一株嗜水气单胞菌噬菌体的分离鉴定与生物学特性

本试验以嗜水气单胞菌CVCC-4002为宿主从鲤鱼内脏中分离得到一株噬菌体,命名为BLCC16-001,用PEG8000浓缩、超速离心获得高纯度的噬菌体进行电镜观察。测定噬菌体宿主谱、最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线、热稳定性、pH稳定性及噬菌体体外杀菌效果。结果表明:电镜下,噬菌体BLCC16-001头部直径约60 nm,尾部长约140 nm,还能够裂解4株嗜水气单胞菌,其最佳感染复数为0.0001。噬菌体BLCC16-001潜伏期为20 min,随后进入平台期,爆发量约为1000 PFU/cell;能够耐受60℃以下的温度,超过70℃会急剧失活;对酸碱均具有一定的抵抗力,在pH为4.0~10.0时稳定;在感染复数为0.1时,3 h对宿主菌杀菌率超过90%,感染复数为1时,3 h对宿主菌杀菌率超99%。噬菌体BLCC16-001是一株宽宿主谱的能够耐受一定温度和酸碱环境的肌尾科新型烈性噬菌体,对其研究可为嗜水气单胞菌噬菌体的研究提供理论基础。

1株禽大肠杆菌噬菌体的分离及杀菌效果评估

【目的】探索噬菌体作为控制养殖环境致病性大肠杆菌的新手段。【方法】本研究进行了大肠杆菌噬菌体的分离及相应指标评估。通过双层平板法从养殖环境中分离禽致病性大肠杆菌裂解性噬菌体。通过电镜及酶切鉴定、温度及酸碱稳定性、最佳感染复数、一步生长曲线及其在模拟环境中的杀菌效果对该噬菌体进行综合性评估。【结果】分离得到的噬菌体具有正多面体的头部和细而长的尾部结构,头部直径约98 nm,尾部长约123 nm,结合酶切鉴定结果初步判定该噬菌体为肌尾科双链DNA噬菌体。该噬菌体的温度耐受范围为37~50℃;酸碱耐受范围为pH 3.0~11.0。当感染复数为0.00001时产生的子代噬菌体滴度最高;一步生长曲线测定结果显示,该噬菌体潜伏期为20~40 min,裂解时间为80~100 min,裂解量为4133 PFU/cell。从该噬菌体对模拟环境中宿主大肠杆菌的杀菌效果可看出,浓度为1×10^(4)~1×10^(6) PFU/mL的噬菌体ФECP2-1对液体中目标大肠杆菌作用1~6 h,杀菌率均在99.9%以上;浓度为2×10^(4)~2×10^(6) PFU/g的噬菌体ФECP2-1对鸡粪中目标大肠杆菌作用5~10 h,杀菌率均在99%以上,该噬菌体对鸡粪中目标大肠杆菌杀菌效果略低于对液体中目标大肠杆菌的杀菌效果。【结论】ФECP2-1符合噬菌体类消毒剂相关特征,是一株具有良好应用前景的噬菌体,可作为一种生物消毒剂应用于养殖环境中禽大肠杆菌的防控。