基于磷脂酰肌醇3激酶与苏氨酸蛋白激酶1信号通路小檗碱调节巨噬细胞极化机制研究

目的探究小檗碱对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人髓系白血病单核细胞(THP-1)巨噬细胞极化的影响和可能作用机制。方法采用佛波酯(PMA)将THP-1细胞诱导成巨噬细胞,加入不同浓度的小檗碱,分别为对照组、小檗碱5μmol/L组、小檗碱10μmol/L组、小檗碱20μmol/L组、小檗碱40μmol/L组、小檗碱50μmol/L组,干预24 h或48 h。采用细胞计数8试剂盒检测细胞活力,筛选小檗碱最佳浓度和时间。将PMA诱导的THP-1巨噬细胞分为空白组、模型组、小檗碱组、抑制剂组、小檗碱+抑制剂组。酶联免疫吸附测定检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))的含量;定量聚合酶链反应检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、精氨酸酶1(Arg1)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、苏氨酸蛋白激酶1(Akt1)mRNA表达情况;Western blot检测Akt1和磷酸化Akt1(p-Akt1)抗体蛋白含量。结果干预24 h时,与对照组比较,小檗碱40μmol/L组和50μmol/L组巨噬细胞活性降低(P<0.05);干预48 h时,小檗碱5μmol/L组、小檗碱10μmol/L组、小檗碱20μmol/L组、小檗碱40μmol/L组、小檗碱50μmol/L组巨噬细胞活性均低于对照组[(0.89±0.02)%、(0.82±0.03)%、(0.71±0.02)%、(0.62±0.03)%、(0.53±0.02)%vs(1.01±0.01)%,P<0.05]。小檗碱20μmol/L组处理24 h时对细胞活力影响不大,作为最佳浓度和时间。与空白组比较,模型组iNOS含量和TNF-αmRNA水平升高,TGF-β_(1)含量、Arg1 mRNA、PI3K mRNA、Akt1 mRNA及p-Akt1/Akt1蛋白表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,小檗碱组iNOS含量和TNF-αmRNA水平降低,TGF-β_(1)含量、Arg1 mRNA、PI3K mRNA、Akt1 mRNA及p-Akt1/Akt1蛋白表达水平升高(P<0.05);与小檗碱组比较,小檗碱+抑制剂组iNOS含量和TNF-αmRNA水平升高,Arg1 mRNA、PI3K mRNA、Akt1 mRNA及p-Akt1/Akt1蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论小檗碱可通过激活PI3K/Akt1通路,抑制ox-LDL诱导的THP-1巨噬细胞炎性反应,并抑制巨噬细胞向M1型极化,促进其向M2型极化。

小檗碱联合姜黄素调控M1巨噬细胞极化对动脉粥样硬化的作用机制

目的探究小檗碱联合姜黄素通过介导巨噬细胞向M1极化对动脉粥样硬化(AS)的作用及机制。方法常规培养小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7),通过脂多糖(LPS,100 ng/mL)和γ干扰素(IFN-γ)(20 ng/mL)诱导巨噬细胞RAW264.7获得M1型巨噬细胞,建立细胞模型。将细胞分为对照组、模型组、小檗碱组、姜黄素组、小檗碱+姜黄素联合治疗组。通过CCK-8方法检测小檗碱和姜黄素的处理浓度。ELISA检测各组巨噬细胞上清液M1型巨噬细胞标记物iNOS、TNF-α、CXCL9和p-STAT6/STAT6的表达水平;RT-PCR方法检测iNOS、TNF-α和CXCL9 mRNA水平;Western blot检测各组iNOS、STAT6和p-STAT6蛋白水平。此外,通过siRNA技术下调STAT6水平后,通过Western blot检测p-STAT6蛋白水平的表达;ELISA检测iNOS、TNF-α、CXCL9和p-STAT6表达水平。结果LPS和IFN-γ联合诱导M1巨噬细胞极化中,相较于其他药物浓度组比,小檗碱(25μmol/L)、姜黄素(20μmol/L)为最佳药物浓度,两者单用和联用均不能显著抑制RAW264.7细胞活力(P<0.05)。与正常组比较,模型组iNOS、TNF-α和CXCL9 mRNA和蛋白水平均升高,p-STAT6/STAT6水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,小檗碱组、姜黄素组、小檗碱+姜黄素联合治疗组中iNOS、TNF-α和CXCL9 mRNA和蛋白水平均降低,p-STAT6/STAT6水平升高,且小檗碱+姜黄素联合治疗组中变化的更加明显,差异有统计学意义(P<0.05)。在小檗碱+姜黄素联合治疗组的M1型巨噬细胞中转染STAT6 siRNA后可下调p-STAT6水平,上调iNOS、TNF-α和CXCL9表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论小檗碱和姜黄素对M1型巨噬细胞的活性均有抑制作用,能够减轻炎症反应。此外,小檗碱与姜黄素联合作用较单药使用更有优势,可能是通过活化STAT6发挥其主要作用机制。

