非洲猪瘟病毒p72蛋白的真核表达及反应原性鉴定

将p72基因克隆到载体pFast Bac/NT-TOPO上,转化大肠埃希菌DH5α。将获得的重组载体pFastBac/NT-TOPO-p72,转化大肠埃希菌DH10Bac,获得重组杆状病毒质粒bacmid-p72。通过脂质体介导,将bacmid-p72转染sf9细胞,获得重组杆状病毒。用重组杆状病毒感染正常生长的sf9细胞,72h后收集细胞,超声破碎后取上清进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示,重组蛋白大小约78ku,且重组蛋白可以与非洲猪瘟标准阳性血清反应。说明表达的重组蛋白为可溶性的,并具有良好的反应原性。

非洲猪瘟病毒p54基因的原核表达及其抗体的间接ELISA检测方法的建立

将非洲猪瘟病毒P54基因克隆到原核表达载体pET-52b(+)3C/LIC中,转入BL21(DE3)菌中诱导表达,对表达蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析的结果表明,表达蛋p54的分子质量约为28ku,具有很好的抗原性。纯化p54蛋白后,采用2.5μg/mL浓度作包被抗原,建立了检测非洲猪瘟p54抗体的间接ELISA方法,结果表明建立的间接ELISA方法特异性、敏感性都较好。

非洲猪瘟病毒p54蛋白抗原表位预测及鉴定

为鉴定非洲猪瘟病毒(ASFV)p54蛋白的B细胞线性抗原表位,本研究利用生物信息学方法结合抗原指数对ASFV p54蛋白进行抗原表位的预测,人工合成预测的抗原表位多肽,利用ASFV阳性血清以及特异性单克隆抗体(MAb),采用间接ELISA和阻断ELISA方法验证所预测抗原表位多肽的免疫学特性。预测结果显示,可能的抗原表位区域有:aa23-aa29,aa36-aa45,aa72-aa94,aa114-aa120,aa124-aa130,aa137-aa150。间接ELISA试验表明aa23-aa29,aa36-aa45,aa72-aa94,aa114-aa120,aa137-aa150多肽的抗原性较好,其中aa36-aa45,aa72-aa94多肽可以分别与两株杂交瘤细胞分泌的MAb发生特异性反应,本研究为ASF多肽疫苗及免疫学临床诊断方法的建立奠定基础。

自然强光对阴生植物虎耳草光合特性的影响

采用LI-6400光合测定仪对阴棚内和自然光强下的虎耳草叶片光合特性进行了比较,同时测定了叶绿素的含量。研究发现,阳光下的虎耳草光合速率显著降低,主要受光量子密度的影响;阳光下的叶片总叶绿素含量降低明显,类胡萝卜素却明显升高。

两用核不育系水稻叶绿体DNA的比较研究

以典型籼稻和粳稻作对照,运用叶绿体特异引物对湖南省应用较广的部分两用核不育系叶绿体DNA进行比较研究。对两用核不育系进行叶绿体DNA的ORF100、ORF29-TrnCGCA片段进行扩增及片段大小比较以及rps16基因内含子和TrnTUGU-TrnLUAA转录间区2个序列进行扩增、测序及序列比较。结果表明,株1S、陆18S、株77S、H628S、88S、白天鹭S、G0543S、G03S、1103S和W6154S的叶绿体DNA的ORF100、ORF29-TrnCGCA两片段的大小均与典型的籼稻一致,其他材料则与典型粳稻相同;叶绿体DNA碱基多态性较丰富的2个区域rps16基因内含子和TrnTUGU-TrnLUAA间区的测序后发现4个籼粳稻特异位点,这4个位点对两用不育系叶绿体籼粳属性的判断与ORF100、ORF29-TrnCGCA片段的结果一致。根据育出组合的数量和质量,带有粳型血缘细胞质的两用核不育系如准S、810S、中心S、C185S和培矮64S等显现了一定的优势,通过籼粳稻杂交选育具粳稻血缘的籼型不育系是提高杂交水稻产量的有效途径之一。

