,在BCL-2+组、BCL-6-组、CD5+组、非生发中心B细胞起源(Non-GCB)组、美国东部肿瘤协作组体力状况(ECOG PS)评分<2组和国际综合癌症网络国际预后指数(NCCN-IPI)中高危组中,低血红蛋白水平的患者预后较差。结论低血红蛋白水平是DLBCL患者预后不良的影响因素。

不同因素对煤粉云燃爆危险性参数的影响实验研究

为了研究煤粉云燃爆危险性参数的影响因素,采用Godbert-Greenwald恒温炉测试不同粒径、质量浓度和喷粉压力3种影响因素下煤粉云的最低着火温度。结果表明:最低着火温度随粒径增大而升高;最低着火温度在煤粉质量浓度为0.250~0.667 kg/m^(3)的范围内随质量分数的增加而降低,最小值为545℃;最低着火温度随喷粉压力的增大呈“V”字形变化;3种影响因素对最低着火温度的影响强弱程度为质量分数>喷粉压力>煤粉粒径。

基于Donabedian三维质量理论构建嵌合抗原受体T细胞治疗恶性血液病护理质量评价指标体系的研究

目的构建嵌合抗原受体T细胞治疗恶性血液病患者护理质量评价指标体系,为临床系统且科学地管理护理工作及评价其护理质量提供可靠依据。方法以Donabedian三维质量理论模式为框架,通过文献法、访谈法及专家论证法制定评价指标体系初稿,采用Delphi专家函询法及层次分析法确定各指标及权重。结果两轮Delphi专家函询的有效回收率分别为96.15%和100%,专家权威系数为0.862和0.901,Kendall's和谐系数为0.345和0.201。最终确立一个包含3个一级指标、12个二级指标及54个三级指标的嵌合抗原受体T细胞治疗恶性血液病患者护理质量评价指标体系。结论基于多种研究方法构建的嵌合抗原受体T细胞治疗恶性血液病护理质量评价指标体系具有科学性及可靠性,能较为全面地衡量嵌合抗原受体T细胞治疗恶性血液病护理质量,为评价、改善其护理质量提供依据。

血小板数量的动态变化在预测急性髓系白血病诱导化疗后完全缓解中的意义

目的研究血小板（platelet，PLT）数量变化在预测急性髓系白血病患者完全缓解中的意义。方法回顾性分析58例接受诱导化疗的急性髓系白血病患者（其中初诊患者49例，再诱导9例）在接受化疗后PLT水平的动态变化。以血常规、骨髓细胞学等检查作为评估患者完全缓解的依据。分析PLT数量在化疗后回升的时间及数量的动态变化和完全缓解的相关性。结果在骨髓恢复早期，38例达完全缓解的患者中，36例达完全缓解患者PLT〉20×10^9／L；而20例未达到完全缓解患者中，仅3例PLT〉20×10^9/L（P〈0．05）；其中，16例达完全缓解患者PLT〉50×10^9／L，未达完全缓解组均未〉50×10^9／L（P〈0．05）。通过动态监测化疗前后PLT的变化，在骨髓功能恢复早期以及完全恢复期，完全缓解组38例患者的PLT计数均明显高于未缓解组20例患者的PLT计数（P〈0．05）。结论PLT数量的动态变化对于预测急性髓系白血病造血功能恢复和完全缓解有重要的意义。

