甘草紫杉烯5α-羟化酶cDNA的生物信息学分析

[目的]分析甘草紫杉烯5α-羟化酶(GuT5H)cDNA序列及其编码的蛋白质的结构特征。[方法]以甘草GuT5H全长cDNA为研究对象,运用生物信息学软件和网络工具预测其编码的蛋白质序列,并分析该蛋白质的结构、功能及分子进化特征。[结果]甘草GuT5H cDNA全长1692 bp,含有1428 bp的开放阅读框,编码475个氨基酸残基的蛋白质;该蛋白质与细胞色素P450家族紫杉烯5α-羟化酶(T5H)成员具有高度的序列一致性,分子进化上与同科植物大豆、苜蓿、鹰嘴豆的T5H关系最为密切。[结论]甘草GuT5H cDNA编码紫杉烯5α-羟化酶,属于细胞色素P450家族成员。

不同产地广金钱草夏佛塔苷含量比较

为研究我国不同产地广金钱草药材中夏佛塔苷含量,采用HPLC法测定了收集于广东、广西、海南、江西、云南5省31乡镇的63份野生广金钱草和69份栽培广金钱草的夏佛塔苷含量,并进行了方差分析和多重比较。结果表明:野生广金钱草夏佛塔苷含量平均为(0.28±0.02)%,栽培广金钱草平均为(0.35±0.02)%,海南、广西两地野生广金钱草夏佛塔苷含量分别比广东高32.38%和30.35%,栽培广金钱草分别高111.39%和83.44%。野生与栽培广金钱草的夏佛塔苷含量均达到2010年版《中国药典》≥0.13%的标准,不同产地广金钱草中夏佛塔苷含量差异明显,海南、广西产广金钱草具有较高的夏佛塔苷含量。

益母草提取物脱色除杂的方法研究

目的:采用石油醚萃取、大孔树脂及凝胶树脂吸附、活性炭超声、RP-18层析4种方法进行研究与比较,筛选出益母草提取液的最佳脱色除杂方法。方法:以益母草中主要有效成分益母草碱、芦丁、金丝桃苷及总固型物为考察指标,考察不同方法的脱色除杂效果。结果:益母草提取液经不同方法脱色后,总固型物的保留率:活性炭>MCI gel>D101>RP-18>Diaion HP 20。若以3倍于药材量的RP-18为吸附剂,80%甲醇为洗脱剂,对益母草提取物脱色后,总有效成分(以益母草碱、芦丁、金丝桃苷计)保留率最高。结论:RP-18对益母草提取物中的色素具有较好的吸附性能,适于除杂纯化。

提高医学检验专业人才培养质量的探讨

为全面提高医学检验专业人才培养质量,增强学生科研创新能力,强化专业知识及实验技能,必须从建设师资队伍、监控教学质量、改革教学方法等方面入手,调动学生的学习积极性,提高教学质量,培养出高素质创新型医学检验人才,为社会发展服务。

基于转录组测序揭示适度干旱胁迫对甘草根基因表达的调控

适度干旱胁迫可促进甘草有效成分的积累,提高药材质量。该研究以栽培6个月的甘草根为材料,设置适度干旱胁迫组（土壤相对含水量40%~45%）和对照组（土壤相对含水量70%~75%）,分别应用Illumina Hi Seq 2000进行转录组双末端测序,分析甘草根响应适度干旱胁迫的差异表达基因。在适度干旱胁迫组和对照组中分别得到80 490 490,82 588 278个Clean reads,经序列拼接和去冗余处理分别得到94 828,305 100个Unigene序列,序列长度的中位数分别为1 007,1 125 nt。差异表达基因分析表明,适度干旱胁迫抑制细胞壁中β-木糖苷酶、天冬酰胺酰内肽酶、GDP-L-岩藻糖合酶等酶的基因表达,可能抑制根细胞的初生壁降解与程序性细胞死亡;促进萜类、黄酮类化合物生物合成的关键酶基因的表达,进而促进甘草有效成分的积累;促进生长素、乙烯、细胞分裂素的生物合成和信号转导,进而促进根的发生和细胞增殖;促进脱落酸、茉莉酸的生物合成和信号转导,进而提高甘草对干旱胁迫的适应能力;抑制赤霉素、油菜素内酯等激素的生物合成和信号转导,进而抑制地上茎的伸长。

不同种源地广金钱草药材质量变异与遗传多样性分析

目的:研究不同种源地广金钱草药材质量变异及遗传多样性,为合理利用广金钱草种质资源及优良品种选育奠定基础。方法:采用AFLP分子标记技术,对18个种源地广金钱草进行遗传多样性分析,用NTSYSpc-2.11F软件计算并分析广金钱草种质间的相似度,构建遗传系统进化树;采用HPLC测定药材夏佛塔苷含量,并进行方差分析。结果:通过筛选得到8对AFLP引物组合,共扩增出844个DNA条带,多态性条带为717个,多态性位点平均为84.27%;通过聚类分析,将18个种源地的广金钱草种质分为3大类。种源间广金钱草药材夏佛塔苷含量差异显著,海南三亚种源夏佛塔苷含量显著高于其他种源地药材夏佛塔苷含量。结论:不同种源广金钱草药材质量差异显著,遗传多样性丰富,蕴藏着优质的种质资源,可以进行综合开发及优良品种选育。

不同炮制方法及提取溶剂对益母草有效成分含量的影响

目的：比较不同炮制方法和提取溶剂对益母草中益母草碱、芦丁和金丝桃苷含量的影响。方法：采用高效液相色谱法，Diamonsil C18（2）色谱枉（4．6mm×250mm，5μm），二极管阵列检测器（DAD），乙腈-10mmol·L磷酸二氢钾溶液为流动相梯度洗脱，检测波长275，350nm，流速1mL·min，柱温30℃。结果：益母草碱、芦丁和金丝桃苷分别在27．50～223．30，14．38～234．10，17．50～282．20ug·mL^-1范围内线性良好。溶剂的提取效率：70％乙醇〉甲醇〉水；不同炮制品中有效成分含量比较：生品〉醋炙品〉酒炙品。结论：建立了同时定量益母草中生物碱和黄酮类化合物的分析方法。益母草药材经过炮制后生物碱及黄酮类含量明显降低。