超声波处理对糙米淀粉结构与理化性质的影响

该文讨论不同超声时间处理下糙米淀粉的结构特征与理化性质,分析糙米淀粉的表观与晶体结构,以及流变学、热力学、透光率、析水率和凝沉性等理化性质,以期为糙米淀粉在超声波食品加工中的应用提供理论依据。结果表明:延长超声处理时间会加重糙米淀粉表观结构的受损程度,但不会改变粒径大小,超声波处理不会改变糙米淀粉晶型,但是显著影响其结晶性质(p<0.05),处理30 min时结晶度达到最大(12.60%±0.08%),随后降低至与对照组(未经超声处理的糙米淀粉)无显著差异。糙米淀粉储能模量(G′)与损耗模量(G″)经超声处理后低于对照组,表现为黏弹性降低。随着超声处理时间延长,淀粉的糊化焓值ΔH_(g)从(6.88±0.51)J/g降低至(1.36±0.27)J/g(40 min),随后升高至(7.88±0.32)J/g(50 min)。另外经过超声处理,淀粉糊的透光率由(0.52±0.04)%降低至(0.23±0.02)%(40 min),随后又升高至(0.46±0.02)%(50 min),超声处理30 min时,糙米淀粉的冻融与凝沉稳定性最好,冻融析水率为(43.51±3.06)%,凝沉沉淀占比为(56.00±1.89)%。研究表明,超声显著影响糙米淀粉的结构特征与理化性质(p<0.05),适度的超声处理可以赋予糙米淀粉产品更好的加工特性与感官品质。

基于断裂力学的射孔套管孔边开裂行为分析

针对内压作用下的射孔套管的孔边开裂行为,应用断裂力学分别对线弹性条件和弹塑性条件下的孔边开裂进行分析,给出线弹性条件下圆柱壳体孔边裂纹应力强度因子和临界开裂内压公式,以及弹塑性条件下含孔边裂纹管道的临界开裂内压公式;通过MATLAB对两种条件下的力学模型进行解析,首先从线弹性条件下内压、裂纹长度以及孔径对应力强度因子的影响展开分析;然后从弹塑性条件下孔径和裂纹长度对临界开裂内压的影响进行分析;最后对小范围屈服情况下的两种断裂判据的套管临界开裂内压进行了对比。

基于AlexNet-SN网络的煤与煤矸石分类方法

现有煤矸石分选方法主要依据人工设计特征对煤矸石进行识别,但特征提取过程复杂,准确率也较低。随着人工智能技术的快速发展,智能选矸成为解决煤矸石分拣问题的重要研究方向。为提高煤与煤矸石分类准确率,本文提出了一种基于AlexNet网络和风格迁移技术改进的煤矸石分拣方法。选用3×3的卷积核代替原AlexNet网络前几层中较大的卷积核,利用BN层代替LRN层和Dropout,并采用风格迁移数据增强法提高煤与煤矸石数据集的多样性。研究结果表明,与原始的AlexNet网络相比,该方法的准确率提高了1.8%,损失率下降了2.0%。此方法不仅能够满足煤与煤矸石实时检测的要求,而且具有更高的识别精度,能有效应用于煤矸石识别。

基于改进YOLO算法的船舰目标检测DT-YOLO方法研究

针对舰载无人直升机自主着舰场景理解进场阶段舰船检测问题,提出基于YOLO改进的DT-YOLO舰船目标检测算法。将YOLO的特征提取网络中的残差结构改造为DenseNet中的密集链接结构,并将特征金字塔设计为5层,使得特征图更小,能够进一步提高检测精度。对NMS算法使用线性对数衰减的方式进行增强,有效解决舰船相互遮挡时的漏检情况。最后,建立舰船数据集对算法进行测试和分析。算法平均精准度AP达到94.21%,检测速度到达61.48帧/秒,结果表明算法对舰载无人直升机进场阶段时的舰船检测具有良好的鲁棒性,有效提升了目标较大及相互遮挡时的检测能力。