互联网+急性心肌梗死规范化快速救治体系对急性ST段抬高型心肌梗死患者救治预后的影响

目的探讨互联网+急性心肌梗死规范化快速救治体系(ISRTS)对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)急救预后的影响。方法采用回顾性非同期队列研究方法。郑州市第一人民医院自2017年11月开始实施ISRTS及流程,选取未实施ISRTS之前的2017年4月至2017年10月收治可行PCI的STEMI患者为对照组(106例),采用传统模式进行常规救治;选取2017年11月至2018年5月收治可行PCI的STEMI患者为观察组(110例),采取ISRTS及流程进行救治。比较两组患者的一般资料、快速反应指标、入院时病情程度指标、住院期间并发症、社会效益指标、术后6个月主要不良心脏事件等。结果观察组的快速反应指标(发病至呼救120时间、发病至首次心电图完成时间、发病至入院时间、入院至首次心肌酶完成时间、入门-球囊扩张时间、首次医疗接触到血管开通时间)均短于对照组(P均<0.001),入院时病情程度指标(cTnI、NT-proBNP、LVEF、LVESD、LVEDD、hs-CRP)均轻于对照组(P均<0.01),主动脉球囊反搏应用率低于对照组(P<0.05),社会效益指标(药占比、平均住院费用、平均住院时间、患者满意度)均优于对照组(P均<0.001),住院期间并发症(心功能不全、心源性休克、室壁瘤、恶性心律失常及总并发症)发生率低于对照组(P均<0.05),术后6个月主要不良心脏事件低于对照组(P<0.001)。结论ISRTS建立优化STEMI救治流程,提高救治效率,缩短心肌再灌注时间,减少并发症,有效改善STEMI患者的临床预后,创造了良好的社会效益。

PTD4-Cu/ZnSOD融合蛋白对缺氧复氧损伤模型大鼠心肌细胞H9C2心肌线粒体功能的影响

目的探讨蛋白质转导结构域4-铜锌超氧化物歧化酶(PTD4-Cu/ZnSOD)融合蛋白对缺氧/复氧损伤心肌线粒体功能的影响。方法 H9C2大鼠心肌细胞采用厌氧培养箱培养(85%N_2,10%H_2,5%CO_2)制作缺氧复氧损伤模型,之后在缺氧复氧损伤细胞培养液中不加任何处理因素作为HRI组,分别加入10μmol/L Cu/ZnSOD作为Cu/ZnSOD组、10μmol/L PTD4-Cu/ZnSOD作为PTD4-Cu/ZnSOD组,且以正常培养心肌细胞作为正常组。采用JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,生化测定心肌细胞线粒体三磷酸腺苷(ATP)酶活性、超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量,Western blot检测心肌细胞线粒体B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白、Bax蛋白的表达。结果 HRI组线粒体膜电位显著低于正常组;PTD4-Cu/ZnSOD组线粒体膜电位较正常组较低。各处理组心肌细胞凋亡指数均明显高于正常组(P<0.01);PTD4-Cu/ZnSOD组心肌细胞凋亡指数较HRI组明显降低(P<0.01)。PTD4-Cu/ZnSOD组线粒体ATP酶活性明显高于HRI组,且超氧化物歧化酶活性较高,显著降低丙二醛含量(P<0.01)。HRI组Bcl-2蛋白表达低于正常组,Bax蛋白表达高于正常组(P<0.01);与HRI组比较,PTD4-Cu/ZnSOD融合蛋白能显著增加Bcl-2蛋白表达,降低Bax蛋白表达(P<0.01)。结论 PTD4-Cu/ZnSOD融合蛋白可提高线粒体ATP酶活性,减轻线粒体损伤;提高线粒体SOD活性,减轻自由基对线粒体损伤;提高线粒体膜Bcl-2蛋白表达,降低Bax蛋白表达,从而发挥心肌保护作用。

