环境激素壬基酚对长牡蛎免疫相关基因表达的影响研究

壬基酚(Nonylphenol,NP)是一种典型的环境内分泌干扰物,具有高亲脂性、难降解性、生物蓄积性和高毒性,其广泛应用引起的环境污染问题越发严重。本研究选取长牡蛎(Crassostrea gigas)为研究对象,关注壬基酚暴露后长牡蛎免疫相关基因的转录表达变化,以探索壬基酚暴露对海洋贝类免疫系统的影响。实验结果表明:长牡蛎的抗氧化酶(SOD、CAT和GPX)、热休克蛋白(Heat shock proteins,HSP)以及NF-κB蛋白家族有关基因在壬基酚刺激后的表达显著提高。实验初步证明了壬基酚刺激可显著影响长牡蛎免疫相关基因的表达,为以后结合病原刺激实验解析贝类大规模死亡原因打下基础;另一方面,也可为明晰海洋贝类壬基酚胁迫响应机制提供参考。

中药复方抗肝纤维化药理作用研究进展

肝纤维化是广泛存在于慢性肝病中以细胞外基质过量沉积为特征的损伤修复反应,在全球具有较高发病率和病死率。在缺乏有效抗肝纤维化西药的同时,许多行之有效的中药复方逐渐得到了认可。本文总结了近年来国内外研究的一些典型中药复方,分别从活血化瘀、补益、清热祛湿和疏肝健脾等4个方面进行综述。旨在方便研究者系统地了解抗肝纤维化中药复方的研究进展,为临床组方以及抗肝纤维化药物的进一步研究提供一定参考。

苷泰胶囊对GalN/LPS致小鼠急性肝损伤的保护作用研究

目的:研究观察苷泰胶囊对D-氨基半乳糖(GalN)联合细菌脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肝脏损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法:将60只Balb/c小鼠随机分为正常组、模型组、双环醇阳性药对照组(10mg·kg^(-1))和苷泰胶囊低、高剂量(300、3000mg·kg^(-1))组,每组12只。除正常组、模型组给予等体积生理盐水外,各组小鼠均按给定药物、剂量灌胃7日,每日1次。末次给药1h后,正常组小鼠腹腔注射等容积生理盐水,其他各组均腹腔注射GalN(800mg·kg^(-1))和LPS(10μg·kg^(-1))。给药4h后取血取肝。通过血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量和HE染色结果评价苷泰胶囊对肝损伤的保护效果。采用Real-time PCR检测各组小鼠肝组织TNF-α、IFN-γ、CD14和TLR4等基因的表达。结果:苷泰胶囊可明显降低急性肝损伤小鼠的ALT、AST水平(P<0.05或P<0.01),改善其肝脏病理损伤程度,同时下调TNF-α、IFN-γ、CD14和TLR4等基因的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:苷泰胶囊对GalN/LPS诱导的急性肝损伤小鼠具有较好的保护作用,其机制可能与下调LPS受体CD14、TLR4mRNA表达,抑制TLR4信号通路的活性,进而抑制TNF-α、IFN-γ等炎症因子的表达有关。

新型冠状病毒感染肺炎患者入院时中医证候分析

目的:研究新型冠状病毒感染肺炎患者入院时中医证候特点。方法:选取2020年1月至2020年2月解放军总医院第五医学中心收治的50例新型冠状病毒感染肺炎患者作为研究对象,对其基本信息、现病史、既往史、流行病学史、症状、体征,分析其中医证候及卫气营血辨证情况进行分析。结果:50例患者中,男32例(64.0%),女18例(36.0%);年龄3~79岁,平均年龄(40.0±18.4)岁,入院前平均病程为(3.2±2.5)d,平均潜伏期为(5.0±3.5)d。处于卫气分阶段34例(68.0%),气分阶段14例(28.0%),营分阶段2例(4.0%),其中挟湿者44例(88.0%)。影像学检查无异常者多见于卫分证,胸部X线片提示双肺炎性反应多见于营、气分证,差异有统计学意义。气分证较之卫分证血白细胞计数升高,淋巴细胞计数下降,差异有统计学意义。结论:新型冠状病毒感染肺炎多以发热、咳嗽为入院时的主要症状,湿邪是此次病机的关键因素,发病主要以卫分证阶段和气分阶段为主,部分进展至营分阶段,早期治疗可选用辛凉清轻宣透之品,注重祛湿治疗,不可过用苦寒。