KLu(MoO_(4))2:Yb^(3+)/Ho^(3+)荧光粉的制备及其温度传感性能探究

利用柠檬酸辅助水热合成前驱体再进行煅烧的方法,制备一系列KLu(MoO_(4))_(2):Yb^(3+)/Ho^(3+)荧光粉。合成的荧光粉在980 nm的红外光激发下,KLu(MoO_(4))_(2):Yb^(3+)/Ho^(3+)主要发射位置在绿光区(540 nm)和红光区(660 nm)。在323~523 K的温度范围内,研究了KLu(MoO_(4))_(2):20%Yb^(3+)0.3%Ho^(3+)温度传感性能。通过计算,在温度为323 K下,得到最高的相对灵敏度为0.0042 K^(-1)。结果表明,所得KLu(MoO_(4))_(2):Yb^(3+)/Ho^(3+)荧光粉是一种潜在温度敏感材料。

两种黄体酮阴道用药方案在胚胎植入前经遗传学检测的冻融胚胎移植中的临床效果

目的比较黄体酮阴道缓释凝胶联合地屈孕酮和黄体酮软胶囊联合地屈孕酮作为胚胎植入前遗传学检测(PGT)冻融胚胎移植后黄体支持的效果。方法选择2017年6月~2020年6月在我院接受PGT助孕的209例患者,根据在激素替代冻融胚胎移植周期中阴道黄体支持用药的不同将患者分为2组:黄体酮阴道缓释凝胶(雪诺同)+地屈孕酮组(n=135)和黄体酮软胶囊(安琪坦)+地屈孕酮组(n=74),比较两种联合用药方案的临床应用效果及妊娠结局。结果两组的年龄、不孕年限、抗苗勒氏激素、基础窦卵泡数、BMI、基础FSH、基础LH、基础E2差异无统计学意义(P>0.05);两组Gn启动剂量、Gn时间、Gn总剂量、h CG日LH、E2、P及内膜厚度、获卵数、MII卵子数、受精数及可移植囊胚数差异无统计学意义(P>0.05);两组冻胚移植周期内膜准备时间、内膜转化日P和内膜厚度、生化妊娠率(69.63%vs 78.38%)、临床妊娠率(62.96%vs 72.97%)、流产率(12.94%vs 11.11%)、早孕阴道出血率(20%vs 27.78%)及阴道出血者的流产率(35.29%vs 20%)的差异无统计学意义(P>0.05)。结论黄体酮阴道缓释凝胶联合地屈孕酮和黄体酮软胶囊联合地屈孕酮作为PGT冻融胚胎移植后黄体支持可获得相似的临床效果。

不同质量卵裂期胚胎发育至囊胚能力的研究

目的探讨体外受精治疗中第3天(D3)不同质量卵裂期胚胎培养至囊胚的发育潜能,为囊胚培养提供实验室依据。方法对2015年4月—2019年4月D3移植或冷冻后剩余行囊胚培养的5510枚胚胎进行了回顾性分析。按D3胚胎质量、卵裂球数目、均一性及碎片率分组,比较囊胚形成率,优质囊胚形成率及可利用囊胚形成率,并分析各因素与可利用囊胚形成的相关性。结果D3优质胚胎的囊胚形成率,优质囊胚形成率及可利用囊胚形成率与非优质胚胎组相比有统计学差异(P<0.05);4-6细胞组及<4细胞组与7-9细胞组相比有统计学差异(P<0.05),但融合期胚胎(CP)组及>9细胞组与7-9细胞组相比差异无统计学意义;卵裂球大小差异(+)组和(++/+++)组与卵裂球大小均匀(-)相比有统计学差异(P<0.05);10%~25%组及碎片>25%组与碎片≤10%组相比有统计学差异(P<0.05)。Logistic分析结果表明,D3胚胎质量、卵裂球数目、均一性及胚胎碎片率与可利用囊胚形成显著相关(P<0.05)。结论D3胚胎质量、卵裂球数目、均一性及胚胎碎片均会影响到囊胚的形成及质量,其中胚胎质量和卵裂球数目对可利用囊胚形成的影响较大。

