左归丸调控Cx43对血清饥饿诱导MC3T3-E1细胞凋亡的保护作用

目的：论证左归丸含药血清抗MC3T3-E1细胞凋亡的机制与其调控Cx43表达及功能有关。方法：将培养细胞分为：正常A组、对照B组、左归丸含药血清C组。后两组采用血清饥饿法诱导细胞凋亡。流式细胞仪检测细胞凋亡、Western blot法检测Caspase3蛋白表达;RT-PCR、Western blot法分别检测Cx43mRNA、蛋白表达;免疫荧光染色检测细胞爬片Cx43蛋白分布及定量;放免法检测细胞上清液c AMP含量。结果：左归丸可明显降低血清饥饿诱导的细胞凋亡、减少caspase3蛋白表达,B、C组比较P〈0.01或P〈0.05。血清饥饿还导致Cx43mRNA及蛋白表达、蛋白荧光分布及MOD值、细胞上清液c AMP含量显著减少,而左归丸可显著提高上述指标,B、C组比较P〈0.05。结论：左归丸含药血清通过调控Cx43表达及功能,发挥抗MC3T3-E1细胞凋亡的保护作用。

沉默Cx43基因对左归丸促MC3T3-E1细胞分化作用的影响

目的：研究沉默Cx43基因对左归丸含药血清促MC3T3-E1细胞分化作用的影响。方法：采用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默Cx43基因,将培养细胞分为正常对照A组、含药血清B组、基因沉默C组。细胞培养第3、5、7、9天进行ALP活性测定、第21天矿化结节茜素红染色,进行组间对比。结果：左归丸含药血清可以促进MC3T3-E1细胞的分化,与A组比较：ALP活性增强,其中第5、7、9天差异显著（P〈0.05）;茜素红染色面积增加（P〈0.01）。C组与B组比较：ALP活性降低,其中第7、9天差异显著（P〈0.05）;茜素红染色面积明显减少（P〈0.05）。结论：沉默细胞Cx43基因导致左归丸含药血清促MC3T3-E1细胞分化作用明显下降。

田玉美教授辨治皮肤病的临床经验

目的:探讨田玉美教授论治皮肤病的临床经验。方法:从其辨治总体思路、常用方法、疑难杂证治法特点三个方面进行论述,并整理典型病案。结果:田玉美教授诊治皮肤病重诊断、精辨证;常用清解热毒、清热利湿、祛风止痒、活血通络等治法;疑难杂证尤重视补法的运用。结论:田玉美教授认为皮肤病的辨治需标本兼顾、知常达变、内外合治才能取得较好的临床疗效。

论《金匮要略》养阴护津思想的体现

旨在对仲景养阴护津学术思想进行深入研究,归纳整理其在《金匮要略》中的具体体现:包括对阴津亏虚产生的原因分析、其在杂病病机中的重要地位、相关的诊治和调护。

《金匮要略》临证思维训练课的实践探索

在近几年中医专业课程的教学改革中，有关对学生临床思维模式的培训受到了广泛的关注。因为经典课程内容本身即为中医临证思维的最好体现，因此我们在中医本科《金匮要略》教学中对此进行了专项改革。方法是将《金匮要略》系列疾病作为单元研究对象，如在编写教程时把《金匮要略》分为风湿骨关节疾病系列（包括湿病、历节病、肾着病）、脾胃病系列（包括腹满病、寒疝病、宿食病、呕吐病、

中医肾与骨生长发育关系理论探讨

以中医肾主骨理论为出发点,初步探讨肾主生长发育与骨生长发育之间的关系,提出肾主骨生长发育的观点,讨论了肾精化髓养骨,肾与骨功能密切相关。

田玉美教授运用温肝理气活血法治疗妇科疾病的临床经验

田玉美老师系湖北中医药大学教授,全国首批中医药专家学术继承指导专家之一。田老勤学博识,执教《金匮要略》,临证60余载治疗内、妇、儿、皮肤科等疾患多应手效佳,经验丰富。笔者有幸跟师学习,受益匪浅,现将其运用温肝理气活血法治疗妇科疾病的临床经验整理总结如下,以飨后学。

《金匮要略》养阴法运用特点浅析

本文旨在对仲景养阴学术思想进行深入研究,归纳分析了《金匮要略》运用养阴法三个方面的主要特点:注重方式、时机、程度的把握;多与其他治法灵活配用;分治与整体治疗相结合治疗脏阴亏虚。

戴天木教授辨治肢体病症验案举隅

整理戴天木教授临床辨治难治性肢体病症医案,包括结节性红斑、雷诺氏病、糖尿病足,在把握辨证施治规律的同时,努力学习老师的用药经验并整理其学术思想,以发扬光大。

《金匮要略》卫气营血相关理论的研究

卫气营血相关理论贯穿在《金匮要略》杂病的论述中,涵盖于疾病的发病观中,阐释杂病的病机、临床表现及指导用药等,对后世具有重要的理论意义。

田玉美养肾阴辨治疑难杂病的经验

田玉美教授执教湖北中医药大学,从医60余载,学验俱丰,治疗疑难杂病,每起沉疴。今整理跟师待诊中教授用养肾阴辨治疑难杂病验案四则,并探讨其学术经验,以飨同道。1干燥综合征王某,女,57岁。初诊时间2010年1月14日。

戴天木教授辨治产后病验案举隅

戴天木教授执教湖北中医药大学,从医40余载,是湖北省第一批名老中医师带徒指导老师,学验俱丰,用药精炼,疗效显著,尤擅长治疗妇科病证,今撷取产后病数案以共赏。 1产后低热案 刘某,女,28岁。初诊时间：2013年5月10日。主诉：流产后低热半年余。患者在去年10月份,妊娠11周时发生自然流产,西医检查为黄体功能不足导致。