87例不明原因肝肿大临床病理分析

目的探讨不明原因肝肿大的常见病因及临床特点。方法回顾性分析2009年1月-2018年12月解放军总医院第五医学中心以肝肿大原因待查入院的患者87例,采集患者的性别、年龄、临床症状、体征、实验室指标等临床资料进行回顾性研究。符合正态分布的计量资料多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验;不符合正态分布的计量资料多组间比较及进一步两两比较采用Kruskal-Wallis H秩和检验。计数资料组间比较采用χ^2检验。结果87例患者中2例原因不明(2.30%),85例(97.70%)得到病理明确诊断,其中非嗜肝病毒性肝炎18例(20.69%)慢性药物性肝损伤8例(9.20%)、糖原累积病22例(25.29%),总占比超过50%。非嗜肝病毒性肝炎、慢性药物性肝损伤、糖原累积病3组间年龄、性别、ALT、AST、WBC、PLT比较差异均有统计学意义(χ^2值分别为5.80、10.34、16.85、18.69、10.02、12.76,P值均<0.05)。病理结果,糖原累积病:典型植物细胞样镶嵌排列,PAS染色阳性;慢性药物性肝损伤:肝小叶结构紊乱,肝窦内可见分叶核WBC为主的混合性炎细胞浸润;非嗜肝病毒性肝炎:肝实质炎症为主,肝小叶结构紊乱,早期假小叶结构形成。结论引起不明原因肝肿大的病因多且复杂,以遗传代谢性疾病最多,其中主要为糖原累积病;其他如非嗜肝病毒性肝炎、慢性药物性肝损伤也是造成不明原因肝肿大的重要原因。

COVID-19继发肺纤维化的病因病机及治则治法探讨

新型冠状病毒感染肺炎(Corona Virus Disease 2019,COVID-19)致病力强,疾病进展迅速,部分患者常遗留有肺纤维化情况,痰瘀阻络、气阴耗伤为COVID-19继发肺纤维化的病机关键,早期介入,治疗前移,活血化痰,固护正气,改善肺泡炎和微循环障碍,减少炎性渗出,减轻肺部病灶损害,使其得到充足的供血和营养,助肺脏恢复其功能,一方面有助于COVID-19疾病尽快恢复,另一方面也可降低COVID-19继发肺纤维化的风险,加快已成肺纤维化的好转速度,对于提高COVID-19患者的疗效和治愈出院后的生活质量具有重大意义。

97例糖原累积病的临床及病理特点分析

目的探讨糖原累积病(glycogen storage disease,GSD)的临床及肝脏病理特点。方法回顾性分析2010年1月至2019年11月在解放军总医院第五医学中心住院治疗的97例经肝穿刺病理诊断为GSD患者的临床及病理资料。结果97例GSD患者均存在不同程度的肝大和肝功能异常,伴不同程度的低血糖73例(72.3%),其中3例(3.1%)出现低血糖惊厥,低体重24例(24.7%),生长迟缓11例(11.3%),消瘦8例(8.2%)。肝脏病理组织光镜下主要改变:肝细胞弥漫性肿胀,部分胞质空化、核小居中,肝细胞呈植物细胞样,纤维隔形成。肝脏病理PAS染色均为阳性。炎症程度G017例(17.5%),G174例(76.3%),G26例(6.2%),纤维化程度S122例(22.7%),S231例(32%),S326例(26.8%),S418例(18.5%),多发性肝腺瘤2例(2.1%),肝癌1例(1.0%)。结论GSD以儿童发病为主,多数有肝大、转氨酶异常,肝组织病理检查为确诊GSD主要手段,肝脏病理糖原染色阳性为其特异性病理特征,但分型依赖于基因检测。