幽门螺杆菌检测在免疫性血小板减少症治疗中的临床意义

目的探讨幽门螺杆菌（HP）对免疫性血小板减少症（ITP）治疗效果的影响。方法113例成人初诊ITP患者分为HP检测组52例（检测组）、HP未检测组61例（未检测组），^14C呼气试验对检测组52例进行HP检测后分为HP（＋）组、HP（-）组。所有患者给予糖皮质激素泼尼松进行ITP治疗（1mg·kg^-1·d^-1，顿服），检测组中HP（＋）患者同时给予抗HP治疗（三联方案，阿莫西林0．5g，bid；奥美拉唑20mg，bid；克林霉素0．5g，bid）。检测不同时点患者血小板计数、CD8淋巴细胞，治疗6个月后评价各组治疗效果。结果113例患者的总有效率为70．80％，未检测组为55．74％，检测组为88．46％（P〈0．05）。检测组中，HP（-）和HP（＋）在治疗2周后血小板计数显著上升，与治疗前及治疗1周时血小板计数比较差异具有统计学意义（P〈0．05）；HP（-）和HP（＋）的治疗有效率及复发率均无统计学差异。未检测组治疗2周后血小板计数与治疗前及治疗1周时比较亦升高，但明显低于检测组（P〈0．05）；6个月复发率增高（P〈0．05）。检测组中，HP（＋）组治疗前CD8比例增高比率大于HP（-）组，治疗后CD8比例恢复率亦大于HP（-）组。未检测组CD8比例增高率及CD8比例恢复率与检测组总体无差别（P〉0．05）。结论HP阳性在ITP中有较高的发生率，对于HP阳性患者进行抗HP治疗可以显著提高ITP疗效。

has-miR-150对Jurkat细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的:本研究旨在探讨has-miR-150对人急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞株Jurkat细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:通过构建慢病毒载体过表达miR-150并感染Jurkat细胞,另设空白组和阴性对照组,应用实时定量PCR法检测miR-150的表达;应用CCK-8法和流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡情况,Western blot法检测细胞PI3K/Akt信号通路相关信号分子的蛋白表达。结果:构建的慢病毒载体过表达miR-150后感染Jurkat细胞,has-miR-150表达升高约2.06倍(P<0.05);与阴性对照相比,过表达miR-150后Jurkat细胞增殖能力明显下降(P<0.01),凋亡数明显增多(P<0.01),p-Akt及p-p65蛋白的表达明显下调,Akt蛋白的表达无明显变化。结论:过表达has-miR-150可以有效抑制Jurkat细胞的增殖并诱导其凋亡,对T-ALL可能具有潜在的抑癌作用,其机制可能与负调控PI3K/Akt/NF-κB信号通路有关。

不同剂量地塞米松联合硼替佐米、表柔比星治疗多发性骨髓瘤疗效比较

目的探讨不同剂量地塞米松联合硼替佐米及表柔比星（PAD）方案治疗多发性骨髓瘤（MM）的疗效及安全性。方法96例初诊MM患者给予地塞米松[40mg（PADl组）或20mg（PAD2组），第1～4天静脉注射]、表柔比星（9—10mg／m2，第1～4天静脉注射）、硼替佐米（1．3mg／m2，第1、4、8、11天皮下注射）治疗，治疗4～6个疗程。观察患者的疗效和不良反应。结果PAD方案化疗4个疗程后，2组患者的总体治疗反应率、深度反应率（CR＋VGPR）差异均无统计学意义（P〉0．05）；化疗结束后随访1年，PAD1组与PAD2组1年无事件生存率（EFS）分别为56．7％、56．4％，2组差异无统计学意义（P=0．959），总生存率（OS）均为100％。白细胞、血小板减少和贫血发生率2组差异均无统计学意义（P〉0．05）；由硼替佐米诱导的周围神经炎2组间差异亦无统计学意义；PAD1组患者感染、低钾及腹胀发生率均高于PAD2组，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论减低地塞米松剂量的PAD方案治疗初诊MM患者的疗效反应与标准剂量组类似，但患者对减低剂量PAD方案具有更好的耐受性。