论《金匮要略》烦症

“烦”是临床常见症状，张仲景《伤寒论》涉及“烦”的条文多达76条，外感六经病均可见此症；《金匮要略》有48条原文中出现，另外属明显省文者约32条，涉及40余种杂病，贯穿全书。两书方证可互参者有22处。但历代医家对烦症研究较少，现代学者也只侧重对《伤寒论》中烦症的研究，而缺乏对《金匮要略》的整理，

恐伤孕鼠对其仔鼠长骨早期发育影响的研究

目的:根据肾主骨生长发育理论,研究先天肾虚影响长骨早期发育的情况,论证补肾填精法的作用。方法:采用模拟地震振动、光电刺激复合应激恐吓孕鼠造成子代先天肾虚。将孕鼠分为正常、模型、补肾3组,补肾组灌服左归丸浓缩剂。动态检测出生后仔鼠20 d内平均身长、5周内股骨平均长度、Micro CT检测股骨皮质骨及松质骨微结构参数、第5周股骨钙、磷、羟脯氨酸含量。结果:模型组仔鼠平均身长、股骨平均长度显著降低(P<0.05或P<0.01);各时间点模型组皮质骨厚度、外径周长、皮质骨面积、皮质骨密度减少;股骨矿物质、基质胶原含量减少。上述指标与另两组比较差异显著(P<0.05)。结论:先天肾虚可以影响长骨早期生长发育,出现骨量减少,成骨活性降低,皮质骨发育不良。中药补肾填精治疗,可有效改善先天肾虚仔鼠长骨早期发育不良。

人参石菖蒲药对对睡眠剥夺大鼠海马IL-6R、NMDAR影响的实验研究

目的探索人参-石菖蒲水煎液增强睡眠剥夺大鼠记忆功能的机制。方法将动物分为正常对照组、睡眠剥夺组和中药干预组,通过多平台水环境法制作失眠动物模型,运用ELISA法检测大鼠海马组织中IL-6和IL-6R的表达,免疫印迹法检测大鼠海马组织中NMDAR2B的表达,对相应脑组织采用免疫荧光标记观测。结果 (1)睡眠剥夺组较正常对照组GFAP和NEUN表达显著下调(P <0. 001),药物干预组则比睡眠剥夺组表达上升(P <0. 001);(2)与正常对照组相比,睡眠剥夺组大鼠血液中IL-6和IL-6R均上升,且差异极显著(P <0. 001),同时药物干预组低于睡眠剥夺组,且差异极显著(P <0. 001);(3)NMDAR2B蛋白表达结果进行灰度分析,药物干预组与实验组以及正常组与实验组之间的差异均为极显著(P <0. 001)。结论人参-石菖蒲水煎液能够抑制睡眠剥夺带来的脑部炎性反应,防止睡眠剥夺引起的脑神经细胞损伤,可能通过提高睡眠剥夺动物海马NMDAR2B的表达来增强记忆力。

左归丸含药血清对MC3T3-E1细胞分化过程中Cx43表达及GJIC功能的影响

目的：研究左归丸含药血清对培养MC3T3-E1细胞分化成熟过程中Cx43表达及GJIC功能的影响。方法：胰蛋白酶消化法传代培养MC3T3-E1细胞,通过血清药理学方法,设立正常对照组、左归丸组（5%、10%、15%）。分别用RT-PCR、Western blot法检测培养细胞第7、14、21天Cx43mRNA、蛋白表达;第21天划痕染料标记示踪法检测细胞GJIC功能。结果：随着培养时间增加,各组MC3T3-E1细胞Cx43mRNA、蛋白表达逐渐增强;GJIC染料标记检测中,可见绿色荧光在划痕两侧扩散,荧光定量分析存在组间差异。各浓度左归丸含药血清均可促进培养细胞的Cx43mRNA和蛋白表达、增强GJIC功能,并与含药浓度正性相关,其中以10%组作用最显著（P〈0.05或P〈0.01）。结论：左归丸含药血清能增强MC3T3-E1细胞Cx43mRNA、蛋白表达及GJIC功能,这可能是其促进MC3T3-E1细胞分化成熟的重要机制之一。

仲景出血病辨证探析

本文旨在对仲景出血病的辩证要点进行探讨,分别从病因、病机、病性、预后方面进行了归纳分析。

先天肾虚仔鼠脑NCAM1、PLCγ-1表达及21日龄学习能力的实验研究

目的研究先天肾虚大鼠脑神经元发育情况及青少年学习能力,探讨先天肾虚影响脑发育的可能机制。方法恐伤SD孕鼠制备先天肾虚仔鼠,分为空白组、模型组、补肾组;检测出生当日仔鼠血清FT_(3)、FT_(4)含量及脑组织T3含量;光镜及电镜观察脑皮质神经元结构;免疫荧光及Western blot法检测NCAM1、PLCγ-1蛋白表达;21日Morris水迷宫检测学习能力。结果与空白组比较,模型组出生当天血清FT4降低(P<0.01),脑皮质层神经元个数减少,分层不清,核形不规则,核膜缺损,线粒体断裂,NCAM2、PLCγ-1蛋白降低(P<0.01),21日水迷宫检测潜伏时间变长(P<0.01),穿越次数增多(P<0.01);与模型组比较,补肾组出生当天血清FT4升高(P<0.05),皮质神经元个数增多,层次清晰,核仁饱满,线粒体丰富,皮层NCAM1、PLCγ-1蛋白升高(P<0.05),21日水迷宫检测潜伏时间变短(P<0.01),穿越次数减少(P<0.01)。结论先天肾虚通过FT4调节NCAM1/PLCγ-1信号通路影响大鼠脑神经元发育及学习能力。