基于多维图像分析技术的腺病毒感染中医舌象特征分析

目的 利用多维图像分析技术对腺病毒感染患者的舌象特征进行处理分析,将舌诊图像转换为客观化数据,为中医诊断及进一步辨证论治提供科学支撑。方法 收集85例腺病毒感染患者以及30例正常人的临床资料,采用舌诊图像数字分析诊断系统对患者的舌象进行采集,并利用多维图像分析技术从齿痕有无、舌苔颜色、舌苔裂纹占比、舌苔湿度、舌苔纹理(纹理粗糙度,纹理方向度,纹理对比度)5个方面提取舌象特征,使用描述性统计和统计检验方法比较正常人群、腺病毒感染发热患者、密切接触患者、无发热患者的舌象特征差异,并采用随机森林算法对舌象特征做重要性排序,筛选重要特征纳入模糊K-Means聚类分析对腺病毒感染者的舌象特征进行归纳。结果 舌象特征分布显示,正常人群、腺病毒感染发热患者、密切接触患者、无发热患者4类人群中舌苔颜色R/G/B、齿痕的有无、舌苔湿度、纹理粗糙度、纹理方向、纹理对比度的分布具有统计学差异,舌苔颜色R/G均值、纹理粗糙度、纹理对比度可能对4类人群具有较好的区分度。结论 基于观察到的腺病毒感染患者舌象,根据多维图像分析技术提取的舌象特征与临床辨证具有较强的一致性,可为中医舌象辨证提供客观依据。

自身免疫性肝病患者中医体质分布及临床特点分析

目的分析2016年9月-2019年9月在解放军总医院第五医学中心确诊的181例自身免疫性肝病(Autoimmune Liver Diseases,ALD)住院患者的中医体质分布规律。方法按性别、疾病、年龄及肝硬化将患者分组,计算181例ALD患者《中医体质量表》得分情况,分析ALD患者中医体质类型分布有无差异,比较各个疾病主要体质类型有无差异。结果ALD患者以偏颇体质为主,其体质分布比例为:阳虚质(26.52%)、血瘀质(14.92%)、气郁质(13.81%)、阴虚质(13.26%)、气虚质(9.94%)、平和质(9.94%)、湿热质(7.73%)、痰湿质(2.76%)、特禀质(1.10%);ALD患者不同年龄之间,肝硬化患者与非肝硬化患者体质分布类型比较具有统计学意义(P<0.05);ALD患者组间AIH、PBC及PBC-AIH比较体质无统计学差异。气郁体质患者单核细胞绝对值大于血瘀体质患者(P<0.05);血瘀体质患者胆碱酯酶、乳酸脱氢酶与某些体质类型有明显差异;阳虚体质患者腺苷脱氢酶高于阴虚体质患者(P<0.05)。结论ALD患者的整体中医体质类型以阳虚质为主;不同体质与临床指标存在关联,并且阳虚质患者预后相对较差,ALD当以温阳为主要治疗原则。

乙型肝炎失代偿期肝硬化及慢性肝衰竭患者的呼出气代谢组学差异性分析

目的研究乙型肝炎失代偿期肝硬化与慢性肝衰竭患者的呼出气代谢组学差异,以探索潜在的能预测严重肝病进展的无创生物标志物。方法采用全二维气相色谱-飞行时间质谱(comprehensive two-dimensional gas chromatography tandem time-of-flight mass spectrometry,GC×GC-TOF-MS)研究乙型肝炎失代偿期肝硬化及慢性肝衰竭两组患者的呼出气代谢产物,以主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘判别法(orthogonal partial least square discriminant analysis,OPLS-DA)比较挥发性有机化合物(volatile organic compound,VOC)的性质及含量,曲线下面积(area under the curve,AUC)和受试者工作特性(receiver operating characteristic,ROC)曲线建立预测模型。结果与失代偿期肝硬化组相比,慢性肝衰竭组的1-dodecanol、1-1-cyclohexen-1-yl-ethanone、1-1-methylethoxy-2-propanone、o-cymene及carbon dioxide含量明显降低。ROC曲线分析显示,十二烷醇(1-dodecanol)可鉴别失代偿期肝硬化与慢性肝衰竭(ROC曲线下面积=0.825),且敏感性77.8%,特异性99.23%。结论十二烷醇可作为一种潜在的生物标志物,预测乙肝失代偿期肝硬化进展为慢性肝衰竭的风险,同时为无创检测方法评估、预测慢性肝病的预后提供物质基础。