小鼠adam10基因启动子克隆和双荧光素酶报告基因系统构建及鉴定

本研究旨在克隆小鼠adam10基因启动子,构建以adam10基因启动子为启动序列的双荧光素酶报告基因系统并分析其活性,为研究adam10基因转录调控提供有效工具。以BALB/c小鼠脑组织为模板,采用PCR方法克隆小鼠adam10基因启动子序列至pCR-Blunt载体,酶切后连接至荧光素酶报告质粒pGL4.10启动子区域,构建重组荧光素酶报告质粒pGL4.10-adam10,采用阳离子脂质体法与阳性对照质粒pGL4.74共转染真核细胞293FT,以离子霉素刺激为刺激组、DMSO为未加干预组,同时以不含启动子的pGL4.10与阳性对照质粒pGL4.74共转染组为阴性对照组,化学发光仪检测荧光强度及比例。结果表明,酶切及测序验证克隆的adam10启动子序列正确且无突变,构建的重组荧光素酶报告质粒pGL4.10-adam10与阳性对照质粒pGL4.74载体成功共转染293FT细胞,pGL4.10-adam10转染细胞后具有转录活性。离子霉素刺激组活性明显高于DMSO组,荧光比值约为DMSO组2倍(P<0.05),阴性对照组不具备转录活性。结论:成功克隆了adam10启动子并构建了重组荧光素酶报告质粒pGL4.10-adam10,离子霉素可增强adam10基因启动子转录活性。

过表达CXCR4基因的小鼠骨髓间充质干细胞建立及其功能评价

本研究旨在建立稳定表达小鼠CXC型趋化因子受体4(CXC chemokine receptor type 4,CXCR4)基因的小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)并研究其功能。采用脂质体转染法将重组慢病毒表达载体LV-CXCR4-IRES-EGFP与包装质粒pMD2.G及包膜蛋白质粒pSPAX2共转染293FT包装细胞,应用超速离心法浓缩病毒颗粒;通过调整感染复数(MOI)、感染时间、促进病毒吸附等方法优化慢病毒感染小鼠MSC的条件,建立过表达CXCR4的MSC,采用荧光显微镜观察EGFP表达,流式细胞术检测细胞表面CXCR4表达,绘制细胞生长曲线检测增殖能力,Annexin-Ⅴ和7-AAD双染后应用流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测迁移能力。结果发现,通过优化感染条件,重组慢病毒载体对MSC可获得较高感染效率,感染后72 h在荧光显微镜下可观察到较强EGFP表达,流式细胞术检测到MSC表面CXCR4的表达明显增加。细胞生长曲线和凋亡实验显示,过表达CXCR4不会显著影响MSC增殖和凋亡。Transwell实验显示过表达CXCR4可增强MSC迁移能力。结论:慢病毒载体可介导外源性基因CXCR4在小鼠MSC高效表达。

EB病毒在结外NK/T细胞淋巴瘤中的预后价值:一项淮海淋巴瘤协作组的多中心回顾性研究

目的 基于倾向性评分逆处理概率加权(IPTW)法评估EB病毒(EBV)在结外NK/T细胞淋巴瘤患者中的预后价值。方法 收集2012年10月—2021年4月淮海淋巴瘤协作组中8家医疗机构初诊为结外NK/T细胞淋巴瘤且具有全血EBV-DNA数据的468例患者的临床资料。采用IPTW法分析EBV载量对结外NK/T细胞淋巴瘤患者生存期的影响;采用Cox比例风险模型进行多因素分析;绘制Kaplan-Meier曲线,组间比较采用Log rank χ~2检验。结果 468例结外NK/T细胞淋巴瘤患者中,EBV-DNA阳性266例,EBV-DNA阴性202例。EBV-DNA阳性组和阴性组患者的5年OS分别为62.5%和89.2%,两组比较,经Log rank χ~2检验,差异有统计学意义(χ~2=42.900,P=0.000)。IPTW前,两组的美国东部肿瘤协作组(ECOG)活动状态(PS)评分(ECOG PS评分)、原发部位、CA分期、Ann Arbor分期、白蛋白、乳酸脱氢酶、治疗方案比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。IPTW后,EBV-DNA阳性组和阴性组组间均衡,EBV-DNA阴性组患者5年OS为90.7%,而EBV-DNA阳性组患者5年OS为63.5%。Cox比例风险模型分析结果 显示,EBV-DNA阳性[■=4.244(95%CI:2.457,7.332)]、ECOG PS≥2分[■=2.020(95%CI:1.171,3.483)]是结外NK/T细胞淋巴瘤患者预后的不良影响因素(P<0.05)。结论 经IPTW法平衡混杂因素后,EBV-DNA阴性患者生存情况明显优于EBV-DNA阳性患者。

