开心散含药血清对β-淀粉样蛋白致SH-SY5Y细胞损伤的影响

目的:研究开心散含药血清对β-淀粉样蛋白所致人神经母细胞瘤SH-SY5Y损伤的影响及其机制。方法:SD大鼠灌胃给予开心散(0.58 g/Kg,1.16 g/Kg,2.32 g/Kg),连续7天,每天2次,第8天末次给药后1 h腹主动脉取血,制备开心散含药血清,将不同浓度的开心散含药血清加入SH-SY5Y细胞孵育2 h后,加入Aβ_(25-35)(10μmol/L),共同培养24 h。采用MTT法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,活性氧表达及线粒体膜电位。结果:与正常对照组细胞比较,Aβ_(25-35)(10μmol/L)可以明显降低SH-SY5Y细胞的细胞存活率,增加细胞凋亡率,升高细胞内活性氧的含量,降低线粒体膜电位;开心散含药血清可以明显抑制细胞凋亡,提高细胞存活率,降低活性氧表达及提高线粒体膜电位(P<0.01)。结论:开心散含药血清能减轻Aβ25-35所致的细胞损伤,可能与保护线粒体,减少细胞凋亡有关。

开心散活性成分及药理作用研究进展

开心散由人参、远志、菖蒲、茯苓四味中药组成，善治好忘，具宁心安神、健脾益智之功效。主要的活性成分有人参皂苷类、远志皂苷、寡糖酯、细辛醚、茯苓酸、茯苓多糖等。体内外药理研究表明，开心散具有抗抑郁、抗痴呆、改善学习记忆、抗疲劳等作用，且这些作用与组成开心散的药味组成及药物间的配伍比例有关，近年开心散配伍比例研究得到更多关注。因此，对近年来开心散活性成分、药理作用的文献进行总结归纳，并进一步对药味配伍比例对开心散药理作用影响的相关研究进行综述。

开心散对APP/PS1转基因小鼠在体LTP和PSD-95表达的影响

目的考察开心散(远志、人参、茯苓、石菖蒲)对APP/PS1转基因小鼠海马在体长时程增强(LTP)、海马CA1区和大脑皮层突触后致密蛋白-95(PSD-95)的表达的影响。方法 32只APP/PS1雄性小鼠(3月龄)随机均分为模型组、多奈哌齐[0.75 mg/(kg·d)]组、开心散[1.5、3 g/(kg·d)]组,另设C57/BL6小鼠为对照组,连续给药3个月。记录海马区穿通纤维通路(perforant pathway,PP)至齿状回(dentate gyrus,DG)的在体LTP,免疫组化法观察小鼠海马CA1区、大脑皮层PSD-95的表达。结果与对照组相比,模型组小鼠场兴奋性突触后电位(fEPSP)斜率明显下降,海马CA1区、大脑皮层中PSD-95阳性细胞的平均光密度明显减少;而多奈哌齐、开心散可明显提高模型组小鼠f EPSP斜率。多奈哌齐能增加海马CA1区PSD-95阳性细胞的平均光密度,开心散[1.5 g/(kg·d)]可以增加海马CA1区、大脑皮层PSD-95阳性细胞的平均光密度,开心散[3 g/(kg·d)]能增加大脑皮层PSD-95阳性细胞的平均光密度。结论开心散能促进APP/PS1转基因小鼠LTP形成,增强突触可塑性,可能与调节PSD-95蛋白表达有关。

远志寡糖酯抗β淀粉样蛋白25-35诱导的SH-SY5Y细胞损伤的作用研究

目的探讨远志寡糖酯抗β淀粉样蛋白25-35诱导SH-SY5Y细胞损伤的作用及相关机制。方法不同浓度的远志寡糖酯与SH-SY5Y细胞孵育1 h,再与25μmol·L^(-1)的βAmyloid Fragment_(25-35)(Aβ_(25-35))共同孵育24 h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞凋亡;生化法测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量及细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)的含量;Western blot检测胞内凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果远志寡糖酯能够显著提高Aβ_(25-35)损伤的SH-SY5Y细胞存活率,降低细胞凋亡率,减少细胞LDH释放,增加胞内SOD活性并降低MDA含量,增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,降低凋亡蛋白Bax的表达。结论远志寡糖酯能够对抗Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y细胞损伤,与抗氧化损伤和减少细胞凋亡有关。

远志寡糖酯类化合物药理活性研究进展

随着对远志(Polygala tenuifolia Willd.)化学成分的研究,远志寡糖酯类成分越来越受到关注,现代药理研究发现,该类成分具有脑保护、抗抑郁等多种药理活性。笔者对其药理作用及作用机制研究进行综述,为进一步研究远志抗痴呆等神经保护作用提供线索和思路。

远志寡糖酯对β淀粉样蛋白25~35诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤及AKT / CREB / BDNF 信号通路的影响

目的 观察远志寡糖酯对β淀粉样蛋白25~35(Aβ;)诱导的人成神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞损伤及蛋白激酶B/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白/脑源性神经营养因子(AKT/CREB/BDNF)信号通路关键凋亡蛋白的影响。方法 将培养的SH-SY5Y细胞分为对照组、Aβ;损伤模型组、远志寡糖酯(50、100、200、400 mg/L)组和Aβ;损伤+远志寡糖酯(50、100、200、400 mg/L)组。对照组和远志寡糖酯组分别给予等体积完全培养液和不同浓度的远志寡糖酯溶液后与细胞共孵育24 h;Aβ;损伤模型组和Aβ;损伤+远志寡糖酯组分别给予等体积完全培养液和不同浓度的远志寡糖酯溶液2 h后,加入25μmol/L Aβ;的溶液与细胞共孵育24 h。采用MTT法检测SH-SY5Y细胞存活率;Hoechst 33258染色观察细胞凋亡;Western Blot检测SH-SY5Y细胞内pAKT/AKT、pCREB/CREB和BDNF蛋白表达。结果 与对照组比较,不同浓度远志寡糖酯(100、200、400 mg/L)能明显增加细胞存活率;Aβ;可降低SH-SY5Y细胞存活率,增强SH-SY5Y细胞内的Hoechst 33258染色荧光强度,降低pAKT/AKT、pCREB/CREB和BDNF的蛋白表达(P<0.01)。与Aβ;损伤模型组比较,不同浓度的远志寡糖酯(100、200、400 mg/L)均可明显提高细胞存活率,降低细胞内Hoechst 33258染色的荧光强度,减少细胞凋亡,增加细胞内BDNF、 pAKT/AKT、pCREB/CREB的表达(P<0.05,P<0.01)。结论 远志寡糖酯抗Aβ;诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤可能与激活AKT/CREB磷酸化,促进BDNF表达有关。