新型冠状病毒肺炎患者40例临床特点与舌象关系研究

目的研究新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者的临床特点与舌象表现的关系。方法观察40例COVID-19患者的症状、体征、实验室检查、影像学检查结果,并结合舌象进行分析。结果(1)舌象表现:40例患者中,舌质红者40例(100%),其中舌质暗红者19例(47.5%);少苔者5例(12.5%),苔白腻者27例(67.5%),苔黄腻者8例(20.0%)。(2)临床表现:40例患者中,发热27例(67.5%),其中低热(37.3~37.9℃)18例(45.0%)、中热(38~38.9℃)8例(20.0%)、高热(≥39℃)1例(2.5%);咳嗽25例(62.5%),乏力13例(32.5%),咽痛6例(15.0%),肌肉酸痛12例(30.0%),腹泻2例(5.0%)。舌红少苔者症状多轻微,仅有咳嗽、咽痛、乏力等症状,咽痛症状较舌苔厚腻者更为多见,差异有统计学意义(P<0.05);舌苔白腻、黄腻者则以咳嗽、发热的特征性临床表现为主,其中舌苔白腻者以低热为主,舌苔黄腻者发热多为38℃以上的中热或高热,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)影像学表现:胸部X线片提示,40例患者中双侧肺部炎症患者13例(32.5%);单侧肺部炎症患者18例(45.0%),其中左肺炎症患者7例(17.5%),右肺炎症患者11例(27.5%);其余9例(22.5%)患者胸部X线片检查均未见明显异常。舌红少苔者影像学检查多无异常,胸部X片提示肺部炎症多为舌苔厚腻者,其中双肺炎症多见于舌红苔黄腻者,差异有统计学意义(P<0.05)(4)实验室检查:40例患者血白细胞计数为(5.17±1.55)×10^9/L,其中异常减低患者3例(7.5%);淋巴细胞计数为(1.39±0.75)×10^9/L,其中异常减低患者8例(20.0%),随着舌苔逐渐厚腻的变化,血白细胞计数逐渐升高,淋巴细胞计数逐渐下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论COVID-19患者舌红少苔多见于疾病早期病程较短者(1~2d),症状多轻微;伴随病程进展(病程≥3d),部分患者舌苔逐渐增多,表现为厚腻苔,症状以咳嗽、发热的特征性临床表现为主,反映了感染逐渐进展的情况,由此及时总结出COVID-19宜采用清热宣肺利湿、不可过用苦寒的治疗原则。

肝癌治疗新时代中西医结合治疗策略探析

原发性肝癌(PHC)是指原发于肝脏的恶性肿瘤,亦是临床常见的消化系统恶性肿瘤之一,在所有恶性肿瘤中发病率排第五,而死亡率高居第二,是癌症的第二大死亡因素[1],尤其是在亚太地区。近年来,除手术切除、肝移植、射频消融、介入治疗、放疗等治疗方法外,肝癌治疗也进入了新时代,众多靶向药物、免疫疗法层出不穷。不管患者最终采取何种治疗方案,中医药治疗作为肝癌综合治疗的重要组成部分,如何进行诊疗模式的调整、治疗原则的改进,如何更好地发挥中医药特色和优势,是中医药治疗肝癌必须面对的问题。在现阶段,肝癌的诊断往往是通过现代医学检查明确,其检查结果可以作为中医以表观症候学进行诊断的补充完善,这种认知结合恰恰是中医诊疗黑箱模式得以进步的一部分。在坚持中医理论体系、理法方药的前提下,进行认知的结合从而加深对人体生物现象的理解,是有益并值得深入研究的。