多发性骨髓瘤患者血清乳酸脱氢酶和β_2微球蛋白水平的临床意义

目的:探讨多发性骨髓瘤患者(MM)血清乳酸脱氢酶(LDH)和β2微球蛋白(β2-MG)水平测定的临床意义。方法:分别采用速率法和放射免疫法测定35例MM患者和20例健康体检者血清LDH和β2-MG值。结果:分别对不同分期患者血清β2-MG和LDH进行比较,二者表达均为Ⅲ期明显高于Ⅱ期,Ⅱ期明显高于Ⅰ期,Ⅰ期高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。化疗前与化疗后(有效组)患者β2-MG与LDH相比,后组明显低于前组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:β2-MG和LDH水平与MM患者分期相关,可作为判断疗效及预后的相关指标。

外周血淋巴细胞与单核细胞比值在PGI-DLBCL疾病进展中的意义

目的:探讨外周血淋巴细胞与单核细胞比值(lymphocyte to monocyte ratio,LMR)在原发胃肠道弥漫性大B细胞淋巴瘤(primary gastrointestinal diffuse large B cell lymphoma,PGI-DLBCL)疾病进展中的意义。方法:收集本院2011年1月至2015年12月期间经病理学确诊为PGI-DLBCL的43例患者的临床资料,并随访观察患者疾病进展情况,分析LMR与患者2年PFS(%)之间的关系。结果:根据ROC曲线PGI-DLBCL患者LMR最具差异性的界限值为2.6。单因素分析显示,LMR(P<0.05)、大包块病变(P<0.01)和IPI(P<0.05)为影响患者2年PFS(%)的预后因素。COX回归模型多因素分析显示,LMR<2.6[(危险比(RR)=3.083,95%CI1.828-8.313,P<0.01)]、大包块病变(RR=2.718,95%CI1.339-6.424,P<0.05)为2年PFS(%)的不良预后相关因素。结论:LMR<2.6,大包块病变与PGI-DLBCL患者疾病的进展相关。

CD5分子调控套细胞淋巴瘤细胞株对柔红霉素化疗敏感性的机制研究

目的探索CD5分子对套细胞淋巴瘤化疗药物敏感性的影响及其分子机制。方法Crispr／cas9法敲除人源套细胞淋巴瘤细胞株Jeko-1（P）的CD5基因，构建Jeko—1（N）（CD5negative）细胞；RT—PCR检测Jeko-1（P）与Jeko-1（N）细胞CD5-E1A和CD5-E1B表达；以不同浓度柔红霉素处理2种细胞，MTS法检测细胞增殖抑制效应；流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡；Western blot检测细胞凋亡抑制蛋白B淋巴细胞瘤2蛋白（B—celllymphoma-2，Bcl-2）、人粒细胞白血病1蛋白（myeloidcellleukemia-1，Mcl—1）、B淋巴细胞瘤XL蛋白（B—celllymphoma—xl，Bcl—XL）的表达。结果Jeko-1（N）细胞不表达CD5-E1A、CD5-E1B；柔红霉素处理后，Jeko-1（N）细胞抑制率高于Jeko-1（P）细胞，IC50低于Jeko-1（P）细胞（P〈0．05），G0／G1期细胞比例增加，S期细胞比例减少（P〈0．05），24h、48h细胞凋亡率较Jeko-1（P）增加，Bcl-2、Mcl蛋白表达量较Jeko-1（P）细胞无明显变化，凋亡抑制蛋白Bcl—XL表达量上调。结论CD5基因敲除的Jeko-1细胞株通过调控淋巴瘤细胞阻滞于G0／G1期，以及上调Bcl—XL蛋白的表达增强对柔红霉素的化疗敏感性。

载人潜水器母船网络信息系统设计分析

本文结合我国载人深潜科学考察对母船网络信息系统的需求,阐述了载人潜水器母船网络信息系统的设计原则及总体设计方法,并对各分系统设计与实施进行论述,旨在为我国新建载人潜水器母船网络信息系统建设提供参考。