胸痛中心建设对急性非ST段抬高型心肌梗死患者救治效果的影响

目的探讨胸痛中心建设对急性非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)患者救治效果的影响。方法回顾性分析2014年7月至2016年7月就诊于郑州市第一人民医院且接受冠脉介入治疗的178例NSTEMI患者临床资料。将2015年7月胸痛中心认证前收治的88例患者纳入对照组,将此后收治的90例患者纳入观察组。对照组经传统模式救治,观察组按照胸痛中心规范化流程救治。比较两组患者一般资料、院内救治效率、预后及社会经济效益。结果两组患者性别、年龄、血浆超敏肌钙蛋白水平、全球急性冠脉事件登记(GRACE)评分、病变血管分布、支架植入数量、血脂,以及高血压、糖尿病患病率等相比,差异无统计学意义(均P>0.05)。观察组诊断时间、介入治疗时间、住院时间短于对照组(均P<0.05),血浆脑钠肽水平低于对照组(P<0.05),左室射血分数、规范化药物治疗率、治疗依从性高于对照组(均P<0.05),住院费用低于对照组(P<0.05)。观察组心绞痛再发率、心律失常发生率、术后1 a主要心血管不良事件发生率低于对照组(均P<0.05)。两组出血发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论建设胸痛中心能对NSTEMI患者的诊治过程起到规范化作用,可提高患者院内救治效率,改善预后,创造良好的社会经济效益。

冠心病心肌缺血患者应用卡维地洛联合尼可地尔治疗的疗效及对左室舒张功能的影响

探究应用尼可地尔与卡维地洛配合治疗冠心病心肌缺血患者的临床疗效及对左室舒张功能的影响情况。选择2015年10月~2016年11月在我院接受治疗的冠心病心肌缺血患者80例作为临床研究对象,按照投掷硬币的方式将其随机平均分为对照组、观察组两组。对照组40例患者给予常规药物治疗,观察组40例患者应用尼可地尔与卡维地洛配合治疗治疗,比较两患者治疗后的临床疗效情况以及左室舒张情况。两组患者经不同治疗方法治疗后,对照组患者ST段24h内压低次数(4.62±1.28)次以及压低持续时间(28.22±10.82)分显著高于观察组患者的;观察组患者的舒张早期二尖瓣前叶峰流速度(E峰)(69.54±8.45)cm/s、舒张晚期前叶峰流速度(A峰)(59.43±9.54)cm/s以及E/A值(1.12±0.56)与对照组患者的相比具有显著差异,统计学上均有意义(P<0.05)。对冠心病心肌缺血患者应用尼可地尔与卡维地洛配合治疗可有效改善患者心肌功能,减少心绞痛发作次数,有较高的临床应用价值。

浅析血管迷走性晕厥患者的临床诊治

血管迷走性晕厥是不伴有器质性病变,以心脏神经调节功能异常为主的一种疾病。其临床表现差异大,可见胸痛、胸闷、心悸、头晕、出汗、恶心及晕厥等多种症状,伴心率时快时慢,血压偏低等体征,故疾病指征特异性差,易导致临床误诊及漏诊。其主要发病机制为各种原因引起交感神经兴奋,迷走神经反射性张力增高抑制交感神经过度,而出现的"矫枉过正"现象。随着医疗技术迅速发展,对血管迷走性晕厥的检查技术也越来越多,其中以直立倾斜试验最为常用。治疗上有药物治疗和神经消融,以药物治疗为主。