解放军总医院第五医学中心2009年-2019年老年药物性肝损伤患者的临床特征及变化趋势

目的了解老年药物性肝损伤(DILI)的疾病特征及变化趋势,为临床防治老年DILI提供参考。方法回顾纳入解放军总医院第五医学中心2009年1月-2019年12月期间明确诊断为DILI且年龄≥60岁的老年DILI患者2107例,按年龄分段进行分组,统计分析老年DILI患者的年龄、性别、临床特征、预后、地区分布等临床资料。计数资料组间比较采用χ2检验。结果2107例老年DILI患者中,男802例,女1305例,男女比为1∶1.63。临床分型以胆汁淤积型为主(1439例,68.3%)。60~64岁组DILI患者最多,共942例(44.7%),其中女618例(65.6%),胆汁淤积型589例(62.5%),以慢性DILI多见(471例,50.0%),药物性肝硬化421例(44.7%),药物性肝衰竭25例(2.7%)。75~79岁组共187例,其中男110例(58.8%),胆汁淤积型137例(73.3%),以肝硬化多见(114例,60.9%),药物性肝衰竭4例(2.1%)。60~64岁组以慢性DILI多见,75~79岁组以肝硬化多见。在预后方面,60~64岁组治愈27例(2.9%),好转885例(93.9%),无效及死亡30例(3.2%);65~69岁组治愈16例(2.8%),好转528例(92.0%),无效及死亡30例(5.2%);70~74岁组治愈9例(2.8%),好转305例(94.1%),无效及死亡10例(3.6%),结果显示不同年龄段DILI患者病死率差异无统计学意义(P>0.05)。老年DILI患者数占住院DILI患者数的比例,从2009年的15.90%上升至2013年的22.05%,2019年上升至27.51%,11年间上升约1.73倍。患者的地区分布以华北地区最多(47.08%),其中以河北省最多,占24.92%,山西省占10.96%,内蒙古占10.25%;其次为东北地区,占17.85%;另外,北京市占11.53%。结论老年DILI患者数占住院DILI患者数的比例总体呈上升趋势,临床分型以胆汁淤积型为主,且多数进展为慢性DILI及药物性肝硬化,需重视老年DILI的早期诊断、早期干预及规范治疗。

老年药物性肝衰竭65例临床特征分析

目的了解老年药物性肝衰竭(DILF)的疾病特征及用药情况,为临床防治老年DILF提供参考。方法选取2015年1月—2019年12月于解放军总医院第五医学中心明确诊断为DILF且年龄≥60岁的患者65例,按临床疗效判定标准进行分组,治愈和好转为治疗有效组,无效和死亡为治疗无效组。统计分析老年DILF患者的年龄、性别、基础疾病、用药种类、临床分型、并发症及预后等临床资料。计量资料两组间比较采用t检验或Mann-Whitney U检验;计数资料两组间比较采用χ^(2)检验或Fisher精确检验。结果65例老年DILF患者中,男17例(26.2%),女48例(73.8%),男女比例1∶2.82,老年DILF分型以亚急性肝衰竭为主(81.5%),临床分型以胆汁淤积型多见(40%)。治疗有效组共26例(40%),治疗无效组共39例(60%)。在并发症方面,治疗有效组胸腹水比例高于无效组(61.5%vs 28.2%),肝肾综合征比例低于无效组(19.2%vs 56.4%),未合并肝性脑病比例高于无效组(80.8%vs 30.8%),合并肝性脑病4期比例低于无效组(0 vs 20.5%),差异均有统计学意义(χ^(2)值分别为7.138、8.880、15.604,P值均<0.05)。引起DILF的主要药物包括:化学类以心脑血管药物(10.8%)为主,其次是降压药(9.2%)和抗生素(7.7%);中药类主要为中成药(35.4%)和中草药(23.1%);生物制剂中以保健品多见(20.0%)。结论老年DILF以亚急性肝衰竭多见,临床分型以胆汁淤积型为主,并发肝性脑病及肝肾综合征易导致预后不佳。