支原体肺炎罕见合并严重自身免疫性溶血性贫血1例并文献复习

目的研究成人支原体肺炎(mycoplasma pneumonia,MP)继发严重自身免疫性溶血性贫血(autoimmune hemolytic anemia,AIHA)的临床特征和治疗方法。方法选取徐州医科大学附属医院血液科收治的1例MP并发AIHA的病例,结合患者诊治经过以及万方和PubMed上检索到的相关文献对其临床特点进行分析。结果患者入院诊断为MP并发溶血性贫血,予支持治疗,抗感染以及免疫抑制治疗后,黄疸渐消退,贫血症状逐渐改善。复查胸部CT:左肺炎症较前明显吸收,血红蛋白(HGB)上升,患者病情好转出院。复习国内外收集到的15例数据较完整的病例,男性6例,女性9例,中位年龄34岁。大部分获得治愈,1例遗留神经功能损伤,1例出现肺栓塞,2例并发溶血性尿毒综合征,1例死于严重的多器官功能衰竭。结论MP伴发AIHA极为罕见,当出现不明原因的贫血、黄疸以及周围循环衰竭等症状时,应警惕溶血性贫血的发生,大部分早期治疗患者预后较好,少数合并严重并发症可致死亡。

肝细胞生长因子真核表达质粒的构建、鉴定及表达

目的克隆人肝细胞生长因子（humanhepatocytegrowthfactor，hHGF）的编码基因，构建真核表达载体，获得hHGF蛋白。方法从含hHGF的人肝脏组织总RNA中，利用RT—PCR方法扩增出hHGFcDNA；利用TA克隆技术，将该基因片段克隆至真核表达载体pcDNA3．1＋质粒，转化E．coliDH5a细胞，鉴定pcDNA3．1＋-hH—GF重组质粒。将重组质粒pcDNA3．1＋-hHGF转染293T细胞，应用ELISA方法检测hHGF在293T细胞中的表达。结果①测序结果证实本实验克隆的基因与人HGF基因序列-致。②重组质粒pcDNA3．1＋-hHGF是具有表达功能的真核表达质粒。③pcDNA3．1＋-hHGF转染293T细胞，于转染后12、24、48、72h均能检测到hH-GF表达。结论成功构建hHGF真核表达载体，获得分泌性hHGF蛋白。

预缺血处理通过增强nNOS磷酸化对缺血性脑损伤的保护作用

目的观察预缺血处理对脑缺血／再灌注后神经型一氧化氮合酶（nNOS）磷酸化的影响及其具体的分子信号机制。方法制备SD大鼠大脑四动脉结扎模型及预缺血模型，采用免疫印迹、免疫沉淀等技术，检测各实验组中nNOS与突触后致密体95（PSD95）的结合体及nNOS（Ser847）磷酸化水平的变化。结果预缺血组nNOS与PSD95的结合体及nNOS（Ser847）磷酸化水平较缺血／再灌注组明显升高（P〈0．05）。结论预缺血通过增强nNOS与PSD95的结合从而促进nNOS（Ser847）的磷酸化发挥其对神经元的保护作用。

慢病毒载体介导的shRNA对小鼠T细胞CD28基因表达的影响

目的探讨编码针对小鼠CD28的短发卡状RNA(short hairpin RNA,shRNA)的慢病毒载体对小鼠T细胞CD28基因表达的影响。方法设计并合成3对靶向小鼠CD28的特异性干扰序列和1对非特异性干扰序列,亚克隆入慢病毒载体pLB中,构建出重组慢病毒干扰质粒,行PCR鉴定并进一步测序证实。分别将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293FT细胞,生产慢病毒颗粒,并依据绿色荧光蛋白(GFP)表达水平检测病毒滴度。慢病毒感染小鼠脾淋巴细胞,实时荧光定量RT-PCR和Western blot技术分别从mRNA水平和蛋白水平检测CD28的表达。结果PCR鉴定及测序结果证实4种重组慢病毒质粒均构建成功,重组慢病毒滴度均达1×1011U/L。感染T细胞后,CD28基因mRNA和蛋白表达量均有明显下降。结论成功构建了CD28 shRNA慢病毒载体,可有效下调小鼠T细胞CD28基因的表达,其为进一步研究体内沉默CD28基因控制移植物抗宿主病奠定了基础。