浅谈新型口服抗凝药在房颤抗凝治疗中的临床应用

房颤是临床常见的心律失常疾病,能引起栓塞的发生,严重影响患者身体健康,故抗凝治疗在房颤治疗中尤为重要。华法林已被证实的传统口服抗凝药,但因其出血风险高等缺点限制了其临床应用。近年来出现的新型口服抗凝药克服了华法林的上述缺点,备受临床关注。

内皮祖细胞与冠状动脉支架置入术后再内皮化的研究进展

冠状动脉内支架置入术已成为目前冠状动脉粥样硬化治疗的最重要手段之一,支架内涂层药物能抑制平滑肌细胞的生长,降低血栓发生率,但也抑制了内皮细胞的爬行,延迟了再内皮化的进展。如何促进再内皮化已成为关注的焦点,内皮祖细胞的发现和不断的研究进展,为再内皮化打开了一条新道路。

不同缺血后适应方法对改善急性ST段抬高型心肌梗死患者缺血再灌注损伤中的保护作用

目的探讨不同的缺血后适应(postischemia conditioning,PIC)方法对改善急性ST段抬高型心肌梗死(ST segment elevation myocardial infarction,STEMI)患者缺血再灌注损伤中的保护作用。方法本研究入选患者为2021年8月至2022年10月在郑州市第一人民医院心内科住院且发病后12 h内接受急诊PCI的STEMI患者。依据不同的PIC方法分组,分成A、B、C、D、E五组,每组各30例。A组在导引导丝通过梗死相关动脉或球囊扩张后(支架植入前)行直接支架植入术,B组在导丝通过后1 min分别予以预扩张球囊10 s缺血/10 s再灌注3次,后常规支架置入术;C组在导丝通过后1 min分别予以预扩张球囊30 s缺血/10 s再灌注3次,后常规支架置入;D组在导丝通过后3 min分别予以预扩张球囊10 s缺血/10 s再灌注3次,后常规支架置入;E组在导丝通过后3 min分别予以预扩张球囊30 s缺血/10 s再灌注3次,后常规支架置入。观察五组患者的一般临床资料、疗效评价指标、安全性指标。结果五组患者在年龄、性别、危险因素、发病至就诊时间、发病至梗死相关血管开通时间等方面比较差异无统计学意义(P>0.05)。与A组比较,B、C、D、E组患者在TFC、cTFC、心电图ST段回落率等方面有明显改善,差异有统计学意义(P<0.05),但在再灌注损伤方面、术后心功能、TIMI、TMPG等方面比较差异无统计学意义(P>0.05);安全性指标方面,五组间比较无统计学差异(P>0.05)。结论缺血后适应对急性ST段抬高型心肌梗死患者的缺血再灌注损伤有保护作用,缺血后适应操作越早可能对于缺血再灌注损伤保护更佳。

