鲎试验法检测重组人干扰素α-1b成品中细菌内毒素含量

目的:探索重组人干扰素α-1b成品中细菌内毒素含量的检测方法。方法:利用鲎试剂和细菌内毒素的特异性反应产生不可逆的凝胶反应来检测干扰素中细菌内毒素的含量。结果:鲎试验法可以代替传统的家兔法检测重组人干扰毒α-1b成品中细菌内毒素含量。结论:鲎试验法灵敏性高、特异性和重复性好,可有效检测干扰素中细菌内毒素含量。

重组人α干扰素单克隆抗体的研制及其应用

目的 研制抗干扰素的单克隆抗体 (McAb)及其应用。方法 应用杂交瘤技术 ,获得 4 0株抗重组人α干扰素的单克隆抗体细胞株 ;用ELISA方法检测腹水滴度 ,用辛酸法纯化McAb。结果 4 0株细胞中 2E9、4G1能稳定分泌抗重组人α1b干扰素的单克隆抗体 ,2C9为抗重组新型干扰素 ,2A7、4G10分泌抗重组人α干扰素 (α1b、α2b、α2a、)和重组集成干扰素、重组新型干扰素的单克隆抗体细胞系 ;体外连续传代 6个月 ,分泌抗体能力不变 ,特异性专一。 5株单克隆抗体均为IgG。采用辛酸方法提纯抗体纯度达到 95 %以上。粗制的重组人α干扰素经 4G10单克隆抗体亲和层析柱提纯后 ,获得的干扰素纯度 95 %以上 ,平均收率 93% ,残余鼠IgG含量 <10 0ng 剂量 (5 0 μg)。 2C9单克隆抗体亲和层析柱适用于纯化新型干扰素。结论 4G10单克隆抗体亲和层析柱可以应用于大规模重组人α干扰素生产。