41例Caroli病的临床特征分析

目的分析Caroli病患者的临床特征。方法收集2015年4月-2020年1月于解放军总医院第五医学中心已确诊的41例Caroli病患者的临床资料,将患者分为Ⅰ型(n=16)和Ⅱ型(n=25),对两组患者的一般资料、实验室指标及临床特征等进行回顾性分析,满足正态分布的计量资料组间比较采用独立样本t检验,不满足正态分布的组间比较采用Mann-Whitney U检验,计数资料组间比较采用χ^2检验,相关性分析采用Spearman相关分析。结果Ⅰ型患者的Alb水平高于Ⅱ型患者(t=0.976,P=0.048),Ⅱ型患者的PT水平大于Ⅰ型患者(Z=3.115,P=0.001);Ⅱ型患者食管胃底静脉曲张、上消化道出血和/或黑便、门静脉高压的发生率显著高于Ⅰ型患者(χ^2值分别为6.077、5.468、2.403,P值分别为0.002、0.019、0.028);Ⅱ型患者ChE水平与食管胃底静脉曲张、门静脉高压的发生率呈负相关(r值分别为-0.468、-0.436,P值分别为0.018、0.029);Alb水平与食管胃底静脉曲张发生率呈负相关(r=-0.561,P=0.004);RBC水平与食管胃底静脉曲张、上消化道出血和/或黑便、门静脉高压的发生呈负相关(r值分别为-0.662、-0.566、-0.436,P值分别为<0.001、0.003、0.029);HGB水平与食管胃底静脉曲张、上消化道出血和/或黑便、门静脉高压的发生呈负相关(r值分别为-0.605、-0.590、-0.510,P值分别为0.001、0.002、0.009);PT水平与食管静脉曲张、门静脉高压发生率呈正相关(r值分别为0.488、0.520,P值分别为0.013、0.008)。结论与Ⅰ型Caroli相比,Ⅱ型患者食管胃底静脉曲张、上消化道出血和/或黑便、门静脉高压的发生率较高,并伴有Alb水平降低及PT增高等临床指标变化,临床预后较差。

感染性疾病中西医结合认知模式探析

感染性疾病一直是临床医学研究领域的热点和难点问题,其中、西医认知模式各有不同,如何将二者结合提高临床诊治水平应是当前感染性疾病研究的主要内容之一。本文以中西医结合为切入点,从感染性疾病的定义、发病原因、发生机制及治疗原则等方面,对其中西医认知模式逐一比对。本文不仅阐述分析了感染性疾病的中西医诊治特点,还系统评价了感染性疾病的中西医结合认知模式的特色和优势,为中西医结合研究的深入发展提供理论参考。

两种不同定义标准的慢性药物性肝损伤临床研究

目的评价两种不同定义标准对慢性DILI的适用性,以及DILI发病后第2个月TBil和ALP对DILI的预测价值。方法收集解放军总医院第五医学中心2015年1月-2018年6月收治的DILI 73例,分别应用6个月和12个月两种诊断标准,比较两种标准的诊断结果是否存在差异,分析DILI发病后第2个月TBil和ALP仍持续升高对慢性DILI的预测情况。结果依据6个月诊断标准,有65例符合慢性DILI诊断,8例不符合慢性DILI的诊断,发病后第2个月TBil>33.65μmol/L对慢性DILI的发生有一定预测价值(P<0.05),该界值处灵敏度88%,特异度61%;发病后第2个月ALP水平对慢性DILI的发生无预测价值。依据12个月诊断标准,有51例符合慢性DILI诊断,22例不符合慢性DILI的诊断,发病后第2个月ALP和TBil水平对慢性DILI的发生均无预测价值。两种不同标准诊断结果差异有统计学意义(P<0.05),6个月标准时慢性DILI检出率高于12个月标准,有43例患者可同时满足两种诊断标准。结论DILI发病后第2个月TBil持续升高对我国慢性DILI的预测价值优于ALP,建议治疗时主要参考6个月定义标准,诊断时可参考12个月定义标准。