尼可地尔对老年糖尿病并STEMI患者直接PCI缺血再灌注的心肌保护效应

目的:探讨尼可地尔对老年糖尿病并急性ST段抬高心肌梗死(STEMI)患者直接经皮冠状动脉介入(PCI)缺血-再灌注损伤(IRI)的心肌保护效应。方法:选取老年糖尿病并STEMI患者124例,均符合直接PCI适应证,按照分层区组随机化原则分为对照组(62例)和尼可地尔组(62例)。对照组患者行常规PCI;尼可地尔组在对照组治疗的基础上,术前给予注射用尼可地尔以0.06 mg·kg^(-1)(限制3~4 mg/次)静注,术中2 mg冠状动脉内给药,并以4 mg·h^(-1)静脉泵注24 h,之后尼可地尔片5 mg/次,3次/d,口服6个月。于术前及术后监测两组患者:(1)心肌IRI指标:血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)及超敏肌钙蛋白T(hs-cTnT);心力衰竭指标:N末端脑钠肽前体(NT-pro BNP);(2)冠状动脉微循环灌注指标:心肌梗死溶栓试验(TIMI)血流分级和校正的TIMI帧数(CTFC);(3)再灌注心律失常(RA);(4)超声心动图检查左心室室壁运动评分指数(WMSI)和左室射血分数(LVEF);(5)术后6个月内主要不良心血管事件(MACE);(6)术后6个月内药物不良反应。结果:(1)于PCI术后0,6,12,24 h及术后3,7 d,尼可地尔组的血清cTnI水平均明显低于对照组(F_(组间)=62.537,P_(组间)<0.01);(2)PCI术后尼可地尔组TIMI血流分级优于对照组(Z=-2.227,P=0.026),CTFC低于对照组(t=5.937,P<0.001);(3)PCI后14 d尼可地尔组的WMSI低于对照组(t=14.974,P<0.001),LVEF高于对照组(t=-5.268,P<0.001);(4)于术后1,3,7,14 d,尼可地尔组的血清NT-proBNP水平均低于对照组(F_(组间)=54.818,P_(组间)<0.01);(5)IRA开通后4 h内尼可地尔组RA的发生率低于对照组(χ~2=9.325,P=0.002);(6)术后6个月内尼可地尔组MACE发生率低于对照组(χ~2=4.613,P=0.032);(7)两组患者药物不良反应发生率比较(χ~2=0.614,P=0.433),差异无统计学意义。结论:尼可地尔对老年糖尿病并STEMI患者直接PCI的IRI具有心肌保护效应,能有效改善PCI后的心脏血流灌注,减轻心肌的IRI,改善室壁运动及左心功能,减少RA的发生,降低短期MACE发生率,且安全性好。

替格瑞洛联合阿托伐他汀和阿司匹林对急性ST段抬高型心肌梗死PCI术后心肌血流灌注的影响

目的探讨替格瑞洛联合阿托伐他汀和阿司匹林对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)经皮冠状动脉介入术(PCI)术后心肌血流灌注的影响,为其临床诊治提供参考。方法选择2015年5月—2019年3月郑州市第一人民医院收治的100例行PCI手术的STEMI的患者作为研究对象,按照治疗方法将患者分为对照组和观察组,各50例。对照组口服阿托伐他汀钙片,20 mg/次,1次/d;阿司匹林肠溶片,100 mg/次,1次/d。观察组患者在对照组治疗基础上口服替格瑞洛片,180 mg/次为初始剂量,之后90 mg/次,2次/d。共治疗2个月,随访半年。比较两组患者PCI术后即刻冠状动脉血流及心肌血流灌注指标,分析两组患者住院期间及随访6个月的心功能指标及主要不良心血管事件(MACE)。比较两组患者治疗前后血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)、血管性血友病因子(vWF)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)及血管内皮生长因子(VEGF)水平变化。结果治疗后,观察组患者PCI术后ST段回落率、TIMI血流分级3级以及TMPG3级患者均明显高于对照组,而cTFC值比对照组降低(P<0.05)。两组患者治疗后LVEF、E/A明显升高,LVEDD明显降低(P<0.05);且观察组患者治疗后上述指标改善更为显著(P<0.05)。治疗后,两组患者的血清CK-MB水平明显降低,血清VEGF、vWF及cTnI水平均明显升高(P<0.05)。治疗后,观察组患者CK-MB水平显著低于对照组,VEGF、vWF和cTnI水平显著高于对照组(P<0.05)。观察组住院期间及术后随访MACE发生率低于对照组(P<0.05)。结论替格瑞洛联合阿托伐他汀和阿司匹林可以更好改善PCI术后STEMI患者的凝血纤溶系统和心肌血流灌注,保护心功能,减少预后MACE事件的发生率,具有一定的临床应用价值。