透明带结合法用于ICSI精子筛选的研究进展

卵胞质内单精子注射(ICSI)是解决辅助生育中因严重男性因素造成不育的主要手段。自然受孕过程中,精子经过生殖道的层层筛选,相比之下,目前国内外的生殖中心仅通过形态及活力选择精子进行ICSI,缺乏有效的精子筛选策略。本文对基于精子功能筛选为目的的透明带结合法的相关文献进行回顾与总结,以期为此方法的临床应用提供参考。

基于Chan与AUKF联合的人员定位算法

针对目前超宽带人员定位技术在复杂环境中产生较大误差的问题,提出了一种基于Chan算法与自适应无迹卡尔曼滤波AUKF的联合定位算法。利用Chan算法去除噪声较大的数据,确定误差相对较小的初始坐标,将Chan算法的估计值作为AUKF的初始值进行滤波处理,确定精确的位置坐标,在视距与非视距环境下仿真分析变电站的人员定位。结果表明,在视距环境下,文中提出的算法略优于Chan算法。在非视距环境下,Chan-AUKF联合定位算法的误差值约为10 cm,而Chan算法的误差值约为20 cm,定位精度提高约10 cm。

航空电气系统储能技术控制策略综述

随着航空领域以及多电飞机的飞速发展,对其电气系统性能提出更高精度和更高效率的要求,研究航空储能系统充配电总体布局以及控制技术成为研究热点。本文首先提出储能系统拓扑结构,分析蓄电池充电的约束条件,然后提出估算蓄电池SOC的方法,最后针对传统充电方案存在缓慢效率低等缺点,对航空储能系统的充电技术作出全面分析和总结,并以此为基础提出合理可靠的高效率快速多阶段充电技术的顶层设计。

非洲猪瘟病毒P54蛋白的真核表达及间接ELISA检测方法的建立

利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达出非洲猪瘟病毒P54蛋白。经SDS-PAGE和Westernblot分析后,以P54重组蛋白作为检测抗原包被酶标板,通过优化各反应条件,建立了检测非洲猪瘟血清抗体的间接ELISA方法。结果显示,P54重组蛋白的大小约为25ku;经Western-blot试验证实,它具有良好的抗原性。建立的间接ELISA方法的检测灵敏度可达1∶320,批内、批间变异系数均小于10%。与商品化的非洲猪瘟竞争ELISA试剂盒比较,符合率达100%。用该间接ELISA方法检测其他不同疫病猪的阳性血清样本,结果均为阴性,表明无交叉反应。结果表明,建立的用以检测非洲猪瘟病毒的间接ELISA方法具有敏感性高、重复性好、特异性好的特点。

天门冬ISSR分子标记技术的建立与体系优化

目的建立并优化天门冬ISSR-PCR反应体系和扩增程序,为探讨天门冬种质间遗传多样性提供依据。方法采用单因子试验和正交设计法,研究Mg2+、dNTP、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA、延伸时间及循环次数对PCR扩增的影响。结果天门冬ISSR-PCR的最佳反应体系为25μL的反应体系中含模板DNA 40 ng、Mg2+1.25 mmol/L、dNTP 320μmol/L、引物1.2μmol/L、Taq DNA聚合酶1.5 U。在此基础上,从50条引物中筛选出13条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物,并通过梯度PCR试验,确定引物最佳退火温度。结论建立的天门冬ISSR-PCR反应体系,经过17份天门冬种质检验,证明该体系稳定可靠,可用于天门冬遗传分析。

非洲猪瘟病毒p54蛋白特定抗原表位单克隆抗体的制备

为了制备针对非洲猪瘟病毒p54蛋白已知特定抗原表位的单克隆抗体,采用原核表达的重组蛋白p54免疫小鼠,并制备了原核表达p54蛋白、真核表达p54蛋白以及人工合成特定抗原表位氨基酸多肽A三种筛选抗原,筛选出了1株针对已知抗原位点的杂交瘤细胞株。对其分泌的单克隆抗体进行了亚类及特异性鉴定,并利用ProteOn XPR36大分子相互作用系统分析了该单克隆抗体的亲和性。结果显示,该单克隆抗体属IgG1亚类,特异性强、亲和力高。这为以后的免疫学检测方法的建立奠定了基础。