戈谢病5例临床分析

目的分析戈谢病(Gaucher’s disease,GD)患者的临床特点。方法收集2009年1月至2018年12月于解放军总医院第五医学中心住院治疗的5例GD患者的临床资料,观察患者的一般资料、临床症状、体征、实验室指标、影像学特点、病理特点。结果5例GD患者均为Ⅰ型,男3例,女2例,年龄(34.6±9.3)岁(21~43岁),脾大5例,肝大3例,转氨酶升高3例,TBIL升高2例,除1例脾切除术外,WBC下降3例、PLT下降3例、HGB下降2例。结论GD患者临床症状表现不明显,多出现不明原因肝、脾肿大,需警惕GD可能,酶替代治疗可起到一定的改善作用。

五味子甲素对NLRP3炎性小体活性的抑制作用及机制初步研究

探讨五味子甲素(deoxyschizandrin,schisandrin A)对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)中NLRP3(NOD-like receptor family,pyrin domain containing 3)炎性小体活性的抑制作用及初步机制。CCK-8法检测细胞毒性,根据细胞存活率确定给药浓度。通过Western blot方法检测细胞培养上清中IL-1β和caspase-1的表达,分析不同浓度的五味子甲素(25、50、100和200μmol·L^(-1))对尼日利亚菌素(nigericin,Nig)和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)诱导的NLRP3炎性小体活化的影响,检测细胞中pro-caspase-1、pro-IL-1β、ASC和NLRP3等蛋白的表达变化;免疫荧光技术分析NF-κB(p65)的入核情况。根据CCK-8法的结果,确定了五味子甲素的给药浓度范围为6.25~400μmol·L^(-1)。在25~200μmol·L^(-1)浓度内,五味子甲素能够抑制Nig和ATP引起的NLRP3炎症小体活化,进而抑制IL-1β的分泌。免疫荧光和Western blot实验结果显示,五味子甲素对NLRP3炎症小体活性的抑制作用不依赖于NF-κB通路活性及其诱导的NLRP3、ASC和pro-IL-1β等炎性小体蛋白的表达。综上,本实验首次证实,五味子甲素在一定浓度范围内通过阻断caspase-1活化,抑制caspase-1对pro-IL-1β的剪切活化,进而抑制NLRP3炎性小体的活性,减轻免疫炎症反应。本研究为五味子甲素防治NLRP3炎性小体相关的疾病提供了参考依据。

氧化苦参碱通过免疫调节保护刀豆蛋白A诱导的小鼠免疫性肝损伤

目的:本文旨在研究氧化苦参碱(OMT)对刀豆蛋白A(Con A)所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法:Balb/C小鼠随机分为5组,分别为正常组,模型组,氧化苦参碱低、高剂量(60,120 mg·kg-1)组和双环醇(156 mg·kg-1)阳性药组。连续给药5 d,末次给药30 min后,除正常组外,其余各组均尾静脉注射Con A(15 mg·kg-1)建立肝损伤模型。造模8 h后,检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),总胆红素(TBIL)的表达。采用Luminex多因子检测的方法,检测血清干扰素-γ(IFN-γ),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-4(IL-4),IL-6,IL-10,IL-27表达,苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理改变。流式细胞术检测小鼠脾淋巴细胞CD4+IL-17A的表达,CD4+CD25+Fox P3+调节性T细胞(Treg)亚群的比例。结果:与正常组比较,Con A模型组ALT,AST,TBIL表达明显增高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,双环醇和OMT低高剂量组均可明显降低ALT活性(P<0.05,P<0.01)。OMT高剂量可明显抑制AST表达(P<0.05),OMT低高剂量均可抑制TBIL表达(P<0.05),其余各组无统计学差异。各给药组均能不同程度缓解肝脏病理改变,减少炎性细胞浸润。OMT高剂量组血清IL-10,IL-27水平与模型组比较显着升高(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,OMT高剂量组可明显降低CD4+IL-17A表达(P<0.05),上调CD4+CD25+Fox P3+Treg比例(P<0.05)。结论:OMT对Con A诱导小鼠免疫性肝损伤具有较好的保护作用,抑制CD4+IL-17A的表达,上调CD4+CD25+Fox P3+Treg比例可能是其主要的作用机制。