不同条件下IVF实验室试剂潜在毒性的比较

目的探究不同的保存方式对开封后体外受精(IVF)实验室试剂潜在胚胎毒性的影响。方法收集2022年7-10月于广州市妇女儿童医疗中心生殖医学中心常规精液分析且各项参数正常的废弃精子标本18份。将待检测的开封后卵母细胞及胚胎处理液(G-MOPS)、洗精受精液(G-IVF)、卵裂胚培养液(G-1)、囊胚培养液(G-2)试剂每种分为3组,Ⅰ组:取1/3体积待测试剂在无菌条件下分装并用封口胶密封;Ⅱ组:取1/3体积待测试剂在无菌条件下分装不用封口胶密封;Ⅲ组:余下1/3体积待测试剂不分装用封口胶密封,每组6份标本。每种试剂的3组均于4℃保存,在开封时及开封15、30 d时,以质控合格的前一批次G-IVF为对照,所有试剂平衡过夜后进行人精子存活试验(HSMA),72 h后计算并比较精子存活指数。结果开封时各组试剂的精子存活指数比较差异均无统计学意义(P均>0.05),且3个时间段每组试剂精子存活指数均>0.85。开封15 d各组试剂的精子存活指数比较:G-1的Ⅰ组>Ⅱ组[(95.82±0.58)%vs.(94.38±0.64)%],4种待测试剂G-MOPS、G-IVF、G-1、G-2的Ⅰ组>Ⅲ组[(95.75±0.48)%vs.(93.90±0.74)%、(97.25±0.67)%vs.(95.03±0.58)%、(95.82±0.58)%vs.(92.75±0.86)%、(93.92±0.74)%vs.(91.11±1.15)%],差异均有统计学意义(P均<0.05)。开封30 d各组试剂的精子存活指数比较:G-IVF、G-1、G-2的Ⅰ组>Ⅱ组[(97.00±0.61)%vs.(95.72±0.70)%、(95.05±0.81)%vs.(93.33±0.69)%、(93.45±0.67)%vs.(92.22±0.85)%],4种待测试剂G-MOPS、G-IVF、G-1、G-2的Ⅰ组>Ⅲ组[(94.88±0.83)%vs.(92.90±0.62)%、(97.00±0.61)%vs.(94.18±0.58)%、(95.05±0.81)%vs.(92.10±0.61)%、(93.45±0.67)%vs.(90.32±0.51)%],差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论无论哪组试剂开封后在4℃保存30 d仍无潜在的胚胎毒性。相同时间点,开封后的试剂分装并用封口胶密封的保存效果更好。

冻融胚胎移植周期中不同辅助生殖技术助孕方式和移植不同发育阶段胚胎对出生性别比的影响

目的探讨冻融胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer,FET)周期中不同辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)助孕方式和移植不同发育阶段胚胎对新生儿性别的影响。方法回顾性队列研究分析2010年4月至2018年10月期间于广州市妇女儿童医疗中心生殖中心接受体外受精(in vitro fertilization,IVF)、卵胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)和胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,PGT)治疗并进行FET且成功分娩的患者和新生儿临床资料。比较不同助孕方式及移植不同发育阶段胚胎对新生儿性别的影响。结果①IVF-FET共898对夫妇(920个周期),1166名新生儿,出生性别比为106.7。移植桑葚期前、桑葚期或囊胚期胚胎,出生性别比逐渐增高(99.0,135.4,142.6),但各组间差异无统计学意义(P>0.05)。②ICSI-FET(含PGT)共415对夫妇(433个周期),555名新生儿,出生性别比为111.0。移植不同发育阶段胚胎,出生性别比(116.0、87.2、137.5)差异无统计学意义(P>0.05)。③PGT-FET共33对夫妇(33个周期),33名新生儿,出生性别比为153.8。移植IVF、ICSI或PGT解冻囊胚对出生性别比没有显著影响(P>0.05)。结论在FET周期中,采用IVF技术助孕,移植较晚发育阶段胚胎可能会增加出生性别比的风险;ICSI技术移植不同发育阶段胚胎或移植IVF、ICSI或PGT囊胚对新生儿性别没有显著影响。